目的研究中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）對(duì)糖氧剝奪/再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）誘導(dǎo)的人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y）損傷的保護(hù)作用。方法體外培養(yǎng)SH-SY5Y細(xì)胞,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行糖氧剝奪（OGD）6 h,再灌注（R）12 h。在再灌注時(shí)期,根據(jù)是否給予重組人MANF蛋白處理（2μmol·L-1,12 h）,將細(xì)胞分為正常對(duì)照組（NC）、NC+MANF組、OGD/R組和OGD/R+MANF組。隨后光學(xué)顯微鏡下觀察SH-SY5Y細(xì)胞形態(tài)的改變,MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,PI染色法檢測(cè)細(xì)胞死亡率,免疫印跡法檢測(cè)內(nèi)源性MANF蛋白、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78/Bi P、p-IRE1、p-e IF2α及促凋亡蛋白cleaved caspase-3和CHOP的表達(dá)。結(jié)果光學(xué)顯微鏡下可見OGD/R組SH-SY5Y細(xì)胞胞體變小、變圓,突起縮短或消失。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),MANF能明顯改善OGD/R誘導(dǎo)的SHSY... 

【文章來源】：中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2015,31(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞及主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 缺血/再灌注損傷模型的建立
        1.2.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率
        1.2.4 PI染色檢測(cè)細(xì)胞死亡率
        1.2.5 免疫印跡法檢測(cè)經(jīng)OGD/R處理后MANF蛋白、ER應(yīng)激及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 重組人MANF改善OGD/R誘導(dǎo)損傷的SH-SY5Y細(xì)胞增殖活性
    2.2 重組人MANF抑制OGD/R誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞死亡
    2.3 OGD/R誘導(dǎo)的ER應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)及MANF的作用
    2.4 OGD/R誘導(dǎo)的促凋亡蛋白表達(dá)及MANF的作用
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MANF對(duì)神經(jīng)細(xì)胞中tau蛋白過度磷酸化的抑制作用[J]. 李靜,王濤,沈玉君,方圣云,沈玉先.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2012(08)



本文編號(hào)：3107568