目的研究中腦星形膠質(zhì)細胞來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子（mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）對糖氧剝奪/再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）誘導的人神經(jīng)母細胞瘤細胞（SH-SY5Y）損傷的保護作用。方法體外培養(yǎng)SH-SY5Y細胞,對細胞進行糖氧剝奪（OGD）6 h,再灌注（R）12 h。在再灌注時期,根據(jù)是否給予重組人MANF蛋白處理（2μmol·L-1,12 h）,將細胞分為正常對照組（NC）、NC+MANF組、OGD/R組和OGD/R+MANF組。隨后光學顯微鏡下觀察SH-SY5Y細胞形態(tài)的改變,MTT法檢測細胞存活率,PI染色法檢測細胞死亡率,免疫印跡法檢測內(nèi)源性MANF蛋白、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）應激相關蛋白GRP78/Bi P、p-IRE1、p-e IF2α及促凋亡蛋白cleaved caspase-3和CHOP的表達。結果光學顯微鏡下可見OGD/R組SH-SY5Y細胞胞體變小、變圓,突起縮短或消失。進一步研究發(fā)現(xiàn),MANF能明顯改善OGD/R誘導的SHSY... 

【文章來源】：中國藥理學通報. 2015,31(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞及主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 缺血/再灌注損傷模型的建立
        1.2.3 MTT法檢測細胞存活率
        1.2.4 PI染色檢測細胞死亡率
        1.2.5 免疫印跡法檢測經(jīng)OGD/R處理后MANF蛋白、ER應激及凋亡相關蛋白的表達
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 重組人MANF改善OGD/R誘導損傷的SH-SY5Y細胞增殖活性
    2.2 重組人MANF抑制OGD/R誘導的SH-SY5Y細胞死亡
    2.3 OGD/R誘導的ER應激相關蛋白表達及MANF的作用
    2.4 OGD/R誘導的促凋亡蛋白表達及MANF的作用
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]MANF對神經(jīng)細胞中tau蛋白過度磷酸化的抑制作用[J]. 李靜,王濤,沈玉君,方圣云,沈玉先.  中國藥理學通報. 2012(08)



本文編號：3107568