背景:胰島素樣生長因子Ⅰ具有誘導間充質干細胞向軟骨細胞分化的能力,通過基因轉染的方式將胰島素生長因子Ⅰ轉染入脂肪干細胞或許能夠更好的促進脂肪干細胞向軟骨細胞分化。目的:探討胰島素樣生長因子Ⅰ基因對脂肪間充質干細胞體外定向成軟骨分化能力以及對TWEAK/Fn14信號通路的影響。方法:構建慢病毒載體p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl基因并轉染第3代人脂肪間充質干細胞,誘導細胞向軟骨分化。同時將pL VX-IRES-Zs Greenl轉染的脂肪間充質干細胞設為綠色熒光蛋白/脂肪間充質干細胞組,單純脂肪間充質干細胞設為對照組。結果與結論:與綠色熒光蛋白/脂肪間充質干細胞組和對照組相比,胰島素樣生長因子Ⅰ/脂肪間充質干細胞組細胞中TWEAK mR NA表達水平降低,而胰島素樣生長因子Ⅰ,Col2al和Sox9 mR NA的表達水平增加,Col2a1表達水平增加,基質金屬蛋白酶3以及TWEAK的表達降低。提示pL VX-IGF-I-IRES-ZsG reenl慢病毒轉染脂肪間充質干細胞后可獲得胰島素樣生長因子Ⅰ的高效表達,且能下調細胞TWEAK基因及蛋白表達,可促進體外培養(yǎng)的脂肪... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2015,19(45)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0 引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1設計
    1.2時間及地點
    1.3 材料
    1.4 方法
        1.4.1 p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl的構建與鑒定
        1.4.2含胰島素樣生長因子Ⅰ基因表達的慢病毒載體的包裝與病毒滴度的測定
        1.4.3 p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl轉染人脂肪間充質干細胞
        1.4.4脂肪間充質干細胞的誘導分化
        1.4.5甲苯胺藍和阿爾新藍染色
        1.4.6免疫細胞化學染色
        1.4.7反轉錄PCR
        1.4.8 Western-blot檢測
        1.4.9生長曲線
    1.5結局觀察指標
    1.6統(tǒng)計學分析
2 結果Results
    2.1 p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl的鑒定結果
    2.2 p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl的轉染效率
    2.3胰島素樣生長因子Ⅰ轉染的脂肪間充質干細胞向軟骨細胞分化
    2.4Ⅱ型膠原的表達
    2.5胰島素樣生長因子Ⅰ,Ⅱ型膠原（Col2a1）,Sox9和TWEAK m RNA的表達
    2.6 Col2a1,基質金屬蛋白酶3及TWEAK的表達
    2.7生長曲線
3 討論Discussion
作者貢獻:
利益沖突:
倫理問題:
文章查重:
文章外審:
學術術語:
作者聲明:
文章版權:


【參考文獻】：
期刊論文
[1]人髕下脂肪墊來源脂肪間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J]. 劉玉平,劉濤,王明明,李明,俞光榮.  中國組織工程研究. 2015(41)
[2]TWEAK誘導類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞合成MMP-3的實驗研究[J]. 夏麗萍,肖衛(wèi)國,李俊松,丁爽,魯靜.  細胞與分子免疫學雜志. 2009(01)



本文編號：3068831