真核生物中，包含至少60個DExD/H解旋酶家族成員。解旋酶是催化雙鏈核酸解旋的酶類。解旋酶還參與DNA修復(fù)以及核糖體生成、轉(zhuǎn)錄調(diào)控等RNA代謝的各個方面。近年來，發(fā)現(xiàn)越來越多的RNA解旋酶家族分子能識別RNA或RNA病毒而被看作為重要的識別器。這個家族起初以參與RNA的代謝過程而得名。但后來研究發(fā)現(xiàn)DHX9，DHX36以及DDX41等分子能識別DNA結(jié)構(gòu)或DNA病毒。然而，按照習(xí)慣，依舊延續(xù)使用RNA解旋酶的命名。dsRNA廣泛存在于自然界，許多ssRNA病毒在復(fù)制過程中也產(chǎn)生雙鏈結(jié)構(gòu)。病毒RNA作為外來抗原被宿主識別并且能激發(fā)宿主固有免疫反應(yīng)。另一方面解旋酶家族中的部分分子作為宿主固有免疫系統(tǒng)的第一道防線，通過不同接頭蛋白介導(dǎo)的信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，能及時、有效地識別外來病毒的侵犯，誘導(dǎo)一型干擾素及促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，引發(fā)抗感染免疫反應(yīng)。本文，我們將著重探討小鼠mDC抗病毒的免疫機(jī)制。我們運(yùn)用siRNA對解旋酶家族中60個成員分子進(jìn)行基因沉默，篩選出解旋酶分子DHX33。無論用長polyI:C還是短polyI:C刺激D2SC，其產(chǎn)生IFN-β的量較對照組均明顯下降。預(yù)示DHX33在mDC中... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

流感病毒A的長柄狀基因

67]。圖1.5 線性dsRNA病毒的簡易結(jié)構(gòu)圖Figure1.5 Simple structure chart of linear dsRNA virus（3）dsRNA 和 RNA 病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式1）polyI:C 進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式polyI:C 通過 L2K 介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)進(jìn)入宿主細(xì)胞。L2K 為陽離子脂質(zhì)體，與帶負(fù)電的 dsRNA 分子 polyI:C 通過靜點(diǎn)作用形成陽離子脂質(zhì)體/dsRNA 復(fù)合物。由于陽離子脂質(zhì)體過生，因此復(fù)合物帶正電。而后再次通過靜點(diǎn)作用吸附于帶負(fù)電的轉(zhuǎn)染細(xì)胞表面，隨之復(fù)合物以細(xì)胞膜融合或胞吞作用的方式進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)入細(xì)胞后首先與核內(nèi)體融合，由于脂質(zhì)體的可溶性和細(xì)胞內(nèi) PH 值的上升，促使脂質(zhì)體與復(fù)合物分離。L2K 鏈接鍵斷裂形成小分子通過細(xì)胞新陳代謝排出細(xì)胞外[71]，解離后的 polyI:C 則被核內(nèi)體的 PRRs識別啟動固有免疫反應(yīng)。2）RNA 病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式RNA 病毒通過胞飲作用進(jìn)入宿主細(xì)胞，胞飲的病毒顆粒通過 actin 依賴和/或微管依賴運(yùn)輸機(jī)制在通過核內(nèi)體囊泡時造成阻塞。使得核內(nèi)體內(nèi)部微環(huán)境 PH 值下降誘發(fā)病毒顆粒與核內(nèi)體的融合，或病毒蛋白在膜的滲入，導(dǎo)致病毒基因在細(xì)胞質(zhì)釋放[72]。另外

PRRs 作為機(jī)體免疫系統(tǒng)識別外來病原微生物侵襲時的第一道防線，能及時有別病原微生物的配體。接下來我們將討論關(guān)于 PRRs 識別 dsRNA 的信號通路機(jī)制（1）TLRs 識別 dsRNA 的機(jī)制研究1）TLR 的結(jié)構(gòu)TLRs 在 PRRs 識別 PAMPs 中占據(jù)相當(dāng)重要的位置。TLRs 的脂質(zhì)雙層內(nèi)有一蛋白結(jié)構(gòu)域，它附帶 LRRs 和 TIR。TIR 與 IL1 受體同源，能結(jié)合胞內(nèi)的信號分子外結(jié)構(gòu)域含有 LRRs 并且負(fù)責(zé)結(jié)合 PAMPs[76]。TLRs 的配體誘導(dǎo)的二聚化可以激 TIR 結(jié)構(gòu)域招募接頭蛋白啟動信號通路。 胞內(nèi)的 TIR 結(jié)構(gòu)域含有大約 150 氨基。通過特異性接頭蛋白分子 TRIF 介導(dǎo)，在 TIR 結(jié)構(gòu)域中發(fā)生信號瀑布[77]。其中細(xì)胞核內(nèi)體（樹突狀細(xì)胞，巨噬細(xì)胞以及 TLR3 轉(zhuǎn)染的 HEK293 細(xì)胞）的 TLR3[78，識別 dsRNA 及 RNA 病毒（dsRNA 病毒 reovirus; ssRNA 病毒 LCMV 和 VSV，生 dsRNA 中間物/媒介。VSV 棒狀病毒科 ssRNA，結(jié)構(gòu)上有部分 dsRNADI 顆粒[

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]陽離子脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染機(jī)制及轉(zhuǎn)染效率影響因素[J]. 陳彥祥,喬衛(wèi)紅,劉棟良,李宗石.  生物工程學(xué)報. 2007(05)



本文編號：3027737