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構(gòu)建基于胞質(zhì)分裂相關(guān)基因表達(dá)變化的新型心肌細(xì)胞增殖評估體系

發(fā)布時間:2021-02-09 01:04
  完整的細(xì)胞有絲分裂(Cell Division)過程是指細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞周期(Cell Cycle),歷經(jīng)DNA復(fù)制(DNA Replication)、細(xì)胞核分裂(Caryokinesis)和細(xì)胞質(zhì)分裂(Cytokinesis)這些重要階段。但是,哺乳動物在出生后早期心肌細(xì)胞就喪失了有效的胞質(zhì)分裂過程,最終導(dǎo)致成年個體50%以上的心肌細(xì)胞呈雙核狀態(tài)。心肌細(xì)胞僅停滯在胞核分裂階段而不進(jìn)入胞質(zhì)分裂的現(xiàn)象為準(zhǔn)確評估心肌再生能力帶來了困難。既往評估心肌細(xì)胞增殖的一些指標(biāo)如Ki67、Brdu (5-Bromo-2-deoxyUridine)、 PCNA (Proliferating cell nuclear antigen)和H3P (Phosphorylated histone H3)等主要是針對DNA復(fù)制和核分裂過程,不能客觀地反映心肌細(xì)胞是否發(fā)生了胞質(zhì)分裂過程。因此,探索精確有效的心肌細(xì)胞增殖評估方法是心臟再生研究的重要方向之一。近期的研究指出細(xì)胞周期相關(guān)基因評分(Cell Cycle Progression Score, CCP-Score)能夠準(zhǔn)確評價各種腫瘤細(xì)胞的增殖情況,從而有效判... 

【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語表
引言
    參考文獻(xiàn)
第一部分:胞質(zhì)分裂基因評分(CC-Score)系統(tǒng)的建立
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)動物
        2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3 主要試劑配制方法
        2.4 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.5 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
        3.1 胞質(zhì)分裂相關(guān)基因在不同增殖狀態(tài)下的心肌細(xì)胞的表達(dá)變化
        3.2 CC-Score對于不同增殖狀態(tài)下的心肌細(xì)胞增殖情況的評價
        3.3 MTT和Brdu法對心肌細(xì)胞增殖情況的評價
        3.4 利用血管緊張素Ⅱ和內(nèi)皮素Ⅰ對心肌細(xì)胞肥大模型的構(gòu)建
        3.5 細(xì)胞免疫熒光染色法對心肌細(xì)胞增殖情況的評價
        3.6 流式細(xì)胞周期檢測對于心肌細(xì)胞增殖情況的評價
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分:CC-Score能有效區(qū)分H9C2心肌細(xì)胞DNA復(fù)制、核分裂及完全的細(xì)胞分裂
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3 主要試劑配制方法
        2.4 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.5 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
        3.1 胞質(zhì)分裂相關(guān)基因在不同分裂狀態(tài)心肌細(xì)胞的表達(dá)變化
        3.2 CC-Score對不同分裂狀態(tài)心肌細(xì)胞的區(qū)分
        3.3 MTT法和Brdu法對不同分裂狀態(tài)心肌細(xì)胞的區(qū)分
        3.4 細(xì)胞免疫熒光染色法對不同分裂狀態(tài)心肌細(xì)胞的區(qū)分
        3.5 流式免疫抗體法對不同分裂狀態(tài)心肌細(xì)胞的區(qū)分
        3.6 流式細(xì)胞周期檢測對不同分裂狀態(tài)心肌細(xì)胞的區(qū)分
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分:應(yīng)用CC-Score評估小鼠出生后心肌再生能力的變化
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3 主要試劑配制方法
        2.4 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.5 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
        3.1 胞質(zhì)分裂相關(guān)基因在乳鼠心臟組織的表達(dá)變化情況
        3.2 細(xì)胞周期進(jìn)程相關(guān)基因在乳鼠心臟組織的表達(dá)變化情況
        3.3 CC-Score對在乳鼠心臟再生增殖情況的評價
        3.4 CCP-Score對乳鼠心臟再生增殖情況的評價
        3.5 免疫熒光染色法對乳鼠心臟再生增殖情況的評價
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號:3024789

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