本文關(guān)鍵詞：Rh缺失型D-個(gè)體血清學(xué)鑒定和RH基因分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景 Rh缺失型D--是Rh血型系統(tǒng)中一種十分罕見(jiàn)的基因變異型，其紅細(xì)胞表面只有D抗原表達(dá)，而C、c、E和e抗原表達(dá)缺失。RhD--表型個(gè)體在懷孕或輸血時(shí)極易被Rh抗原致敏產(chǎn)生針對(duì)C, c, E或e抗原的多種Rh抗體，即抗-Rh17抗體（Hr0），抗-Rh17抗體能與所有含RhCE抗原的紅細(xì)胞發(fā)生凝集，進(jìn)而引起嚴(yán)重的新生兒溶血病或溶血性輸血反應(yīng)。因此，在臨床診療過(guò)程中，Rh缺失型D--孕婦和患者輸血困難始終存在。目前，我們對(duì)Rh缺失型D--的研究尚處于初級(jí)階段，其分子遺傳機(jī)制尚不清晰。國(guó)外報(bào)道的Rh缺失型D--案例較國(guó)內(nèi)多，其產(chǎn)生原因大致分為兩種：⑴RHD基因取代RHCE基因外顯子引起RhCE抗原表達(dá)缺失；⑵RHD和RHCE基因完整，RHCE基因的轉(zhuǎn)錄活性降低引起RhCE抗原表達(dá)缺失。國(guó)內(nèi)早期的研究多局限于血清學(xué)檢測(cè)，近十年來(lái)的相關(guān)研究結(jié)果顯示，中國(guó)人群Rh缺失型D--發(fā)生機(jī)制可能為RHD和RHCE基因重組, RHCE基因外顯子區(qū)基因突變及RHCE基因部分缺失或先證者遺傳父母雙方D--單倍型基因所致。 目的 本研究通過(guò)對(duì)Rh缺失型D--個(gè)體及家庭成員的血清學(xué)特征、基因分型及其發(fā)生的分子基礎(chǔ)和遺傳特點(diǎn)進(jìn)行分析，以期發(fā)現(xiàn)新的Rh血型變異體發(fā)生的分子機(jī)制，從而積累更多的中國(guó)人群血型基因結(jié)構(gòu)和多態(tài)性相關(guān)資料，為血型基因研究技術(shù)的日益完善奠定深厚的理論基礎(chǔ)。這對(duì)于由RH基因變異引起的臨床相關(guān)疾病的診斷、治療和預(yù)防具有極其重要的價(jià)值。 方法 ⑴采用血清學(xué)方法，對(duì)Rh缺失型D--個(gè)體及家庭成員進(jìn)行ABO血型和Rh血型鑒定，通過(guò)抗球蛋白試驗(yàn)、吸收放散試驗(yàn)、抗體篩查確定Rh缺失型D--個(gè)體紅細(xì)胞表面抗原及其體內(nèi)存在的抗體。⑵運(yùn)用PCR-SSP（序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)）對(duì)Rh缺失型D--個(gè)體及其家庭成員RH基因多態(tài)性位點(diǎn)、RHD和RHCE基因外顯子以及Rhesus盒進(jìn)行基因序列擴(kuò)增，對(duì)其基因分型以及發(fā)生的分子基礎(chǔ)和遺傳特點(diǎn)進(jìn)行分析。 結(jié)果 ⑴患兒紅細(xì)胞表面存在D抗原，CE抗原完全缺失，表型為D--，其體內(nèi)存在抗-Rh17抗體，，除與自身紅細(xì)胞不發(fā)生凝集外，與所有譜細(xì)胞均發(fā)生凝集。父母紅細(xì)胞表面均存在D，C／c，E／e抗原，表型為DCCee。⑵PCR-SSP基因分型結(jié)果顯示患兒基因型為RhDCCee，與血清學(xué)不符。其父母基因型均為RhDCCee，與血清學(xué)表型相符。RHD和RHCE基因外顯子以及Rhesus盒進(jìn)行基因序列擴(kuò)增證實(shí)，患兒及其父母RHD基因外顯子無(wú)缺失，患兒RHCE基因Exon1、Exon3、Exon4和Exon7存在，Exon5和Exon6缺失，其父母親RHCE基因Exon5缺失。Rhesus盒檢測(cè)結(jié)果顯示患兒及其父母均為RH基因純合子。 結(jié)論 ⑴患兒為Rh缺失型D--個(gè)體，其父母為Rh正常表型個(gè)體。⑵RHCE基因Exon5、Exon6缺失導(dǎo)致Rh缺失型D--的產(chǎn)生。斷裂的RHCE基因無(wú)法正常表達(dá)相應(yīng)抗原產(chǎn)生Rh缺失型D--，與國(guó)內(nèi)外報(bào)道的其他Rh缺失型D--個(gè)體產(chǎn)生機(jī)制存在一定的種族和個(gè)體差異性。
【關(guān)鍵詞】：RhD-- 基因分型 PCR-SSP
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R394
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英文縮略詞表8-11
• 引言11-15
• 第一部分 RH 缺失型 D--個(gè)體血清學(xué)分析15-23
• 1.1 前言15
• 1.2 材料與方法15-18
• 1.2.1 研究對(duì)象15
• 1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑、材料和儀器15-16
• 1.2.3 研究方法16-18
• 1.3 結(jié)果18-21
• 1.3.1 血型鑒定18-19
• 1.3.2 抗球蛋白試驗(yàn)19
• 1.3.3 吸收放散試驗(yàn)19
• 1.3.4 不規(guī)則抗體篩查和鑒定19-21
• 1.4 討論21-22
• 1.5 小結(jié)22-23
• 第二部分 RH 缺失型 D--個(gè)體 RH 基因分析23-41
• 2.1 前言23-24
• 2.2 材料與方法24-33
• 2.2.1 研究對(duì)象24-25
• 2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑、材料和儀器25
• 2.2.3 研究方法25-33
• 2.3 結(jié)果33-37
• 2.3.1 RHCE 基因分型33-34
• 2.3.2 RHCE 基因外顯子序列分析34-35
• 2.3.3 RHD 基因外顯子序列分析35-36
• 2.3.4 RHD 基因 Rhesus 盒 PCR-SSP 檢測(cè)36-37
• 2.4 討論37-39
• 2.5 小結(jié)39-41
• 結(jié)論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 綜述47-61
• 參考文獻(xiàn)58-61
• 致謝61-62

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

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  本文關(guān)鍵詞：Rh缺失型D-個(gè)體血清學(xué)鑒定和RH基因分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：297333