本文關(guān)鍵詞：ZHX3基因轉(zhuǎn)染 BMSCs體外成骨能力的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探討轉(zhuǎn)錄抑制因子—鋅指蛋白和同源框3（zinc fingers and homeoboxes3，ZHX3）基因過(guò)表達(dá)對(duì)BMSCs體外成骨能力的影響。 方法 (1)原代培養(yǎng)大鼠BMSCs，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志CD34、CD29的表達(dá)情況。（2）采用ZHX3過(guò)表達(dá)慢病毒載體轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs，同時(shí)設(shè)空載病毒轉(zhuǎn)染BMSCs組及未轉(zhuǎn)染BMSCs組。MTT法觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，記錄生長(zhǎng)曲線。（3）采用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染率，并采用Westernblot檢測(cè)ZHX3蛋白表達(dá)狀況。（4）于體外培養(yǎng)，經(jīng)定向成骨誘導(dǎo)14d后采用堿性磷酸酶和茜素紅染色，觀察各組細(xì)胞的成骨能力，并同時(shí)對(duì)三組細(xì)胞進(jìn)行成脂誘導(dǎo)和成軟骨誘導(dǎo)，后分別進(jìn)行油紅O染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色，觀察ZHX3在BMSCs成脂和成軟骨方面的作用。 結(jié)果 （1）貼壁法獲得的細(xì)胞具有BMSCs表型。（2）轉(zhuǎn)染后，，ZHX3過(guò)表達(dá)組和空載病毒轉(zhuǎn)染組均表達(dá)綠色熒光，未轉(zhuǎn)染組不表達(dá)熒光，且ZHX3過(guò)表達(dá)組ZHX3基因表達(dá)顯著高于其它兩組。（3）成骨誘導(dǎo)后，ZHX3過(guò)表達(dá)、空載病毒轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染組均可見堿性磷酸酶陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞。Kaplow評(píng)分顯示前者陽(yáng)性表達(dá)顯著高于后兩者（P0.05）。ZHX3過(guò)表達(dá)組、空載病毒轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染組均可見明顯的礦化結(jié)節(jié)。前者礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量和體積均大于后兩組。（4）成脂誘導(dǎo)后，油紅O染色顯示三組細(xì)胞胞漿出現(xiàn)淡紅色顆粒，個(gè)別細(xì)胞胞漿顆粒呈現(xiàn)紅色，其胞漿內(nèi)有脂質(zhì)生成，但三組細(xì)胞間差異不大，說(shuō)明ZHX3基因在BMSCs成脂方面沒(méi)有明顯的促進(jìn)或抑制作用；成軟骨誘導(dǎo)后，Ⅱ型膠原免疫組化染色顯示三組細(xì)胞均表達(dá)Ⅱ型膠原，但是差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 ZHX3基因過(guò)表達(dá)可促進(jìn)BMSCs體外成骨能力。
【關(guān)鍵詞】：ZHX3 基因 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語(yǔ)表8-9
• 前言9-10
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-16
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-26
• 討論26-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-34
• 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)34-35
• 綜述35-46
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 在校期間科研成績(jī)46-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)介48-49

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：292199