本文關鍵詞：ZHX3基因轉染 BMSCs體外成骨能力的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探討轉錄抑制因子—鋅指蛋白和同源框3（zinc fingers and homeoboxes3，ZHX3）基因過表達對BMSCs體外成骨能力的影響。 方法 (1)原代培養(yǎng)大鼠BMSCs，觀察細胞生長狀態(tài)，流式細胞儀檢測細胞表面標志CD34、CD29的表達情況。（2）采用ZHX3過表達慢病毒載體轉染大鼠BMSCs，同時設空載病毒轉染BMSCs組及未轉染BMSCs組。MTT法觀察轉染后細胞生長狀態(tài)，記錄生長曲線。（3）采用熒光顯微鏡計數(shù)細胞轉染率，并采用Westernblot檢測ZHX3蛋白表達狀況。（4）于體外培養(yǎng)，經(jīng)定向成骨誘導14d后采用堿性磷酸酶和茜素紅染色，觀察各組細胞的成骨能力，并同時對三組細胞進行成脂誘導和成軟骨誘導，后分別進行油紅O染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色，觀察ZHX3在BMSCs成脂和成軟骨方面的作用。 結果 （1）貼壁法獲得的細胞具有BMSCs表型。（2）轉染后，，ZHX3過表達組和空載病毒轉染組均表達綠色熒光，未轉染組不表達熒光，且ZHX3過表達組ZHX3基因表達顯著高于其它兩組。（3）成骨誘導后，ZHX3過表達、空載病毒轉染組和未轉染組均可見堿性磷酸酶陽性表達的細胞。Kaplow評分顯示前者陽性表達顯著高于后兩者（P0.05）。ZHX3過表達組、空載病毒轉染組和未轉染組均可見明顯的礦化結節(jié)。前者礦化結節(jié)的數(shù)量和體積均大于后兩組。（4）成脂誘導后，油紅O染色顯示三組細胞胞漿出現(xiàn)淡紅色顆粒，個別細胞胞漿顆粒呈現(xiàn)紅色，其胞漿內有脂質生成，但三組細胞間差異不大，說明ZHX3基因在BMSCs成脂方面沒有明顯的促進或抑制作用；成軟骨誘導后，Ⅱ型膠原免疫組化染色顯示三組細胞均表達Ⅱ型膠原，但是差異沒有統(tǒng)計學意義。 結論 ZHX3基因過表達可促進BMSCs體外成骨能力。
【關鍵詞】：ZHX3 基因 細胞轉染 骨髓間充質干細胞 成骨
【學位授予單位】：遼寧醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語表8-9
• 前言9-10
• 實驗材料與方法10-16
• 實驗結果16-26
• 討論26-28
• 結論28-29
• 參考文獻29-34
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價34-35
• 綜述35-46
• 參考文獻42-46
• 在校期間科研成績46-47
• 致謝47-48
• 個人簡介48-49

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：292199