發(fā)布時(shí)間：2017-04-03 18:04

  本文關(guān)鍵詞：外源性微直流電場(chǎng)對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)血管新生的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：血管再生（angiogenesis）即新血管的形成，參與許多生理和病理過(guò)程。早在20世紀(jì)70年代初, Folkman首先提出腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移都依賴(lài)于新生血管的形成，因而抑制血管生成可能是抗腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的有效途徑。電場(chǎng)作為一個(gè)重要的信號(hào)，已被證明能夠誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞定向遷移、影響內(nèi)皮細(xì)胞的增殖以及重新定向排列，這對(duì)血管構(gòu)建和血管的延伸方向具有重要的意義，并且該過(guò)程中細(xì)胞能優(yōu)先感知電信號(hào)。因此若能通過(guò)電場(chǎng)刺激改變血管生長(zhǎng)方向，來(lái)阻斷血管為腫瘤提供的營(yíng)養(yǎng)和氧氣，最終抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，這將為不依賴(lài)藥物的抗腫瘤研究提供一個(gè)參考依據(jù)和新的視角。 為建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�，我們以小鼠主�?dòng)脈環(huán)為研究對(duì)象，分析不同培養(yǎng)條件對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)微血管樣結(jié)構(gòu)生成的影響，確定小鼠主動(dòng)脈環(huán)培養(yǎng)的最適宜條件，進(jìn)而建立小鼠主動(dòng)脈環(huán)模型。并以此模型研究外源性微直流電場(chǎng)（exogenousmicro-DC electric fields）對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)模型中細(xì)胞的遷移特征和微血管樣結(jié)構(gòu)的影響。獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： ①成功構(gòu)建小鼠主動(dòng)脈環(huán)模型 實(shí)驗(yàn)通過(guò)使用EGM、RPMI-1640、DMEM和MCDB-131四種培養(yǎng)基培養(yǎng)新鮮分離的小鼠主動(dòng)脈環(huán)，觀察并比較小鼠主動(dòng)脈環(huán)微血管樣結(jié)構(gòu)生長(zhǎng)情況。結(jié)果表明：培養(yǎng)于EGM培養(yǎng)基中的小鼠主動(dòng)脈環(huán)在第3天開(kāi)始出芽，細(xì)胞從血管環(huán)表面呈放射狀向四周延伸；多個(gè)細(xì)胞首尾相接使出芽伸長(zhǎng)或出現(xiàn)分支，即微血管樣結(jié)構(gòu)；幾個(gè)芽間交織成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，隨后開(kāi)始衰退。而培養(yǎng)于RPMI-1640、DMEM和MCDB-131三種培養(yǎng)基的小鼠主動(dòng)脈環(huán)出芽時(shí)間在第4天，生長(zhǎng)過(guò)程中出現(xiàn)的大部分是散亂的細(xì)胞或排列成的短小枝狀結(jié)構(gòu)，較難聚焦拍照�；谘芯啃枨筮x擇EGM培養(yǎng)基，建立小鼠主動(dòng)脈環(huán)模型。 ②外源微直流電刺激指導(dǎo)血管細(xì)胞的定向遷移 實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)細(xì)胞施加不同強(qiáng)度的電場(chǎng)（0、200mV/mm、300mV/mm）來(lái)分析細(xì)胞的遷移特征。結(jié)果表明：在電場(chǎng)作用下，細(xì)胞朝向陽(yáng)極方向遷移，且細(xì)胞具有隨電壓增大而增加的趨電性，主要表現(xiàn)為：0mV/mm、200mV/mm、300mV/mm電場(chǎng)刺激下的細(xì)胞位移速度（Displacement speed）分別是0.746±0.034μm/min、1.213±0.036μm/min、1.355±0.034μm/min；趨電方向性（Directedness）分別是0.06±0.06、0.628±0.036、0.708±0.029；細(xì)胞運(yùn)動(dòng)持續(xù)性(Persistency)分別是0.517±0.021、0.726±0.012、0.772±0.01。 ③外源微直流電刺激指導(dǎo)微血管樣結(jié)構(gòu)的定向生長(zhǎng) 實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)新生的微血管樣結(jié)構(gòu)施加200mV/mm的電場(chǎng)來(lái)分析微血管樣結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)情況，包括微血管樣結(jié)構(gòu)偏轉(zhuǎn)的角度和伸縮的長(zhǎng)度。結(jié)果表明：外源微直流電刺激可引起微血管樣結(jié)構(gòu)朝向陽(yáng)極發(fā)生偏轉(zhuǎn)。200mV/mm電場(chǎng)刺激下，微血管樣結(jié)構(gòu)在2h后的朝向陽(yáng)極偏轉(zhuǎn)的角度為6.736±2.264°；4h后的凈偏轉(zhuǎn)角度為8.86±2.745°；6h后的凈偏轉(zhuǎn)角度為7.83±2.975°。此外，我們還分析了電刺激對(duì)微血管長(zhǎng)度的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，外源微直流電刺激對(duì)微血管樣結(jié)構(gòu)長(zhǎng)度的影響無(wú)顯著差異。
【關(guān)鍵詞】：血管再生 小鼠主動(dòng)脈環(huán) 外源性電場(chǎng) 細(xì)胞遷移 微血管樣結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：云南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R363
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 符號(hào)說(shuō)明7-8
• 目錄8-11
• 第1章 緒論11-19
• 1.1 微血管模型11-13
• 1.1.1 體內(nèi)模型11-12
• 1.1.2 體外模型12-13
• 1.2 主動(dòng)脈環(huán)模型的研究現(xiàn)狀13-14
• 1.3 電信號(hào)的作用及意義14-16
• 1.3.1 內(nèi)源性電信號(hào)14-15
• 1.3.2 外源性電信號(hào)對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)15-16
• 1.4 研究的目的及意義16-17
• 1.4.1 研究的目的16-17
• 1.4.2 研究的意義17
• 1.5 研究?jī)?nèi)容和方法17-19
• 1.5.1 研究?jī)?nèi)容17
• 1.5.2 實(shí)驗(yàn)方案17-19
• 第2章 小鼠主動(dòng)脈環(huán)模型的建立19-29
• 2.1 引言19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑、材料和儀器設(shè)備19-21
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料19
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑19-20
• 2.2.3 培養(yǎng)基的配置20
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備20-21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟21-22
• 2.3.1 小鼠主動(dòng)脈環(huán)的制備21
• 2.3.2 小鼠主動(dòng)脈環(huán)的培養(yǎng)21-22
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-27
• 2.4.1 小鼠主動(dòng)脈環(huán)在 EGM 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況22-23
• 2.4.2 小鼠主動(dòng)脈環(huán)在 RPMI-1640 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況23-24
• 2.4.3 小鼠主動(dòng)脈環(huán)在 DMEM 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況24-25
• 2.4.4 小鼠主動(dòng)脈環(huán)在 MCDB-131 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況25-27
• 2.5 討論27-29
• 第3章 外源微直流電場(chǎng)對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)細(xì)胞遷移的影響29-41
• 3.1 引言29-30
• 3.2 實(shí)驗(yàn)試劑、材料和儀器設(shè)備30-31
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料30
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑30-31
• 3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備31
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟31-34
• 3.3.1 小鼠主動(dòng)脈環(huán)的培養(yǎng)31-32
• 3.3.2 電場(chǎng)刺激設(shè)備的制作32
• 3.3.3 暴露于外源性電場(chǎng)實(shí)驗(yàn)處理32-34
• 3.3.4 圖像采集方法34
• 3.3.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理以及參數(shù)計(jì)算34
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-39
• 3.5 討論39-41
• 第4章 外源微直流電場(chǎng)對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)微血管樣結(jié)構(gòu)生長(zhǎng)情況的影響41-52
• 4.1 引言41
• 4.2 材料與方法41-44
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料41
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法41-44
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-50
• 4.3.1 外源微直流電場(chǎng)對(duì)微血管樣結(jié)構(gòu)延伸方向的影響44-47
• 4.3.2 外源微直流電場(chǎng)對(duì)微血管樣結(jié)構(gòu)長(zhǎng)度的影響47-50
• 4.4 討論50-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-58
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文和研究成果58-59
• 致謝59

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  本文關(guān)鍵詞：外源性微直流電場(chǎng)對(duì)小鼠主動(dòng)脈環(huán)血管新生的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：284730