本文關(guān)鍵詞：多巴胺能神經(jīng)營養(yǎng)因子真核表達(dá)、純化及多克隆抗體制備

  更多相關(guān)文章： CDNF 多克隆抗體 鎳柱親和層析 帕金森病

【摘要】：目的:獲得具有活性的腦多巴胺能神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)蛋白并制備CDNF多克隆抗體。方法:選用VR1012作為真核表達(dá)載體,在HEK293T細(xì)胞中表達(dá)帶有his標(biāo)簽的CDNF蛋白,鎳柱親和層析進(jìn)行純化,SDS-PAGE檢測純化情況,Western blot鑒定蛋白的正確性,MTT檢測CDNF蛋白對PC12細(xì)胞的保護(hù)活性。免疫新西蘭大白兔,制備多克隆抗體。結(jié)果:構(gòu)建的p VR1012-CDNF-his在HEK 293T細(xì)胞中高效分泌表達(dá),鎳柱親和層析獲得純度90%以上的CDNF蛋白,MTT結(jié)果顯示純化獲得的蛋白具有對PC12細(xì)胞的保護(hù)作用。免疫動物后,成功制備出CDNF多克隆抗體。結(jié)論:通過HEK293T細(xì)胞中表達(dá)-鎳柱親和層析獲得具有純度較高且具有生物活性的CDNF蛋白,并成功制備多克隆抗體以方便后續(xù)對于CDNF應(yīng)用及相關(guān)機(jī)制的研究。
【作者單位】： 吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院艾滋病疫苗國家工程實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： CDNF 多克隆抗體 鎳柱親和層析 帕金森病
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31300756,81472816) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃青年科研基金項(xiàng)目(20140520007JH)資助
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 1本文受國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31300756,81472816)和吉林省科技發(fā)展計(jì)劃青年科研基金項(xiàng)目(20140520007JH)資助。帕金森病(Parkinson's disease,PD)是目前世界上第二大神經(jīng)退行性疾病,在50歲以上人群中患病率顯著上升[1-3]。PD最重要的病理特征是黑質(zhì)致密部多巴能神經(jīng)元大量減

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 唐潔;孫平;章曉聯(lián);;人CD59基因克隆、原核表達(dá)及其多克隆抗體的制備[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年10期

2 吳玉;蔡媛媛;徐霞;林云恩;;人Ⅱ型高爾基體膜蛋白73多克隆抗體的制備及免疫學(xué)鑒定[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年02期

3 張娜;錢琨;朱明月;高愛俊;邵紅霞;金文杰;秦愛建;;雞源性高遷移率族蛋白B1多克隆抗體的制備及應(yīng)用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2014年03期

4 安薇;徐霞;;人脂聯(lián)素球狀結(jié)構(gòu)域基因的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備[J];中國免疫學(xué)雜志;2011年09期

5 秦偉;毛朝明;王勝軍;吳蔚;牟笑;許化溪;包丹霞;;人UL16結(jié)合蛋白3的原核表達(dá)及其多克隆抗體制備[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年05期

6 王春苗;賈天軍;;豚鼠衣原體GPIC0474多克隆抗體制備[J];河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年03期

7 賀貞;林東子;李觀強(qiáng);馬衛(wèi)列;丁航;張志珍;;H5N1亞型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗體的制備及鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2012年16期

8 薛一;孫靜;劉夢蘭;黃瓊;杜新麗;張日華;劉云;;S100A16基因的原核表達(dá)和多克隆抗體制備[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年10期

9 臧林泉;邱鵬新;肖茹;顏光美;;YZ-2蛋白的生物信息學(xué)分析及其多克隆抗體制備[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2006年02期

10 孫慎俠;張革;倫永志;王芳;;人宮頸癌致癌基因的原核表達(dá)與多克隆抗體制備[J];中國醫(yī)療前沿;2008年15期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 高t熻，

本文編號：1108499