本文關(guān)鍵詞：腦缺血再灌誘導(dǎo)的TIGAR對星形膠質(zhì)細胞的作用及其機制研究

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【摘要】：目的:觀察小鼠短暫局灶性腦缺血時TIGAR對于星形膠質(zhì)細胞的保護作用。研究在缺血再灌損傷后的星形膠質(zhì)細胞內(nèi)TIGAR與NF-κB的作用機制以及其對炎癥反應(yīng)的影響。方法:采用小鼠短暫性大腦中動脈阻塞再灌注(transient middle cerebral occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型和體外培養(yǎng)的原代星形膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)模型。在小鼠缺血側(cè)腦組織中使用免疫熒光法,在培養(yǎng)的星膠細胞OGD/R模型中用Western blot檢測缺血再灌后星形膠質(zhì)細胞內(nèi)TIGAR蛋白含量的變化。用構(gòu)建的過表達TIGAR和沉默TIGAR的腺病毒感染原代星形膠質(zhì)細胞,使用CCK-8和LDH試劑盒檢測TIGAR對OGD再灌損傷的星形膠質(zhì)細胞的保護作用。運用NADPH/NADP+和GSH/GSSG試劑盒檢測過表達或沉默TIGAR后的缺血再灌后腦皮層和OGD/R處理后的星形膠質(zhì)細胞內(nèi)NADPH和GSH水平變化,用DHE染色法檢測星形膠質(zhì)細胞內(nèi)的ROS變化。同時用Western blot和elisa檢測OGD/R 24h后星形膠質(zhì)細胞內(nèi)IL-1β,TNF-α以及iNOS和COX-2的含量變化,在缺血再灌腦組織中使用免疫熒光法,對GFAP與IL-1β和COX-2進行共定位。在培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞內(nèi),過表達或沉默TIGAR后,用Western blot檢測缺血再灌后,IκBα和p-IκBα變化的差異性,用核質(zhì)分離和Western blot檢測細胞核內(nèi)NF-κB水平的變化。結(jié)果:腦缺血再灌后TIGAR在星形膠質(zhì)細胞內(nèi)的表達增加。用構(gòu)建的過表達或干擾TIGAR的腺病毒侵染原代星形膠質(zhì)細胞能有效地增加或降低TIGAR的表達。在星形膠質(zhì)細胞OGD/R模型中,過表達TIAGR能顯著地減少OGD/R誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細胞的死亡;干擾TIGAR加重OGD/R誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細胞損傷。在缺血再灌的體內(nèi)外模型中,過表達TIGAR顯著地抑制OGD/R誘導(dǎo)的細胞內(nèi)NADPH,GSH水平的降低以及ROS水平的增強;干擾TIGAR則促進細胞內(nèi)NADPH,GSH水平的降低以及ROS水平的增強。在動物及細胞模型中,過表達TIGAR降低缺血再灌誘導(dǎo)的IL-1β,TNF-α以及iNOS和COX-2的水平;干擾TIGAR增強其誘導(dǎo)的IL-1β,TNF-α以及iNOS和COX-2的水平。在原代星形膠質(zhì)細胞OGD再灌注的早期,過表達TIGAR降低OGD/R誘導(dǎo)的p-IκB的活化和NF-κB的入核;干擾TIGAR增強OGD/R誘導(dǎo)的p-IκB的活化。結(jié)論:小鼠腦缺血再灌注后TIGAR對星形膠質(zhì)細胞發(fā)揮保護作用,其作用機制可能與增強內(nèi)源性抗氧化劑NADPH抑制ROS,抑制NF-κB通路的激活,減輕炎癥反應(yīng)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血再灌 TIGAR 炎癥 NF-κB
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R743.3
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-12
• 一、本課題研究的理論基礎(chǔ)及國內(nèi)外現(xiàn)狀9-11
• 1、研究抗缺血性腦中風(fēng)的重要性9
• 2、腦缺血再灌注損傷的病理生理機制9
• 3、星形膠質(zhì)細胞在腦缺血損傷中的作用9-10
• 4、NF-κB作為腦缺血治療的新靶點10
• 5、TIGAR的研究現(xiàn)狀10-11
• 二、本課題的研究內(nèi)容11
• 三、本課題的創(chuàng)新點11
• 四、本課題的研究意義與價值11-12
• 第一部分 TIGAR對小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷中星形膠質(zhì)細胞的保護作用12-24
• 第一節(jié) TIGAR在腦缺血再灌注后在星形膠質(zhì)細胞內(nèi)激活12-19
• 材料和方法12-16
• 結(jié)果16-18
• 附圖18-19
• 小結(jié)19
• 第二節(jié) TIGAR對小鼠皮層星形膠質(zhì)細胞OGD誘導(dǎo)的細胞損傷的保護作用19-24
• 材料和方法19-20
• 結(jié)果20-22
• 附圖22-23
• 小結(jié)23-24
• 第二部分 TIGAR保護腦缺血再灌注損傷的分子機制24-38
• 第一節(jié) TIGAR與PPP代謝途徑相關(guān)24-28
• 材料和方法24-25
• 結(jié)果25-27
• 附圖27-28
• 小結(jié)28
• 第二節(jié) TIGAR對小鼠腦缺血再灌注損傷所致炎癥反應(yīng)的影響28-32
• 材料和方法28-29
• 結(jié)果29-31
• 附圖31-32
• 小結(jié)32
• 第三節(jié) TIGAR對于星形膠質(zhì)細胞的OGD復(fù)灌損傷的保護作用與NF-ΚB信號通路的關(guān)系32-38
• 材料和方法32-33
• 結(jié)果33-35
• 附圖35-37
• 小結(jié)37-38
• 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-45
• 綜述45-49
• 參考文獻47-49
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文49-50
• 致謝50-51

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1 項紅兵,田玉科;星形膠質(zhì)細胞與疼痛敏化調(diào)控[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2003年09期

2 劉慧,王小軍,胡榮,楊忠,蔡文琴;星形膠質(zhì)細胞[J];生理科學(xué)進展;2004年01期

3 張敬軍;;星形膠質(zhì)細胞的研究[J];中國藥理學(xué)通報;2006年07期

4 陳彬;劉寬;王偉;;成年大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子表達的差異研究[J];卒中與神經(jīng)疾病;2007年05期

5 沈維高;何欣;王振江;;星形膠質(zhì)細胞的生物學(xué)功能及其與疾病的關(guān)系研究進展[J];北華大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年06期

6 ;英國科學(xué)家確定星形膠質(zhì)細胞新功能[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2010年27期

7 靳哲;趙忠新;;星形膠質(zhì)細胞在癲癇發(fā)病中的作用研究[J];世界臨床藥物;2012年01期

8 李軍杰,張致身;短暫性腦缺血發(fā)作后海馬區(qū)星形膠質(zhì)細胞形態(tài)學(xué)研究[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1998年04期

9 解旭東,田國紅;星形膠質(zhì)細胞與癲癇[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;1999年01期

10 莫永炎,姜勇,陳瑗;腦星形膠質(zhì)細胞生物學(xué)功能研究進展[J];生理科學(xué)進展;2002年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉慶瑩;趙珠峰;朱長庚;;星形膠質(zhì)細胞在癲癇復(fù)發(fā)中的作用[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

2 唐愛輝;王同飛;王世強;;星形膠質(zhì)細胞鈣活動:腦細胞網(wǎng)絡(luò)中的第二興奮系統(tǒng)?[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

3 池美珠;陳超;錢燕;李劍敏;吳步猛;;產(chǎn)前重復(fù)激素治療對星形膠質(zhì)細胞發(fā)育的影響[A];浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

4 魏爾清;;半胱氨酰白三烯受體對星形膠質(zhì)細胞功能的調(diào)節(jié)作用[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

5 吳建云;王鮮忠;王劍;諶劍波;范光麗;張家驊;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

6 趙玉武;程曉娟;;星形膠質(zhì)細胞與腦水腫的形成[A];山東省2013年神經(jīng)內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國神經(jīng)免疫大會2013論文匯編[C];2013年

7 董其平;柴真;;谷氨酸對培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞的鈣活動的影響[A];“基因、進化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會暨中國生理學(xué)會第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2009年

8 曾俊;李康生;;柯薩奇病毒感染星形膠質(zhì)細胞及細胞因子變化研究[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點研討會論文集[C];2010年

9 鮑歡;徐曉云;顧曉波;徐霞紅;胡暉;;缺氧后水通道蛋白4在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞表達變化的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

10 熊加祥;白云;宋敏;王艷艷;楊曉亞;;星形膠質(zhì)細胞表達免疫分子維持大腦免疫穩(wěn)態(tài)[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

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1 記者 胡德榮;星形膠質(zhì)細胞由“天使”變“魔鬼”原因找到[N];健康報;2012年

2 記者 劉海英;星形膠質(zhì)細胞可調(diào)節(jié)呼吸強度[N];科技日報;2010年

3 劉霞;腦內(nèi)星形膠質(zhì)細胞在實驗室培育成功[N];科技日報;2011年

4 汪敏華;大腦星形膠質(zhì)細胞有兩種新功能[N];解放日報;2003年

5 吳一福;黃芪可調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細胞“時間模式”[N];中國醫(yī)藥報;2005年

6 南方日報記者 曹斯　實習(xí)生 趙莞 張寧 通訊員 鄒瑩 張淼;用ATP對抗不快樂[N];南方日報;2013年

7 記者 班瑋;德國腦細胞再生研究取得新進展[N];人民日報;2010年

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1 曾招;離子通道TRPM7調(diào)節(jié)細胞生理的分子機制研究[D];蘇州大學(xué);2014年

2 黃維一;骨髓間充質(zhì)干細胞旁分泌因子對缺血性腦卒中后星形膠質(zhì)細胞活性及功能的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 楊俊華;星形膠質(zhì)細胞來源的ATP促進丘腦中的突觸刪除[D];浙江大學(xué);2015年

4 鄧雅婷;龍膽苦苷鎮(zhèn)痛與抗抑郁的中樞作用及機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 李新;星形膠質(zhì)細胞NDRG2在七氟烷預(yù)處理神經(jīng)保護作用中的機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 鐘志宏;亞鐵離子對星形膠質(zhì)細胞的損傷作用及香芹酚在實驗性腦出血中的神經(jīng)保護作用[D];上海交通大學(xué);2014年

7 張建成;星形膠質(zhì)細胞來源的IL-17A對缺血性腦卒中神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的影響及機制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

8 洪洋;孕酮對Aβ所致星形膠質(zhì)細胞炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

9 凌云志;帕瑞昔布減輕過氧化氫誘導(dǎo)的大鼠星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激損傷的作用及機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 徐進;腦出血后星形膠質(zhì)細胞AQP4內(nèi)化及其機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

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1 龔佩佩;磷酸化MSK1在星形膠質(zhì)細胞炎癥活化過程中的作用的研究[D];南通大學(xué);2013年

2 何潔玉;糖皮質(zhì)激素對星形膠質(zhì)細胞分泌GnRH的調(diào)控機制[D];西南大學(xué);2015年

3 張麗麗;脂肪基質(zhì)細胞誘導(dǎo)分化為星形膠質(zhì)細胞過程中線粒體凋亡與自噬的關(guān)系[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

4 燕茹;高同型半胱氨酸血癥致ApoE~(-/-)小鼠腦血管、星形膠質(zhì)細胞及神經(jīng)元損傷作用研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

5 米鵬霞;P物質(zhì)對星形膠質(zhì)細胞的活化作用及機制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊志奇;小鼠皮層內(nèi)移植膠質(zhì)細胞形態(tài)及功能重建研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

7 陳雅南;敲除星形膠質(zhì)細胞的dicer對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響[D];杭州師范大學(xué);2015年

8 馬輝;星形膠質(zhì)細胞上酸敏感離子通道1a在顳葉癲癇發(fā)生中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 周亞蘭;IFN-γ介導(dǎo)T細胞參與炎性痛慢性化機制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 鄧子輝;瘦素抑制星形膠質(zhì)細胞縫隙連接蛋白-43表達改善腦缺血再灌注損傷的機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

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本文編號：994057