發(fā)布時(shí)間：2017-10-06 03:48

  本文關(guān)鍵詞：環(huán)孢菌素A對(duì)腦缺血再灌注后血腦屏障的影響

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【摘要】：目的:通過建立小鼠腦缺血再灌注模型,腹腔注入不同劑量的環(huán)孢菌素A后,觀察小鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)功能評(píng)分、梗死灶、腦組織水含量及伊文思藍(lán)滲出量的變化情況,并用Western Blot法分析CypA、Akt、NF-κB、MMP9、Claudin-5等變化趨勢(shì),以探討環(huán)孢菌素A(Cyclosporin A,CsA)對(duì)小鼠腦缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)后血腦屏障的影響及其機(jī)制,為更好的治療腦缺血提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.采用尼龍線栓法復(fù)制小鼠右側(cè)腦局灶缺血再灌注(I/R)MCAO模型;2.將C57、apoe-/-小鼠分別等量隨機(jī)分為:假手術(shù)組、腦缺血再灌注(I/R)組、溶劑(Vehicle)組、小劑量(10mg/kg)Cs A組、大劑量(20mg/kg)CsA組。分別于術(shù)后1d、3d、5d、7d不同時(shí)間點(diǎn)以不同的方式處死;3.術(shù)后評(píng)價(jià)小鼠腦缺血再灌注模型是否成功,并于各個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分及轉(zhuǎn)角試驗(yàn);4.2%2,3,5,-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色檢測(cè)小鼠腦梗死灶面積;5.干濕重法測(cè)定各組小鼠不同時(shí)間點(diǎn)腦組織水含量;6.靜脈注入伊文思藍(lán)(Evans blue,EB)后,通過檢測(cè)其光密度值(OD值)及滲出情況分析血腦屏障通透性。7.Western Blot法分析CypA、Akt、NF-κB、MMP9、Claudin-5等變化趨勢(shì)。結(jié)果:1.神經(jīng)功能評(píng)價(jià):假手術(shù)組小鼠在術(shù)后未出現(xiàn)神經(jīng)功能障礙,其余各組在不同時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)功能障礙,與假手術(shù)組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01);大劑量CsA組與小劑量CsA組比較各時(shí)間點(diǎn)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2.梗死灶面積:與i/r組比較,小劑量csa組與大劑量csa組腦組織梗死灶面積明顯減少(p0.01),vehicle組則無明顯變化(p0.05);大劑量csa組梗死灶面積與小劑量csa組相比均有減少(p0.05);apoe-/-各組與c57各組梗死灶面積相比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。3.腦組織水含量:c57、apoe-/-小鼠各組腦水含量與其假手術(shù)組相比均明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.01);與i/r組相比,vehicle組無明顯差異(p0.05),而大劑量csa組及小劑量csa組較其明顯減少(p0.05),且大劑量csa組較小劑量csa組腦組織水含量少(p0.05);apoe-/-小鼠腦組織水含量均高于與其對(duì)應(yīng)的與c57小鼠組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。4.伊文思藍(lán):c57、apoe-/-小鼠各組伊文思藍(lán)od值及滲出程度與其假手術(shù)組相比均明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.01);與i/r組伊文思藍(lán)od值及滲出程度相比,vehicle組無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),而大劑量csa組及小劑量csa組較其均明顯減少(p0.01),且大劑量csa組較小劑量csa組小(p0.05);apoe-/-小鼠組伊文思藍(lán)od值及滲出程度均高于與其對(duì)應(yīng)的與c57小鼠組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。5.相關(guān)蛋白表達(dá):與假手術(shù)組相比較,其余各組p-akt、cyclophilina(cypa)、nk-kb、mmp-9表達(dá)均不同程度上調(diào)(p0.05),claudin-5表達(dá)水平下調(diào)(p0.05);與i/r組相比,csa干預(yù)組p-akt、cyclophilina(cypa)、nk-kb、mmp-9表達(dá)水平相對(duì)減少(p0.05),且大劑量csa組較小劑量csa組表達(dá)減弱(p0.05),而claudin-5表達(dá)水平上調(diào)(p0.05),且大劑量csa組較小劑量csa組表達(dá)上調(diào)(p0.05);vehicle組與i/r組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。結(jié)論:1.大腦中動(dòng)脈區(qū)是人腦梗塞的好發(fā)部位。本文選擇的線栓法制作小鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型,其梗塞范圍較穩(wěn)定,不開顱、可準(zhǔn)確控制缺血再灌注時(shí)間,并且其病理生理變化過程與人體相似,故該模型是研究腦缺血再灌注較為理想的動(dòng)物模型。2.小鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型經(jīng)CsA治療后,出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀好轉(zhuǎn),梗死灶面積減小,腦水腫減輕,血腦屏障通透性減小及炎性滲出減少,可起到腦保護(hù)的作用;3.CsA可能通過抑制Akt/NF-κB途徑,促進(jìn)Claudin-5表達(dá)上調(diào),保護(hù)血腦屏障(BBB)結(jié)構(gòu)和功能的完整性,減輕腦水腫及滲出,從而減輕MCAO小鼠模型的繼發(fā)性腦損傷。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血再灌注 環(huán)孢菌素A 血腦屏障
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R743.3
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-19
• 結(jié)果19-28
• 討論28-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-47
• 英漢縮略詞對(duì)照表47-48
• 致謝48-49
• 綜述49-62
• 參考文獻(xiàn)57-62

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 孫強(qiáng);韓翠紅;孫學(xué)軍;;缺血預(yù)適應(yīng)和后適應(yīng)的觸發(fā)因子研究進(jìn)展[J];海軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年02期

2 羅海蕓;李樹清;;樹，

本文編號(hào)：980549