本文關鍵詞：神經(jīng)干細胞移植對帕金森鼠黑質內鐵和銅藍蛋白表達水平的影響

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【摘要】：帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是中老年人常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。近年來,PD發(fā)病率呈明顯上升的趨勢,嚴重影響中老年患者的晚期生活質量。目前大量的研究提示黑質內鐵的沉積和銅藍蛋白含量的下降可能是PD腦內多巴胺能神經(jīng)元退行性變的關鍵因素,而神經(jīng)干細胞(Neural stem cells,NSCs)旺盛的增殖能力和多向分化細胞特性能夠彌補丟失的多巴胺能神經(jīng)元,進而改善PD運動障礙,成為PD細胞替代治療的可行性方案之一。但是較少研究涉及NSCs移植后對黑質內鐵的沉積和銅藍蛋白的表達等病理微環(huán)境的影響。NSCs的增殖和神經(jīng)細胞的可塑性似乎與PD疾病進程以及內環(huán)境損傷的嚴重性密切相關。因此,我們的研究將探討NSCs移植到黑質靶點對PD腦內微環(huán)境尤其是鐵和銅藍蛋白代謝的改變以及對PD運動癥狀的影響。我們利用腦立體定位技術將活性良好的子代NSCs準確地移植到PD鼠黑質內,通過免疫組化染色計數(shù)正常對照組、PD模型組、NSCs移植組黑質內鐵染色陽性細胞、銅藍蛋白陽性細胞、酪氨酸羥化酶陽性細胞;Western blot和RT-PCR技術分別反映銅藍蛋白和酪氨酸羥化酶蛋白翻譯和基因表達水平;阿撲嗎啡誘發(fā)旋轉行為評價運動障礙的改變。研究結果發(fā)現(xiàn),NSCs移植4周后,與對照組相比,模型組黑質內鐵染色陽性細胞數(shù)明顯增多,酪氨酸羥化酶和銅藍蛋白陽性細胞數(shù)、蛋白翻譯和mRNA表達水平均降低。而與模型組相比,移植組鐵染色陽性細胞數(shù)減少,酪氨酸羥化酶和銅藍蛋白陽性細胞數(shù)、蛋白翻譯和mRNA表達均增高,但未達到正常水平。移植組在NSCs移植2周后,PD鼠旋轉行為較移植前明顯改善,而且持續(xù)到第8周,而模型組旋轉變化差別無統(tǒng)計學意義。這些研究結果提示PD鼠黑質內NSCs移植是可行的,移植的NSCs能夠分化產生多巴胺能神經(jīng)元,并且通過增加銅藍蛋白表達、減少鐵的沉積發(fā)揮神經(jīng)保護作用,進而改善行為學障礙。
【關鍵詞】：帕金森病 神經(jīng)干細胞 鐵 銅藍蛋白 酪氨酸羥化酶
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R742.5
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 緒論12-23
• 1.1 帕金森病概述12-13
• 1.2 鐵離子13-17
• 1.3 氧化應激反應17-18
• 1.4 銅藍蛋白18-19
• 1.5 神經(jīng)干細胞19-21
• 1.6 酪氨酸羥化酶21-23
• 第二章 實驗材料與方法23-34
• 2.1 實驗材料23-28
• 2.1.1 實驗動物和細胞23
• 2.1.2 主要藥品和試劑23-27
• 2.1.3 主要儀器和耗材27-28
• 2.2 實驗方法28-33
• 2.2.1 帕金森病模型建立28
• 2.2.2 旋轉實驗誘發(fā)28
• 2.2.3 神經(jīng)干細胞取材、培養(yǎng)28-29
• 2.2.4 神經(jīng)干細胞換液、傳代29
• 2.2.5 神經(jīng)干細胞移植29-30
• 2.2.6 行為學實驗30
• 2.2.7 腦組織取材和切片30
• 2.2.8 鐵染色30
• 2.2.9 銅藍蛋白染色30-31
• 2.2.10 酪氨酸羥化酶染色31
• 2.2.11 鏡下細胞計數(shù)31
• 2.2.12 Western blot31
• 2.2.13 Real Time  PCR31-33
• 2.3 統(tǒng)計學處理33-34
• 第三章 實驗結果34-41
• 3.1 神經(jīng)干細胞培養(yǎng)34-35
• 3.2 行為學測試35-36
• 3.3 鐵含量36-37
• 3.4 銅藍蛋白表達37-39
• 3.5 酪氨酸羥化酶表達39-41
• 第四章 討論41-44
• 第五章 結論44-45
• 第六章 結束語45-46
• 6.1 主要工作與創(chuàng)新點45
• 6.2 后續(xù)研究工作45-46
• 參考文獻46-54
• 附錄54-60
• 致謝60-61
• 攻讀碩士學位期間已發(fā)表或錄用的論文61
• 攻讀碩士學位期間正在審稿的論文61

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2 陳[?;蔣雨平;;銅藍蛋白的代謝和低銅藍蛋白血癥的臨床表現(xiàn)[J];中國臨床神經(jīng)科學;2006年01期

3 宮春勇;;銅藍蛋白及其臨床應用[J];醫(yī)學綜述;2006年13期

4 陳冠杰;銅藍蛋白[J];生理科學進展;1982年01期

5 顧其勝;;人銅藍蛋白的抗腫瘤及中和毒性激素活性[J];國外醫(yī)學.生物制品分冊;1982年05期

6 張梅林;應啟龍;王琳芳;梁植權;;銅藍蛋白氧化酶活性染色方法的研究和中國人群體中銅藍蛋白變異體的基因頻率[J];中國醫(yī)學科學院學報;1983年03期

7 ;血清中銅藍蛋白的單向免疫擴散測定法及正常值[J];新醫(yī)藥通訊;1979年03期

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9 張曉琴;王殿風;;幾種塵肺病人血中銅藍蛋白含量的比較[J];預防醫(yī)學情報;1987年04期

10 魏美文,隋星衛(wèi),史冬梅,傅曾矩;應用速率散射濁度法測定小兒銅藍蛋白含量[J];山東醫(yī)科大學學報;1989年04期

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5 鄭志勇;帕金森病與銅藍蛋白基因的相關性研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2013年

6 孫靜;銅藍蛋白的電化學研究[D];中南大學;2010年

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本文編號：951018