本文關(guān)鍵詞：體內(nèi)Period2基因調(diào)控X線照射后人膠質(zhì)瘤細(xì)胞MDM2基因致凋亡的分子機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： Period2 U343 X線照射 凋亡 MDM2

【摘要】：目的體內(nèi)探究生物鐘基因Period2的低表達(dá)在X線照射引起的膠質(zhì)瘤凋亡過(guò)程中起到的作用及其分子調(diào)控機(jī)制。方法Period2-sh RNA慢病毒、Control-sh RNA非特異性干擾慢病毒各自感染人p53野生型人膠質(zhì)瘤U343細(xì)胞后,sh RNA-Period2細(xì)胞組(Period2低表達(dá))及對(duì)照病毒細(xì)胞組由puromycin篩選出;sh RNA-Period2細(xì)胞組、Control對(duì)照病毒細(xì)胞組及Control空白處理細(xì)胞組分別注射裸鼠頸后皮下,等到各組裸鼠成瘤的瘤塊體積達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)(1000mm3),給予10Gy X線照射3組膠質(zhì)瘤并以此時(shí)為0時(shí),分別于24h、48h、72h后,處死裸鼠并收集瘤體組織。TUNEL技術(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組凋亡情況、磷酸化H2AX含量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組的DNA的損傷情況,使用q RT-PCR及Western Blot檢測(cè),X線照射后,實(shí)驗(yàn)各組中與DNA損傷-修復(fù)重要因子ATM、凋亡相關(guān)的p53、MDM2以及c-myc等的含量。結(jié)果細(xì)胞實(shí)驗(yàn)可見(jiàn)Period2-sh RNA慢病毒有效降低在人膠質(zhì)瘤U343細(xì)胞中生物鐘基因Period2的表達(dá)含量;X線處理后,在X線處理后的24h、48h、72h各個(gè)時(shí)間點(diǎn),跟Control實(shí)驗(yàn)組比較,Period2低表達(dá)的實(shí)驗(yàn)組DNA損傷更輕,凋亡率更低,且隨著時(shí)間的增加,Period2低表達(dá)組的DNA損傷和細(xì)胞凋亡都開(kāi)始遞增;隨Period2表達(dá)量的下調(diào),ATM表達(dá)水平減少,p53表達(dá)水平減少,而c-myc的表達(dá)水平增加,MDM2的表達(dá)水平增加。結(jié)論我們實(shí)驗(yàn)中人U343膠質(zhì)瘤對(duì)X線的敏感性的降低是通過(guò)下調(diào)生物鐘基因Period2的表達(dá)達(dá)到的;并通過(guò)調(diào)控ATM、p53、c-myc、MDM2等的表達(dá)減弱了ATM-p53-MDM2通路對(duì)凋亡的促進(jìn)作用,抑制了膠質(zhì)瘤的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：Period2 U343 X線照射 凋亡 MDM2
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符號(hào)說(shuō)明8-10
• 前言10-12
• 實(shí)驗(yàn)材料及方法12-28
• 結(jié)果28-38
• 討論38-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 文獻(xiàn)綜述49-58
• 綜述參考文獻(xiàn)54-58
• 致謝58-59
• 研究生期間發(fā)表的論文59-60
• 個(gè)人簡(jiǎn)介60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王占祥,章翔,費(fèi)舟,張劍寧,付洛安,劉衛(wèi)平,賀曉生,王彥剛,梁景文,王西玲;外源性p21~(WAF1/CIP1)基因轉(zhuǎn)染對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞周期的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年22期

，

本文編號(hào)：943416