表阿霉素與替莫唑胺聯(lián)合應(yīng)用對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及凋亡作用
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【摘要】:目的探討表阿霉素(EPI)與替莫唑胺(TMZ)聯(lián)合用藥對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞和細(xì)胞腫瘤球的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡作用。方法培養(yǎng)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞活性95%的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng),24 h后加入各藥液10μl至細(xì)胞培養(yǎng)孔中,細(xì)胞培養(yǎng)孔中EPI濃度梯度為0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00μmol/L,TMZ的濃度梯度為0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0μmol/L,繼續(xù)培養(yǎng)24h和48 h。采用酶標(biāo)儀在540 nm波長(zhǎng)處測(cè)定每孔吸光度(OD)值,計(jì)算各孔C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制率。取C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種于6孔板中,加入EPI、TMZ、EPI+TMZ(EPI終濃度為0.50、1.00、5.00μmol/L,TMZ終濃度為1.0、5.0、10.0μmol/L),繼續(xù)培養(yǎng)24 h和48 h,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)EPI和TMZ聯(lián)合對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡作用。培養(yǎng)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞腫瘤球,加入EPI、TMZ、EPI+TMZ,EPI終濃度為5.00μmol/L,TMZ的終濃度為10.0μmol/L,分別于給藥后0、1、3、7 d于倒置顯微鏡下觀察腫瘤球的形態(tài)、球體是否有裂解、球核是否有壞死等現(xiàn)象。結(jié)果不同濃度的各藥物在24、48 h對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);各濃度EPI+TMZ聯(lián)合用藥對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制率均高于相同EPI或TMZ濃度下單獨(dú)用藥,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)至24 h時(shí),1.00μmol/L EPI與5.0μmol/L TMZ聯(lián)合用藥對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖抑制率呈協(xié)同作用;培養(yǎng)至48 h時(shí),0.50μmol/L EPI與1.0μmol/L TMZ聯(lián)合用藥對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖抑制率呈協(xié)同作用。培養(yǎng)至24、48 h時(shí),陰性對(duì)照、各濃度的EPI、TMZ及EPI+TMZ對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡率的比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)EPI、TMZ及其聯(lián)合用藥后腫瘤球體積明顯受到抑制,表現(xiàn)為體積縮小,表面細(xì)胞裂解;聯(lián)合用藥較單獨(dú)用藥后腫瘤球球體致密性減小,裂解程度增大。結(jié)論 EPI和TMZ聯(lián)合用藥對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有協(xié)同抑制細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用,可引起C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞腫瘤球的裂解死亡。
【作者單位】: 石河子大學(xué)藥學(xué)院特種植物藥資源教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 表柔比星 替莫唑胺 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81160396,81460540) 石河子大學(xué)杰出青年科技人才培育計(jì)劃項(xiàng)目(2012ZRKXJQ07);石河子大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(SRP2015256) 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)社會(huì)發(fā)展科技攻關(guān)與成果轉(zhuǎn)化計(jì)劃項(xiàng)目(2015AD007) 國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201510759066)
【分類號(hào)】:R739.4
【正文快照】: 腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見(jiàn)的惡性腫瘤,預(yù)公司),磺酰羅丹明B蛋白(SRB,美國(guó)Sigma公司);后較差,平均生存時(shí)間僅14.6個(gè)月,其中5年生存率AnnexinⅤ-FITC細(xì)胞凋亡試劑盒(南京凱基生物科技不超過(guò)5%[1-2]。表阿霉素(EPI)是高效廣譜蒽環(huán)類發(fā)展有限公司)。衍生物抗腫瘤藥,主要作用
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