發(fā)布時間：2017-09-20 23:44

  本文關(guān)鍵詞：RNAi技術(shù)對人腦微血管內(nèi)皮細胞ANXA2基因表達水平的影響

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【摘要】：目的研究RNAi技術(shù)對人腦微血管內(nèi)皮細胞(Human brain microvascular cells,HBMEC)ANXA2基因表達水平的影響。方法將化學合成三對siRNA采用ribo FECT~(TM)CP轉(zhuǎn)染試劑介導法轉(zhuǎn)染HBMEC,應用熒光定量PCR法檢測RNA干擾后ANXA2 mRNA表達量,得出抑制率。應用Western-blot檢測RNA干擾后對ANXA2蛋白表達的影響。結(jié)果成功將siRNA轉(zhuǎn)染HBMEC,熒光定量PCR結(jié)果顯示,在轉(zhuǎn)染24 h后,各干擾組與陰性組比較ANXA2基因表達量明顯下調(diào)(P0.01),Western-blot顯示siRNA-ANXA2-2、siRNA-ANXA2-3轉(zhuǎn)染前后ANXA2蛋白的表達水平明顯受到抑制。結(jié)論合成的ANXA2 siRNA能有效抑制ANXA2蛋白的表達、降低ANXA2 mRNA水平,對ANXA2有高效和特異的沉默作用,以ANXA2為靶點的RNA干擾技術(shù)可望成為鑒定HBMEC有關(guān)EV71膜受體的新策略。
【作者單位】： 廣東醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： ANXA RNAi EV
【基金】：國家自然科學基金(No.81301478) 廣東省湛江市非資助科技攻關(guān)專題(No.2015B101)
【分類號】：R743;R440
【正文快照】： EV71是小RNA病毒科腸道病毒屬A組成員,它是一種無包膜病毒,大約有7.4 kb大小的正鏈RNA基[1]因組。自1969年EV71在美國加利福尼亞州手足口病疫情中首次報道后,該病毒已在世界范圍內(nèi)引起十余次手足口病暴發(fā)和流行,且死亡病例趨于增[2-4]多,因此,EV71被認為是手足口病最主要的病，

本文編號：891139