RNAi技術對人腦微血管內皮細胞ANXA2基因表達水平的影響
發(fā)布時間:2017-09-20 23:44
本文關鍵詞:RNAi技術對人腦微血管內皮細胞ANXA2基因表達水平的影響
【摘要】:目的研究RNAi技術對人腦微血管內皮細胞(Human brain microvascular cells,HBMEC)ANXA2基因表達水平的影響。方法將化學合成三對siRNA采用ribo FECT~(TM)CP轉染試劑介導法轉染HBMEC,應用熒光定量PCR法檢測RNA干擾后ANXA2 mRNA表達量,得出抑制率。應用Western-blot檢測RNA干擾后對ANXA2蛋白表達的影響。結果成功將siRNA轉染HBMEC,熒光定量PCR結果顯示,在轉染24 h后,各干擾組與陰性組比較ANXA2基因表達量明顯下調(P0.01),Western-blot顯示siRNA-ANXA2-2、siRNA-ANXA2-3轉染前后ANXA2蛋白的表達水平明顯受到抑制。結論合成的ANXA2 siRNA能有效抑制ANXA2蛋白的表達、降低ANXA2 mRNA水平,對ANXA2有高效和特異的沉默作用,以ANXA2為靶點的RNA干擾技術可望成為鑒定HBMEC有關EV71膜受體的新策略。
【作者單位】: 廣東醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】: ANXA RNAi EV
【基金】:國家自然科學基金(No.81301478) 廣東省湛江市非資助科技攻關專題(No.2015B101)
【分類號】:R743;R440
【正文快照】: EV71是小RNA病毒科腸道病毒屬A組成員,它是一種無包膜病毒,大約有7.4 kb大小的正鏈RNA基[1]因組。自1969年EV71在美國加利福尼亞州手足口病疫情中首次報道后,該病毒已在世界范圍內引起十余次手足口病暴發(fā)和流行,且死亡病例趨于增[2-4]多,因此,EV71被認為是手足口病最主要的病,
本文編號:891139
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