本文關(guān)鍵詞：白花丹素對樹突狀細(xì)胞和實驗性自身免疫性腦脊髓炎的調(diào)節(jié)作用研究

  更多相關(guān)文章： 白花丹素 多發(fā)性硬化癥 實驗性自身免疫性腦脊髓炎 樹突狀細(xì)胞 免疫調(diào)節(jié)

【摘要】：多發(fā)性硬化癥(Multiple Sclerosis,MS)是一種慢性自身免疫疾病,其特征為炎性脫髓鞘以及進一步的脊髓損傷。MS因其具有高發(fā)病率、病程長以及青壯年易患而備受重視,目前尚無滿意的治療方式,因此,探索新型藥物對治療或是改善MS具有重要的意義。實驗性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)是MS經(jīng)典的動物模型,主要用于自身免疫炎癥相關(guān)的基礎(chǔ)研究。樹突狀細(xì)胞(Dendrite cell,DC)作為專職的抗原提呈細(xì)胞,在適應(yīng)性免疫應(yīng)答的初始階段起到至關(guān)重要的作用。白花丹素(PL)是一種中藥復(fù)合物,具有免疫調(diào)節(jié)活性,從而其可能成為一種新的免疫相關(guān)疾病的候選藥物,同時白花丹素對DC的作用以及機制\不清楚。研究目的:體外實驗探討白花丹素對人CD14陽性單核細(xì)胞來源的DC的分化、成熟、抗原攝取和DC介導(dǎo)的T細(xì)胞增殖的影響,以及其對DC炎癥因子表達(dá)的調(diào)節(jié)作用;體內(nèi)實驗進一步探究了白花丹素對EAE作用和細(xì)胞機制。實驗內(nèi)容和方法:體外研究用磁珠分選人外周血中CD14陽性單核細(xì)胞,隨后加入細(xì)胞因子誘導(dǎo)其向DC分化,并用脂多糖刺激其成熟,流式細(xì)胞術(shù)檢測白花丹素處理后,未成熟DC(i DC)以及成熟DC(m DC)表面標(biāo)記的表達(dá)情況。同時,白花丹素預(yù)處理后,用流式細(xì)胞術(shù)檢測FITC-dextran的攝取來探究i DC抗原攝取能力;用混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)方法檢測m DC刺激T細(xì)胞增殖的能力,并用實時定量PCR檢測DC中T細(xì)胞極化以及炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平。體內(nèi)研究應(yīng)用注射髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein,MOG)誘導(dǎo)小鼠EAE模型,應(yīng)用白花丹素腹腔注射治療,對小鼠進行臨床評分,處死后對其脊髓進行組化檢測,包括HE染色以及Luxol fast blue染色。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測白花丹素治療以及未治療的EAE小鼠脾臟中DC細(xì)胞的表達(dá)情況。實驗結(jié)果:體外實驗中,流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果提示白花丹素可以抑制人單核細(xì)胞來源的DC細(xì)胞的分化、成熟及其功能,包括降低i DC和m DC表面標(biāo)記CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表達(dá),i DC抗原攝取以及m DC的抗原呈遞能力;同時,白花丹素也能抑制m DC細(xì)胞中Th1,Th17細(xì)胞極化的相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá);此外,在體內(nèi)實驗中,白花丹素對DC細(xì)胞均具有抑制作用;進一步的,本實驗研究發(fā)現(xiàn)白花丹素對小鼠DC細(xì)胞系DC2.4同樣具有抑制作用,明顯緩解小鼠EAE的發(fā)病以及臨床癥狀。結(jié)論:白花丹素可以抑制DC細(xì)胞的分化,成熟以及功能,提示白花丹素可能具有免疫抑制和抗炎活性,因此白花丹素可能對于DC相關(guān)的自身免疫和炎性疾病具有潛在的治療作用。
【關(guān)鍵詞】：白花丹素 多發(fā)性硬化癥 實驗性自身免疫性腦脊髓炎 樹突狀細(xì)胞 免疫調(diào)節(jié)
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R744.51
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語10-12
• 前言12-16
• 研究現(xiàn)狀、成果12-15
• 研究目的、方法15-16
• 對象和方法16-28
• 1.主要材料、試劑與儀器設(shè)備16-28
• 1.1 細(xì)胞分離及體外培養(yǎng)所用試劑16
• 1.2 實驗所需抗體16-17
• 1.3 實時定量PCR所需引物及試劑17
• 1.4 動物模型構(gòu)建及病理分析所需試劑、藥品17-18
• 1.5 實驗所需儀器設(shè)備18
• 1.6 試劑配制18-19
• 1.7 實驗方法19-28
• 1.7.1 EAE誘導(dǎo)、臨床評分和治療作用分析19-21
• 1.7.2 人外周血的單核細(xì)胞（CD14陽性）的分離和純化21-22
• 1.7.3 DCs細(xì)胞的定向分化培養(yǎng)22-23
• 1.7.4 DC表面標(biāo)記表達(dá)分析23
• 1.7.5 iDC內(nèi)吞作用分析23-24
• 1.7.6 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)分析24-25
• 1.7.7 實時定量PCR25-26
• 1.7.8 小鼠脾臟中DC的分化與成熟26-27
• 1.7.9 小鼠DC2.4 細(xì)胞系的培養(yǎng)，，及表面標(biāo)記物表達(dá)分析27
• 1.7.10 細(xì)胞凋亡的評估27-28
• 1.7.11 統(tǒng)計學(xué)分析28
• 結(jié)果28-42
• 2.1 白花丹素抑制幼稚DC細(xì)胞（iDC）的分化和內(nèi)吞功能28-30
• 2.2 白花丹素抑制iDC的抗原攝取能力30-31
• 2.3 白花丹素抑制iDC的成熟31-33
• 2.4 白花丹素抑制mDC誘導(dǎo)的抗原特異性T細(xì)胞的增殖33-34
• 2.5 白花丹素抑制人血DC細(xì)胞Th細(xì)胞極化相關(guān)細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)34
• 2.6 白花丹素抑制鼠系DC的成熟34-35
• 2.7 白花丹素抑制DC2.4 細(xì)胞Th細(xì)胞極化相關(guān)細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)35-36
• 2.8 白花丹素緩解EAE的臨床癥狀36-39
• 2.9 白花丹素抑制了EAE小鼠脾臟DC39-41
• 2.10 白花丹素對DC2.4 細(xì)胞和人DC細(xì)胞的凋亡作用41-42
• 討論42-46
• 3.1 白花丹素對MS的治療作用42-43
• 3.2 白花丹素對DC的調(diào)節(jié)作用43-45
• 3.3 小結(jié)45-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻47-55
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明55-56
• 綜述56-73
• 參考文獻64-73
• 致謝73

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王濟;李玲孺;李英帥;張惠敏;鄭燕飛;陳雪梅;楊寅;張妍;王琦;;樹突狀細(xì)胞成熟及其表觀遺傳調(diào)節(jié)理論在中醫(yī)特稟體質(zhì)(過敏體質(zhì))研究中的應(yīng)用[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年03期

2 張義;謝海龍;李龍;田夫;;DC-CIK抗消化道腫瘤的研究進展[J];長江大學(xué)學(xué)報(自科版);2014年12期

3 王浩;蘇文;毛光華;張羽捷;史天良;;DC-CIK過繼免疫治療聯(lián)合化療對食管癌患者T細(xì)胞亞群的影響[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2014年28期

4 李夏瑩;黃曉冬;劉肅;;佐劑及其功能和作用機制[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2015年02期

5 胡爽;吳雄飛;何躍;蔡光強;彭侃夫;;樹突狀細(xì)胞的數(shù)量及活性變化在ApoE~(-/-)小鼠尿毒癥加速性動脈粥樣硬化形成中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2015年24期

6 續(xù)文婷;楊楨;呂農(nóng)華;;樹突狀細(xì)胞在胃癌中的研究進展[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年08期

7 李斌;陳鵬;鄭建云;;rhHSP70聯(lián)合Mage-3抗原肽修飾樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)的抗乳腺癌作用[J];昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2013年08期

8 秦曉飛;趙明耀;董子明;;姬松茸多糖對小鼠骨髓來源樹突狀細(xì)胞抗腫瘤作用的影響[J];中醫(yī)藥導(dǎo)報;2014年02期

9 李賢軍;王永華;于芹超;劉靜;王碩;高建楠;孫立江;;阻斷B7-H1通路增強膀胱癌患者外周血樹突狀細(xì)胞免疫功能的實驗研究[J];臨床泌尿外科雜志;2014年05期

10 李成鎮(zhèn);宋承鑫;謝遵江;;大鼠腸系膜淋巴結(jié)在生后發(fā)育過程中高內(nèi)皮微靜脈的結(jié)構(gòu)和形態(tài)[J];解剖科學(xué)進展;2014年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Man-Man Lu;Jie Yang;Chen-Chen Feng;Juan Wang;Rui-Xue Leng;Jing Li;Hai-Feng Pan;Dong-Qing Ye;;Lack of association between OSM gene polymorphism and susceptibility to SLE in a Chinese population[A];安徽省2011年度流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 阿瑪杜（AMADOU Ibrahim Halilou）;慢性HBV感染不同時期調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的比例變化[D];華中科技大學(xué);2013年

2 杜漸;胰腺癌BxPC-3細(xì)胞上清液通過上調(diào)樹突狀細(xì)胞miRNA-146a的表達(dá)抑制其成熟及免疫功能的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

3 張晶;新型疫苗佐劑—硫酸乙酰肝素刺激DCs后差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

4 楊會峰;維生素D在結(jié)核桿菌感染條件下對小鼠獲得性免疫表型和功能的影響及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 王瑩;IL-13Ra2抗原肽致敏樹突狀細(xì)胞對人腦膠質(zhì)瘤及其腫瘤干細(xì)胞的殺傷效應(yīng)研究[D];華中科技大學(xué);2013年

6 張一;李斯特菌感染的巨噬細(xì)胞來源的微顆粒在樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫中的作用[D];華中科技大學(xué);2013年

7 余磊;跨膜型TGF-β1基因修飾的骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞來源的exosomes對小鼠自身免疫性腦脊髓炎的治療效果及其機制研究[D];浙江大學(xué);2013年

8 徐曉瑩;甘露聚糖結(jié)合凝集素對人外周血單核細(xì)胞分化為調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞的作用及其機制的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

9 王淑慧;高密度脂蛋白及載脂蛋白apoAI研究[D];中南大學(xué);2012年

10 馮勵;豬瘟病毒感染對宿主細(xì)胞免疫應(yīng)答基因的影響[D];廣西大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李衛(wèi)華;抗生素誘導(dǎo)小鼠小腸菌群失衡對樹突細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

2 鄧小蓉;特應(yīng)性皮炎患者血清炎癥因子檢測及皮損樹突狀細(xì)胞體外誘導(dǎo)模型的建立[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 陳穎;LPS長期刺激巨噬細(xì)胞引起適應(yīng)性免疫應(yīng)答受損[D];暨南大學(xué);2013年

4 黃豫曉;TIP樣蛋白在瘧原蟲免疫抑制中功能的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 趙國生;IL-17A對GM-CSF誘導(dǎo)的骨髓樹突狀細(xì)胞的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

6 李然;免疫性血小板減少癥患者樹突狀細(xì)胞亞群、功能及與淋巴轉(zhuǎn)錄因子Gata-3、T-bet相關(guān)性的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

7 葛y泍

本文編號：825500