本文關(guān)鍵詞：氨基胍在自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中作用的研究

  更多相關(guān)文章： 蛛網(wǎng)膜下腔出血 早期腦損傷 氨基胍 iNOS NSE

【摘要】：目的:近期研究表明早期腦損傷是造成蛛網(wǎng)膜下腔出血患者預(yù)后差的主要原因,本研究初步探討氨基胍在蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中起的作用。方法:雄性SD大鼠168只,按照隨機(jī)數(shù)字法分為對(duì)照組(Control組)、假手術(shù)組(Sham組)、實(shí)驗(yàn)組(SAH組)、干預(yù)組(SAH+AG組),每組42只;各組又分為1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h 7個(gè)亞組,每亞組6只。視交叉前池注血法建立大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型,HE染色鑒定模型。參考Garcia法進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分,TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)元凋亡程度,電鏡進(jìn)一步觀察神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的改變,Western-Blot法檢測(cè)NSE蛋白、i NOS蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:HE染色后,在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組模型蛛網(wǎng)膜下腔存在較多紅細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)組大鼠組內(nèi)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分結(jié)果呈一定的趨勢(shì):自6h開始下降,24h-48h達(dá)到最低,隨后上升。使用氨基胍進(jìn)行干預(yù)后,12h、24h、48h時(shí)間點(diǎn)大鼠的神經(jīng)功能結(jié)果得到了明顯的改善(P0.01)。TUNEL法檢測(cè)表明實(shí)驗(yàn)組顯現(xiàn)出時(shí)相性變化,自6h起陽(yáng)性細(xì)胞率開始增加,24h達(dá)到高峰,48h開始逐漸下降;使用氨基胍干預(yù)后,12h、24h、48h陽(yáng)性細(xì)胞率明顯降低(P0.01)。電鏡下觀察到不同組別、不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的變化情況。Western-blot法檢測(cè)表明實(shí)驗(yàn)組NSE 6h開始逐漸上升,24h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)最高,48h開始逐漸下降。氨基胍干預(yù)后,6h、12h、24h、48h、72h NSE的表達(dá)明顯降低(P0.01)。對(duì)照組i NOS未見表達(dá);實(shí)驗(yàn)組i NOS自6小時(shí)開始增高,24h表達(dá)最高;氨基胍干預(yù)后,6h、12h、24h、48h、72h的i NOS表達(dá)明顯降低(P0.01)。實(shí)驗(yàn)組NSE Western-Blot蛋白表達(dá)量與TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞率呈正相關(guān)(r=0.902,P0.01),實(shí)驗(yàn)組i NOS Western-Blot蛋白表達(dá)量與TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞率呈正相關(guān)(r=0.748,P0.01)。結(jié)論:蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中氨基胍改善了SD大鼠神經(jīng)行為學(xué)功能,抑制了神經(jīng)元凋亡,下調(diào)i NOS、NSE的表達(dá),起到了減輕早期腦損傷的作用。
【關(guān)鍵詞】：蛛網(wǎng)膜下腔出血 早期腦損傷 氨基胍 iNOS NSE
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743.35
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 英文縮略詞9-10
• 第一章 引言10-12
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制12-15
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
• 2.1.2 主要試劑以及設(shè)備12-13
• 2.2 主要使用試劑配制13-15
• 第三章 實(shí)驗(yàn)方法15-21
• 3.1 實(shí)驗(yàn)路線圖15
• 3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組15
• 3.3 動(dòng)物模型建立15-16
• 3.4 HE染色鑒定模型16
• 3.4.1 取材16
• 3.4.2 制備石蠟切片16
• 3.4.3 HE染色16
• 3.5 神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分16-17
• 3.6 TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況17
• 3.7 電鏡觀察神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化情況17-18
• 3.8 Western-Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)水平18-20
• 3.8.1 提取蛋白18
• 3.8.2 清洗玻璃板及膠架18
• 3.8.3 制膠18-19
• 3.8.4 蛋白上樣及電泳19
• 3.8.5 轉(zhuǎn)膜19-20
• 3.8.6 封閉20
• 3.8.7 一抗孵育20
• 3.8.8 二抗孵育20
• 3.8.9 曝光20
• 3.8.10 western-blot圖像分析20
• 3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-30
• 4.1 SD大鼠模型的建立及HE染色鑒定21
• 4.2 大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分結(jié)果21-22
• 4.3 TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況22-24
• 4.4 電鏡下觀察神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化24-26
• 4.5 Western-Blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)26-30
• 4.5.1 Western-Blot法檢測(cè)NSE蛋白表達(dá)26-27
• 4.5.2 Western-Blot法檢測(cè)iNOS蛋白表達(dá)27-29
• 4.5.3 NSE與iNOS表達(dá)量與凋亡之間的相關(guān)性分析29-30
• 第五章 討論30-35
• 5.1 有關(guān)蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的概述30
• 5.2 NO、iNOS、NSE與蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的關(guān)系30-32
• 5.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷倪x擇32
• 5.4 氨基胍在SAH大鼠早期腦損傷中的保護(hù)作用32-35
• 第六章 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述40-44
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 致謝44-45
• 作者簡(jiǎn)介45-46
• 導(dǎo)師評(píng)閱表46

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