本文關(guān)鍵詞：GRP78及CHOP在SAH后神經(jīng)元細(xì)胞凋亡中作用的研究

  更多相關(guān)文章： CHOP GRP78 蛛網(wǎng)膜下腔出血 早期腦損傷 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

【摘要】：目的:研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子GRP78及CHOP在蛛網(wǎng)膜下腔出血后大鼠海馬神經(jīng)元中的表達(dá)及在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用。通過觀察CHOP及GRP78在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后海馬區(qū)腦組織中表達(dá)的時相性變化,分析CHOP及GRP78表達(dá)的變化與神經(jīng)元細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系,探討其在蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中細(xì)胞凋亡中的作用。為今后尋找SAH后EBI的潛在治療靶點提供理論依據(jù)。方法:78只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對照組(n=6)、假手術(shù)組(n=36)與實驗(SAH)組(n=36),實驗組與對照組分別在1h、6h、12h、24h、48h、72h用Garcia評分法對大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評分,HE染色、MASSON染色鑒定模型,電鏡及HE染色光鏡下觀察大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)改變,TUNEL法檢測神經(jīng)元凋亡,免疫組織化學(xué)和western blot技術(shù)檢測GRP78及CHOP的表達(dá)。結(jié)果:SAH組神經(jīng)行為學(xué)評分比對照組及假手術(shù)組均低(P0.05);SAH組大鼠蛛網(wǎng)膜下腔可見大量積血,HE和MASSON染色可見大量紅細(xì)胞堆積;免疫組化觀察到CHOP表達(dá)呈現(xiàn)時相性規(guī)律變化;電鏡下能觀察到不同時間點神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變;TUNEL法檢測顯示空白組(2.7%±1%)與假手術(shù)組僅有極少數(shù)陽性細(xì)胞,神經(jīng)元凋亡于6小時開始增多(P0.01),并于24h達(dá)到高峰,48h開始下降(P0.01),在72h組仍可見少量凋亡細(xì)胞。Western blot檢測結(jié)果為實驗組CHOP 6h開始增加(P0.01),24h達(dá)到高峰,48h出現(xiàn)減少,但仍明顯高于空白組(P0.01),于72h基本恢復(fù)到術(shù)前水平,實驗組GRP78于1h開始增加(P0.01),12h達(dá)到高峰,72h明顯減少,但仍高于空白組(P0.01)。實驗組CHOP及GRP78蛋白表達(dá)量均與TUNEL染色陽性細(xì)胞率呈正相關(guān)(r=0.933,P0.01),(r=0.723,P0.01)。結(jié)論:蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期CHOP和GRP78的表達(dá)呈現(xiàn)規(guī)律性變化,CHOP和GRP78在蛛網(wǎng)膜下腔出血后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：CHOP GRP78 蛛網(wǎng)膜下腔出血 早期腦損傷 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R743.35
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 英文縮略詞8-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-24
• 1.實驗材料11-16
• 1.1 主要試劑11-12
• 1.2 主要材料及儀器12-13
• 1.3 試劑配制13-15
• 1.4 實驗動物15-16
• 2.實驗方法16-24
• 2.1 實驗路線圖16-17
• 2.2 實驗動物分組17
• 2.3 應(yīng)用視交叉前池注血法建立大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型17
• 2.4 神經(jīng)行為學(xué)評分17-18
• 2.5 組織的固定及處理18-19
• 2.6 HE及MASSON染色法鑒定模型19-20
• 2.7 透射電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)20
• 2.8 免疫組織化學(xué)法檢測蛋白表達(dá)20-21
• 2.9 TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡21
• 2.10 免疫印跡法檢測蛋白表達(dá)21-23
• 2.11 統(tǒng)計學(xué)處理23-24
• 實驗結(jié)果24-33
• 1.動物模型24-25
• 2.神經(jīng)行為學(xué)評分25-26
• 3.電鏡下觀察神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化26-27
• 4.TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡27
• 5.免疫組織化學(xué)檢測蛋白表達(dá)27-29
• 6.Western-blot檢測CHOP和GRP78表達(dá)量的變化29-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 綜述42-49
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 致謝49-50
• 作者簡介50-51
• 石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文導(dǎo)師評閱表51

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 馮華,王憲榮,陳志,吳國材,章翔,易聲禹;中藥腦傷泰對大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣治療作用[J];重慶醫(yī)學(xué);2002年10期

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本文編號：729923