本文關(guān)鍵詞：Shh和Gli-1在人腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)及其相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的:探討SHH(Sonic Hedgehog Signaling Pathway)信號通路起始因子Shh、核轉(zhuǎn)錄因子Gli-1在不同級別星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤及正常腦組織中表達(dá)及相關(guān)性。方法:1、收集2014年5月至2015年5月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)組織標(biāo)本:星形膠質(zhì)瘤組織50例(其中高級別膠質(zhì)瘤36例、低級別膠質(zhì)瘤14例)及正常腦組10例,經(jīng)甲醛固定。星形膠質(zhì)瘤標(biāo)本20例(高級別膠質(zhì)瘤、低級別膠質(zhì)瘤各10例)、正常腦組織標(biāo)本8例,-80℃冰箱凍存(正常腦組織標(biāo)本來自神經(jīng)外科顱腦損傷患者,術(shù)前已告知患者家屬標(biāo)本用途并取得患者家屬同意)。2、依據(jù)WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn),定義高級別膠質(zhì)瘤為WHO分級Ⅲ~Ⅳ級,低級別膠質(zhì)瘤為Ⅰ~Ⅱ級。3、應(yīng)用免疫組織化學(xué)(Immumohistochemistory)SP法檢測Shh及Gli-1在各組織中的表達(dá)情況。4、應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測Shh及Gli-1 m RNA在各組織中表達(dá)情況。5、運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 21.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1、免疫組化結(jié)果表明:Shh陽性信號定位于細(xì)胞胞膜、胞質(zhì);Gli-1陽性信號定位于細(xì)胞胞質(zhì)、胞核。在高級別膠質(zhì)瘤中Shh的陽性表達(dá)率為61.1%(22/36),低級別膠質(zhì)瘤中Shh的陽性表達(dá)率為57.1%(8/14),正常腦組織中Shh的陽性表達(dá)率為10%(1/10),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在高級別膠質(zhì)瘤中Gli-1的陽性表達(dá)率為69.4%(25/36),低級別膠質(zhì)瘤中Gli-1的陽性表達(dá)率為28.6%(4/14),正常腦組織中Gli-1的陽性表達(dá)率為10%(1/10),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。其中,兩兩對比,高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤中Shh的陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125);高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織、低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Shh的陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125)。高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤、高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Gli-1的陽性率對比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125);低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Gli-1的陽性率對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125)。2、RT-PCR結(jié)果表明:在高級別膠質(zhì)瘤中Shh m RNA的相對表達(dá)量為0.126±0.020,低級別膠質(zhì)瘤中Shh m RNA的相對表達(dá)量為0.113±0.045,正常腦組織中Shh m RNA的相對表達(dá)量為0.061±0.039,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在高級別膠質(zhì)瘤中Gli-1 m RNA的相對表達(dá)量為0.141±0.032,低級別膠質(zhì)瘤中Gli-1 m RNA的相對表達(dá)量為0.074±0.044,正常腦組織中Gli-1 m RNA的相對表達(dá)量為0.040±0.024,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。其中,兩兩對比,高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤間Shh m RNA相對表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125);高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織、低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間Shh m RNA相對表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125)。高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤、高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間Gli-1 m RNA的相對表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125);低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間相對表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0125)。3、Shh與Gli-1相關(guān)性統(tǒng)計(jì):在免疫組化中,Shh與Gli-1相關(guān)系數(shù)為:0.926(P0.05);在PCR中,Shh與Gli-1相關(guān)系數(shù)為:0.588(P0.05)。結(jié)論:1、Shh、Gli-1在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)顯著高于正常腦組織,提示SHH信號通路在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中是普遍激活的。2、Shh與Gli-1的表達(dá)在免疫組化及PCR中均成線性相關(guān),提示Shh、Gli-1共同參與了膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展。3、不同級別膠質(zhì)瘤中,Shh在免疫組化及PCR中的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Gli-1在免疫組化及PCR中高級別膠質(zhì)瘤的表達(dá)明顯高于低級別膠質(zhì)瘤,提示在高級別膠質(zhì)瘤中可能存在SHH信號通路中多種信號蛋白突變,如Ptch、Smo等。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤 Shh Gli-1 免疫組化 RT-PCR
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-17
• 結(jié)果17-18
• 附圖18-23
• 附表23-27
• 討論27-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 綜述 SHH信號通路及其在膠質(zhì)瘤中的研究進(jìn)展34-44
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 致謝44-45
• 個(gè)人簡歷45

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本文編號：711979