發(fā)布時間：2017-08-16 09:01

  本文關鍵詞：神經(jīng)元特異性烯醇化酶在神經(jīng)元氧糖剝奪損傷后的表達變化

  更多相關文章： 細胞原代培養(yǎng) 海馬區(qū)神經(jīng)元 氧糖剝奪 神經(jīng)元特異性烯醇化酶

【摘要】：目的:探討神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)在體外培養(yǎng)神經(jīng)元建立氧糖剝奪模型中的水平變化。方法:通過體外原代培養(yǎng)24h內(nèi)的新生SD大鼠大腦海馬神經(jīng)元,應用免疫熒光染色及電子顯微鏡鑒定神經(jīng)元細胞,應用體外氧糖剝奪(oxygen-glucose deprivation,OGD)建立大鼠神經(jīng)元細胞缺血缺氧損傷模型,分別對復氧1h、6h、12h、24h、48h、72h的神經(jīng)元提取蛋白質(zhì),并通過Western-Blot法檢測上述不同時間點神經(jīng)元損傷模型中NSE水平。結果:1.4-6h神經(jīng)元細胞基本貼壁,隨著時間增加,神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生變化,突起增長、變粗,胞體增大、飽滿,突起縱橫交錯,形成神經(jīng)網(wǎng)絡。2.通過免疫熒光染色證明所培養(yǎng)的是神經(jīng)元細胞,細胞核染色清晰,形態(tài)典型,突起走形如網(wǎng)狀。3.NSE水平在神經(jīng)元細胞損傷后6h開始升高,24-48h達到高峰,72h表達逐漸減少(P0.01)。結論:1.通過本方法原代培養(yǎng)新生大鼠海馬神經(jīng)元細胞,獲得的神經(jīng)元細胞純度高,方法簡單易行,可作為神經(jīng)元體外培養(yǎng)的良好模型用于以后的研究。2.氧-糖剝奪可造成神經(jīng)元的損傷,不同時間點細胞中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)呈現(xiàn)一定的時相性變化。
【關鍵詞】：細胞原代培養(yǎng) 海馬區(qū)神經(jīng)元 氧糖剝奪 神經(jīng)元特異性烯醇化酶
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R743.35
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 英文縮略詞簡表8-9
• 第一章 前言9-12
• 第二章 材料與方法12-19
• 1.材料12-15
• 1.1 實驗動物12
• 1.2 主要儀器與試劑12-13
• 1.3 主要溶液的配置13-15
• 2.試驗方法15-18
• 2.1 多聚賴氨酸（p LL）包被培養(yǎng)瓶15
• 2.2 蓋玻片準備15
• 2.3 新生SD大鼠海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)15-16
• 2.4 免疫熒光染色鑒定神經(jīng)元細胞16
• 2.5 神經(jīng)元細胞損傷模型的建立16
• 2.6 Western-Blot法檢測NSE蛋白表達水平16-18
• 3.統(tǒng)計學處理18-19
• 第三章 結果19-22
• 1.神經(jīng)元細胞形態(tài)學觀察19-20
• 2.免疫熒光染色鑒定結果20
• 3.Western-Blot法檢測NSE蛋白表達水平20-22
• 第四章 討論22-26
• 1.神經(jīng)元細胞的原代培養(yǎng)22-23
• 2.氧-糖剝奪致海馬神經(jīng)元損傷對NSE表達的影響23-26
• 第五章 結論26-27
• 參考文獻27-30
• 文獻綜述30-37
• 參考文獻35-37
• 致謝37-38
• 作者簡介38-39
• 導師評閱表39

【參考文獻】

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本文編號：682378