發(fā)布時間：2017-08-11 21:20

  本文關(guān)鍵詞：戊二醛聚合豬血紅蛋白對腦缺血再灌注損傷的保護作用研究

  更多相關(guān)文章： 血紅蛋白類氧載體 戊二醛聚合豬血紅蛋白 腦缺血再灌注損傷 炎癥反應 氧化應激

【摘要】：血紅蛋白氧載體(Hemoglobin-based oxygen carriers, HBOCs),是由化學方法修飾的人的或者牛的血紅蛋白合成,具有類似紅細胞的功能。主要用于創(chuàng)傷、失血性休克等的治療；將其應用于缺血再灌注損傷的研究較少。缺血再灌注損傷主要是因為再灌注時氧瞬間增加,導致超氧陰離子增多和組織氧化加劇,最終導致凋亡和壞死。戊二醛聚合豬血紅蛋白(pPolyHb)具有攜氧釋氧能力,其直徑遠遠小于紅細胞,在缺血初期可通過栓塞為組織提供氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。本論文主要通過細胞和在體模型初步探究pPolyHb對腦缺血再灌注損傷的保護作用。建立HT22氧糖剝奪細胞模型,模擬缺血再灌注損傷,通過檢測細胞存活率以及超氧化物歧化酶的活力分析pPolyHb對缺血再灌注損傷的修復作用；中動脈阻斷法建立大鼠局部腦缺血再灌注損傷模型,缺血即刻以0.5g/Kg劑量尾靜脈注射pPolyHb,缺血90min后拔出線栓再灌注。通過檢測腦梗死面積、神經(jīng)學評分、細胞凋亡以及炎癥因子表達等pPolyHb對局部腦缺血再灌注損傷的影響。細胞實驗結(jié)果表明,pPolyHb本身對HT22細胞無毒害作用,還能修復細胞氧糖剝奪造成的氧化應激損傷,提高細胞的存活率。其對HT22細胞缺血再灌注損傷有修復作用。在體實驗結(jié)果表明,pPolyHb組在再灌注后24小時,腦梗死面積顯著低于Control組,且能明顯提高缺血再灌注損傷后的神經(jīng)學評分。組織病理以及凋亡細胞的數(shù)目也明顯減少,還能提高凋亡蛋白Bcl-2/Bax的比值。由此得出,pPolyHb可以減少由缺血再灌注損傷引起的細胞死亡和凋亡比率。從炎癥因子的表達趨勢來看,pPolyHb組能夠降低促炎因子TNF-α、IL-1β的表達以及MPO的活力,并且提高了抑炎因子IL-10的濃度含量,同時可降低氧化應激標志物MDA的濃度。由此得出,pPolyHb可以降低組織細胞的炎癥反應和氧化應激。綜上所述,pPolyHb因其良好的攜氧/釋氧及分子直徑僅為20nm遠小于紅細胞,可快速通過被阻塞血管腔內(nèi)的狹窄間隙,及時為缺血細胞和組織供氧,另一方面,pPolyHb可降低氧化應激損傷,抑制炎癥因子的釋放,從而減輕腦缺血再灌注損傷,這為其未來的臨床應用開辟了新的途徑。
【關(guān)鍵詞】：血紅蛋白類氧載體 戊二醛聚合豬血紅蛋白 腦缺血再灌注損傷 炎癥反應 氧化應激
【學位授予單位】：西北大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R743.31
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 縮略語表6-10
• 第一章 緒論10-21
• 1.1 血紅蛋白氧載體的研究概況10-15
• 1.1.1 血紅蛋白(Hemoglobin,Hb)的結(jié)構(gòu)及生理功能10-11
• 1.1.2 血紅蛋白氧載體分類11-13
• 1.1.3 血紅蛋白氧載體的應用13-15
• 1.2 腦缺血再灌注損傷15-19
• 1.2.1 腦缺血再灌注損傷模型的制作16-17
• 1.2.2 腦缺血再灌注損傷機理17-18
• 1.2.3 腦缺血再灌注損傷研究現(xiàn)狀18-19
• 1.3 幾種技術(shù)簡介19-20
• 1.3.1 western-blot技術(shù)19
• 1.3.2 TUNEL法檢測細胞凋亡19-20
• 1.4 本文研究的目的意義20-21
• 第二章 戊二醛聚合豬血紅蛋白對HT22細胞缺血再灌注損傷的影響21-29
• 2.1 引言21
• 2.2 主要試劑及儀器21-22
• 2.2.1 實驗細胞21
• 2.2.2 主要試劑21-22
• 2.2.3 主要儀器22
• 2.3 實驗方法22-25
• 2.3.1 HT22細胞的復蘇與傳代22-23
• 2.3.2 pPolyHb對HT22細胞生存活力的影響23
• 2.3.3 pPolyHb對HT22細胞缺血再灌注損傷后生存活力和SOD活力的影響23-25
• 2.4 統(tǒng)計分析25
• 2.5 實驗結(jié)果25-28
• 2.5.1 pPolyHb對HT22細胞存活率影響結(jié)果25
• 2.5.2 pPolyHb對HT22細胞缺血再灌注損傷后存活率和SOD活力影響結(jié)果25-28
• 2.6 本章小結(jié)28-29
• 第三章 戊二醛聚合豬血紅蛋白對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷凋亡抑制的影響29-42
• 3.1 引言29
• 3.2 實驗材料及儀器29-31
• 3.2.1 實驗動物29
• 3.2.2 主要試劑29-30
• 3.2.3 主要儀器30-31
• 3.2.4 手術(shù)器械31
• 3.3 試驗方法31-37
• 3.3.1 戊二醛聚合豬血紅蛋白的制備31
• 3.3.2 pPolyHb對局腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)學評分和腦梗死面積的影響31-33
• 3.3.3 pPolyHb對腦缺血再灌注損傷的組織病理學和神經(jīng)元凋亡的影響33-34
• 3.3.4 pPolyHb對腦缺血再灌注損傷凋亡蛋白Bcl-2/Bax表達量的影響34-37
• 3.4 統(tǒng)計分析37
• 3.5 實驗結(jié)果37-41
• 3.5.1 腦梗死面積和神經(jīng)學評分37-38
• 3.5.2 組織病理學和神經(jīng)元凋亡結(jié)果38-40
• 3.5.3 凋亡蛋白Bcl-2/Bax表達量40-41
• 3.6 本章小結(jié)41-42
• 第四章 戊二醛聚合豬血紅蛋白對大鼠局灶性腦缺血再灌注的炎癥反應和氧化應激的影響42-51
• 4.1 引言42
• 4.2 實驗材料及儀器42-43
• 4.2.1 實驗動物42
• 4.2.2 主要試劑42-43
• 4.2.3 主要儀器43
• 4.3 實驗方法43-45
• 4.3.1 pPolyHb對腦缺血再灌注損傷炎癥因子TNF-α,IL-1β和IL-10表達的影響43-44
• 4.3.2 pPolyHb對腦缺血再灌注損傷MPO,MDA和NO產(chǎn)生的影響44-45
• 4.4 統(tǒng)計分析45-46
• 4.5 實驗結(jié)果46-49
• 4.5.1 炎癥因子TNF-α,IL-1β和IL-10的濃度變化趨勢46-48
• 4.5.2 MPO,MDA和NO的濃度變化趨勢48-49
• 4.6 本章小結(jié)49-51
• 結(jié)論51-53
• 參考文獻53-62
• 攻讀碩士學位期間取得的學術(shù)成果62-63
• 致謝63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：658274