本文關(guān)鍵詞：Cathepsin L通過調(diào)節(jié)Bim的表達(dá)影響Rotenone誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元凋亡

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【摘要】：目的:觀察魚藤酮(Rotenone,Rot)誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元凋亡中組織蛋白酶L(Cathepsin L,CTSL)和Bcl-2家族成員BH3-only蛋白Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death,Bim)表達(dá)的變化,并探究兩者的關(guān)系;闡明干擾Cathepsin L發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)的作用機(jī)制。方法:采用Rotenone誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡,Western blot和免疫熒光法檢測在Rotenone的刺激下PC12細(xì)胞中Cathepsin L、Bim、Egr-1的蛋白表達(dá)變化;Annexin V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst 33258染色法檢測干擾Cathepsin L或Bim對(duì)Rotenone誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用;Western blot和免疫熒光法檢測干擾或過表達(dá)Cathepsin L對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bim、Egr-1、B-Myb表達(dá)的影響;采用側(cè)腦室給藥法進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn),免疫組化法檢測Cathepsin L抑制劑Z-FF-FMK對(duì)Rotenone引起的神經(jīng)元凋亡的保護(hù)作用及Cathepsin L、Bim表達(dá)的變化。結(jié)果:在Rotenone刺激下,PC12細(xì)胞中Cathepsin L從2h起表達(dá)明顯,Bim在3h時(shí)表達(dá)明顯。干擾Cathepsin L顯著地減少Rotenone誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡和Bim表達(dá)的增強(qiáng);而過表達(dá)Cathepsin L則增加了PC12細(xì)胞內(nèi)Bim的表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),Cathepsin L能調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子B-Myb進(jìn)而調(diào)節(jié)Bim,而不影響Egr-1的表達(dá)。抑制Cathepsin L減少了Rotenone誘導(dǎo)的大鼠多巴胺能神經(jīng)元的凋亡和Bim的表達(dá)。結(jié)論:干擾Cathepsin L對(duì)Rotenone誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元的凋亡具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能是通過影響轉(zhuǎn)錄因子B-Myb的轉(zhuǎn)錄進(jìn)而抑制了凋亡蛋白Bim的表達(dá),從而抑制神經(jīng)元凋亡;而過表達(dá)Cathepsin L則可能激活B-Myb的轉(zhuǎn)錄進(jìn)而增加Bim的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：Rotenone Cathepsin L Bim 凋亡 B-Myb
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R742.5
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-11
• 材料與方法11-20
• 1 細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 2 材料與試劑11
• 3 主要儀器11-12
• 4 實(shí)驗(yàn)方法12-20
• 結(jié)果20-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 綜述42-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 英文縮寫詞表51-52
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文52-53
• 致謝53-54

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本文編號(hào)：657465