本文關(guān)鍵詞：被動運動干預(yù)對大鼠失神經(jīng)萎縮骨骼肌中miRNA-1表達(dá)和成肌細(xì)胞分化的影響

  更多相關(guān)文章： 失神經(jīng) 肌萎縮 被動運動 miR-1 細(xì)胞分化

【摘要】：目的:1、探討miRNA-1在大鼠早期失神經(jīng)后骨骼肌中不同時段的表達(dá);2、研究被動運動對失神經(jīng)骨骼肌miRNA-1表達(dá)以及成肌細(xì)胞分化的影響。方法:取SD大鼠27只,體質(zhì)量(200±10)g隨機分成假手術(shù)組、失神經(jīng)3,7,14,28 d組、失神經(jīng)被動運動3,7,14,28 d組,3只/組。假手術(shù)組大鼠不切斷右下肢坐骨神經(jīng),于手術(shù)當(dāng)日處死,失神經(jīng)組、失神經(jīng)被動運動組大鼠切斷右下肢坐骨神經(jīng)。術(shù)后1 d起,將失神經(jīng)被動運動組大鼠固定于自制裝置上,抓住趾部,與脊柱呈45°向后外方牽拉右后肢,至右后肢膝、踝關(guān)節(jié)均完全伸直,再向相反方向活動右后肢,以使右后肢膝、踝關(guān)節(jié)完全屈曲并貼近脊柱,每天被動活動2次,每次約持續(xù)3分鐘,共活動600個周期,直至切取標(biāo)本之日。分別干預(yù)3,7,14,28 d后,取各大鼠腓腸肌標(biāo)本稱重及HE染色觀察腓腸肌細(xì)胞直徑對萎縮情況進(jìn)行綜合評價;RT-PCR法檢測miRNA-1進(jìn)行檢測;RT-PCR、Westernblot技術(shù)分別檢測Myo D的m RNA和蛋白質(zhì)的表達(dá);免疫組化對成肌細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,觀察其分化水平。結(jié)果:失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組腓腸肌失神經(jīng)后均有不同程度萎縮,隨失神經(jīng)時間延長,肌纖維排列逐漸紊亂,肌細(xì)胞直徑逐漸減小,失去正常的結(jié)構(gòu)形態(tài)。失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組術(shù)后各時間點腓腸肌濕重及肌細(xì)胞直徑均小于假手術(shù)組(P0.05);失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組間除術(shù)后3 d腓腸肌濕重比以及術(shù)后3、28 d肌細(xì)胞直徑比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)外,其余各時間點失神經(jīng)被動運動均大于失神經(jīng)組(P0.05)。術(shù)后隨時間延長,失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組miRNA-1和Myo D基因相對表達(dá)量呈逐漸升高趨勢,但各時間點均顯著低于假手術(shù)組(P0.05);失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組間除術(shù)后3 d比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義外(P0.05),術(shù)后7、14、28 d失神經(jīng)被動運動組miRNA-1和Myo D基因相對表達(dá)量均高于失神經(jīng)組(P0.05)。免疫組織化學(xué)染色示各組各時間點Myo D均呈陽性表達(dá),假手術(shù)組陽性表達(dá)少于失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組;失神經(jīng)組和失神經(jīng)被動運動組隨失神經(jīng)時間延長,陽性表達(dá)逐漸增多,且失神經(jīng)被動運動組各時間點陽性表達(dá)均多于失神經(jīng)組。相關(guān)性分析結(jié)果示miRNA-1、Myo D分別與腓腸肌濕重比在3、7 d時無相關(guān)性(P0.05),14、28 d時成正相關(guān)(P0.05);各時間點Myo D與miRNA-1基因相對表達(dá)量成正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:被動運動可能通過促進(jìn)miRNA-1的表達(dá)以促成肌細(xì)胞分化發(fā)揮失神經(jīng)骨骼肌萎縮防治作用。
【關(guān)鍵詞】：失神經(jīng) 肌萎縮 被動運動 miR-1 細(xì)胞分化
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R746.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文縮略詞9-10
• 前言10-11
• 1 材料與方法11-21
• 1.1 實驗動物和分組11
• 1.2 主要試劑11-12
• 1.3 主要實驗儀器12
• 1.4 實驗方法12-20
• 1.5 統(tǒng)計學(xué)方法20-21
• 2 結(jié)果21-27
• 2.1 肌濕質(zhì)量比21
• 2.2 肌纖維細(xì)胞直徑21-22
• 2.3 miRNA-1 的表達(dá)22-23
• 2.4 myoD mRNA的表達(dá)23-25
• 2.5 myoD蛋白的表達(dá)25
• 2.6 成肌細(xì)胞分化25-26
• 2.7 miRNA-1 和myoD表達(dá)變化與肌萎縮關(guān)系26-27
• 3 討論27-29
• 4 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 綜述33-46
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 致謝46-47
• 在學(xué)期間參與的科研課題與研究成果47-48
• 個人簡歷48

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本文編號：620835