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偏頭痛相關(guān)microRNA表達譜及靶向IL-1β的microRNA篩選研究

發(fā)布時間:2017-08-03 16:29

  本文關(guān)鍵詞:偏頭痛相關(guān)microRNA表達譜及靶向IL-1β的microRNA篩選研究


  更多相關(guān)文章: 偏頭痛 microRNA IL-1β 三叉神經(jīng)節(jié) 炎癥因子


【摘要】:背景:偏頭痛是一種常見的神經(jīng)血管紊亂疾病,其患病率約為10%-20%左右,為社會帶來嚴重的經(jīng)濟負擔。其發(fā)病機制還不十分清楚。三叉神經(jīng)血管反射學(xué)說以及細胞因子介導(dǎo)的硬腦膜無菌炎癥反應(yīng)是頭痛的主要學(xué)說。白細胞介素1β(interleukin-1beta,IL-1β)在偏頭痛大鼠三叉神經(jīng)節(jié)(trigeminal ganglia,TG)中、在偏頭痛患者的外周靜脈血和頸靜脈血中表達的升高,說明其可能參與偏頭痛的發(fā)病機制,但是其具體作用機制尤其是分子機制還未知。微小RNA(microRNA,mi RNA)是一類長度約為18-25個核苷酸的小單鏈RNA分子,在轉(zhuǎn)錄后水平通過降解mRNA或抑制其表達來誘導(dǎo)基因沉默,miRNA參與多種生物過程如細胞分化和凋亡,以及多種疾病過程如腫瘤、神經(jīng)病理性疼痛和心血管疾病。但目前鮮有偏頭痛相關(guān)miRNA的報道。目的:探索miRNA在偏頭痛大鼠TG和正常大鼠TG中的表達差異。并在這些差異表達的micro RNA中初步篩選靶作用于IL-1β的miRNA,探討IL-1β在偏頭痛發(fā)病過程中的分子機制,為防治偏頭痛尋找新的生物學(xué)標記物及治療靶點。方法:應(yīng)用化學(xué)物質(zhì)重復(fù)刺激大鼠硬腦膜,誘導(dǎo)炎癥,建立偏頭痛大鼠模型。選取雄性Sprague Dawley(SD)大鼠34只,體重約為160-220g,隨機分為假手術(shù)組和致炎劑(inflammation soup,IS)1d組、2d組和3d組。大鼠行硬腦膜外置管術(shù);謴(fù)5天后,IS組分別硬腦膜給予IS 10μl/d,假手術(shù)組只行矢狀竇旁硬腦膜下置管術(shù),余實驗操作同IS組。Western blot檢測各組大鼠TG中IL-1β的表達情況。提取假手術(shù)組及IS3d組大鼠TG的RNA進行miRNA芯片檢測;四種不同的生物信息學(xué)軟件預(yù)測靶作用IL-1β基因3’UTR區(qū)的miRNA,結(jié)合芯片結(jié)果取交集。篩選5個交集中的miRNA和3個上調(diào)的miRNA和進行實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)驗證。結(jié)果:硬腦膜下置管術(shù)后5d,大鼠眶周痛閾與術(shù)前比無差異(P0.05),硬腦膜給予IS 3d后,大鼠眶周痛閾明顯下降(P0.05)。與假手術(shù)組比,IS2d和IS3d組大鼠TG中IL-1β表達是升高的。IS3d組與假手術(shù)組芯片結(jié)果比較共有23個差異表達的mi RNA(倍數(shù)1.5),其中上調(diào)的有17個,下調(diào)的有6個。qRT-PCR結(jié)果顯示1個上調(diào)的miRNA:miR-3560及2個下調(diào)的miRNA:miR-760-3p、miR-130a-3p與芯片結(jié)果一致(P0.05)。結(jié)論:IS重復(fù)刺激大鼠硬腦膜引起眶周痛閾降低。IS3d組與假手術(shù)組大鼠TG中存在著差異表達的miRNA,miR-760-3p和miR-130a-3p可能調(diào)節(jié)IL-1β的表達,從而參與IL-1β在偏頭痛發(fā)病中的分子機制。
【關(guān)鍵詞】:偏頭痛 microRNA IL-1β 三叉神經(jīng)節(jié) 炎癥因子
【學(xué)位授予單位】:南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R747.2
【目錄】:
  • 縮略語5-6
  • 摘要6-8
  • Abstract8-11
  • 前言11-14
  • 材料和方法14-32
  • 結(jié)果32-40
  • 討論40-45
  • 結(jié)論45-46
  • 參考文獻46-54
  • 文獻綜述54-67
  • 參考文獻60-67
  • 攻讀學(xué)位期間論文發(fā)表情況67-68
  • 致謝68

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