本文關(guān)鍵詞：沉默Mig-7基因的表達可抑制人腦膠質(zhì)瘤U87細胞的體外血管生成擬態(tài)形成能力及侵襲能力

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【摘要】：目的 :研究沉默遷移誘導基因7(migration-inducing gene-7,Mig-7)表達對人腦膠質(zhì)瘤細胞株U87體外血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry,VM)形成能力和侵襲能力的影響,及其可能的作用機制。方法 :采用慢病毒感染系統(tǒng)將特異性針對Mig-7基因的Mig-7-shRNA轉(zhuǎn)入人腦膠質(zhì)瘤U87細胞中,并觀察感染效率;用攜帶有Mig-7-shRNA和陰性對照-shRNA(negative control-shRNA,NC-shRNA)的慢病毒感染U87細胞后,分別采用實時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測各組細胞中Mig-7、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PBK,AKT)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9 mR NA的表達水平以及PI3K、AKT、磷酸化AKT[phospho-AKT(ser473),p-AKT]、MMP-2和MMP-9蛋白的表達水平;采用體外三維培養(yǎng)和Transwell小室侵襲實驗觀察Mig-7基因沉默對各組U87細胞VM形成能力和侵襲能力的影響。結(jié)果:攜帶有Mig-7-shRNA和NC-shRNA的慢病毒成功感染U87細胞,并獲得穩(wěn)定低表達Mig-7基因的U87細胞株;與感染NC-shRNA慢病毒和未感染病毒的U87細胞相比,Mig-7-shRNA感染組U87細胞中Mig-7、PI3K、AKT、MMP-2和MMP-9 mRNA的表達水平以及PI3K、AKT、p-AKT1、MMP-2和MMP-9蛋白的表達水平均顯著降低(P值均0.01);與空白對照組和NC-shRNA感染組相比,Mig-7-shRNA感染組U87細胞的侵襲抑制率分別為75.67%和75.08%(P值均0.01),并且Mig-7-shRNA感染組U87細胞VM形成能力分別下降了79.35%和78.90%(P值均0.05)。結(jié)論 :沉默Mig-7基因的表達降低U87細胞的VM形成及侵襲能力,這可能與Mig-7基因沉默后下調(diào)PI3K、AK,p-AKT、MMP-2和MMP-9的表達有關(guān),提示Mig-7基因在人腦膠質(zhì)瘤細胞的VM和侵襲中發(fā)揮重要的作用。
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】： 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 RNA 小分子干擾 血管生成擬態(tài) 腫瘤浸潤 Mig-基因
【分類號】：R739.41
【正文快照】： 人腦膠質(zhì)瘤是腦部最常見的一種惡性腫瘤,大多數(shù)膠質(zhì)瘤呈浸潤性生長,富含血管,具有高復發(fā)率和低治愈率的特點[1]。血管生成擬態(tài)(vasculogenicmimicry,VM)是Maniotis等[2]命名的在惡性腫瘤中存在的一種不依賴于血管內(nèi)皮細胞的腫瘤微循環(huán)模式,VM數(shù)量越多,腫瘤的侵襲性越強[3];臨

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本文編號：606741