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瘤內(nèi)注射CIK對C6膠質(zhì)瘤抑制作用的實驗研究

發(fā)布時間:2017-07-26 14:20

  本文關(guān)鍵詞:瘤內(nèi)注射CIK對C6膠質(zhì)瘤抑制作用的實驗研究


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【摘要】:目的:探討CIK對C6膠質(zhì)瘤的抑制作用。方法:1.取5只200克雄性SD大鼠顱內(nèi)注射C6腫瘤細胞,模型建立成功取外周血培養(yǎng)CIK細胞。2.采用流式細胞技術(shù)檢測CIK的細胞表型。3.取33只200克雄性SD大鼠顱內(nèi)注射C6腫瘤細胞,采用隨機方法分成A組、B組和C組,待所有大鼠出現(xiàn)癥狀后,即建模第14天時采用隨機法對每組隨機抽取一只大鼠斷頭取腦確定模型已建立成功,模型建立成功后,對照組(A組):成瘤后沿原始注射途徑注入10ul經(jīng)洗滌后不含胎牛血清的培養(yǎng)基。實驗組(B組):成瘤后沿腹腔注射2ml含106/ml并經(jīng)洗滌后不含胎牛血清的CIK細胞懸液。實驗組(C組):成瘤后沿原注射途徑注入10ul含106/ml并經(jīng)洗滌后不含胎牛血清的CIK細胞懸液。4.比較各組大鼠的生存時間;取各組大鼠腦腫瘤組織標本,制作病理切片及石蠟切片,病理切片行鏡下觀察,石蠟切片行免疫組化、腫瘤組織提蛋白行蛋白免疫印跡技術(shù)檢測Vimentin蛋白在膠質(zhì)瘤細胞中的表達水平,計算Vimentin表達量。結(jié)果:1.CIK主要的細胞表型為CD3+CD56+。2.分析結(jié)果提示:三組生存時間比較總體有差異(P0.05),且C組B組A組,其中P0.05代表差異具有統(tǒng)計學意義。3.Western blot檢測結(jié)果:三組Vimentin蛋白總體表達量有差異,且C組B組A組,P0.05。4.免疫組化檢測結(jié)果:三組Vimentin蛋白總體表達量有差異,且C組B組A組,P0.05。5.病理切片結(jié)果:A組未見明顯壞死區(qū)域,B組可見少許壞死區(qū)域,C組見大量壞死區(qū)域。結(jié)論:1.CIK對C6膠質(zhì)瘤具有一定抑制作用;2.腹腔內(nèi)注射CIK對C6膠質(zhì)瘤細胞具有一定的抑制作用,但效果不理想,原因可能是腹腔內(nèi)注射CIK由于存在大網(wǎng)膜包裹作用、血腦屏障作用而導致治療效果不佳;3.瘤內(nèi)注射CIK對C6腫瘤細胞抑制作用比腹腔內(nèi)注射效果更加明顯,載瘤動物生存時間更長、Vimentin蛋白表達量減少更明顯,原因可能是CIK瘤內(nèi)注射避開了血腦屏障,直接和靶細胞接觸從而發(fā)揮抗瘤作用。
【關(guān)鍵詞】:CIK C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 抑制作用
【學位授予單位】:遵義醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R739.41
【目錄】:
  • 中英縮略詞對照表4-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-12
  • 1 材料12-14
  • 1.1 實驗動物及細胞株12
  • 1.2 主要實驗材料12-14
  • 2 方法14-25
  • 2.1 主要試劑的配制14
  • 2.2 實驗步驟14-24
  • 2.3 統(tǒng)計學方法24-25
  • 3 結(jié)果25-36
  • 3.1 細胞形態(tài)學觀察25-26
  • 3.2 CIK 細胞表型26-27
  • 3.3 大鼠生存時間27-29
  • 3.4 腫瘤組織肉眼形狀29-31
  • 3.5 病理切片31-32
  • 3.6 蛋白免疫印跡32-33
  • 3.7 免疫組化33-36
  • 4 討論36-41
  • 4.1 CIK 誘導、培養(yǎng)的分析38
  • 4.2 CIK 參與腦膠質(zhì)瘤細胞凋亡機制的探討38-40
  • 4.3 Vimentin 在膠質(zhì)瘤的表達分析40
  • 4.4 腫瘤模型建立的分析40-41
  • 5 結(jié)論41-42
  • 參考文獻42-45
  • 綜述45-55
  • 參考文獻51-55
  • 致謝55-56
  • 作者簡介56

【參考文獻】

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本文編號:576862

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