強直性肌營養(yǎng)不良癥的臨床、病理及分子生物學特征研究

發(fā)布時間：2017-07-16 15:16

本文關(guān)鍵詞：強直性肌營養(yǎng)不良癥的臨床、病理及分子生物學特征研究

【摘要】：目的:強直性肌營養(yǎng)不良癥(Myotonic dystrophy,DM)是一種累及全身系統(tǒng)的常染色體顯性遺傳疾病,為成人最常見的肌營養(yǎng)不良癥,主要臨床表現(xiàn)除進行性肌無力、肌萎縮和肌強直外,常伴有白內(nèi)障、心律失常、糖尿病、早禿、多汗、性功能障礙和智力減退等多系統(tǒng)損害。其根據(jù)基因突變位點的不同可分為DM1型和DM2型。該病臨床表現(xiàn)和肌肉病理表現(xiàn)多樣,與其他肌強直性肌病及其他肌營養(yǎng)不良癥早期難以鑒別。然而隨著分子生物學的發(fā)展,我們對強直性肌營養(yǎng)不良癥有了更深的認識,分子層面的研究使得該病的診斷進入了一個嶄新時代,為疾病明確診斷奠定了基礎(chǔ)。本實驗通過對DM患者進行臨床資料的總結(jié)、肌肉病理檢查和對位于染色體19q13.3的強直性肌營養(yǎng)不良蛋白激酶基因(dystrophia myotonica protein kinase,DMPK)和位于染色體3q21.3的鋅指蛋白9基因(zinc finger protein 9,ZNF9)進行檢測,達到明確診斷,從而提高對強直性肌營養(yǎng)不良癥的認知和診斷水平,減少誤診率,以指導治療、判斷預后和提供遺傳咨詢。方法:收集2007年6月至2016年1月期間河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科門診及住院病人,臨床和病理符合強直性肌營養(yǎng)不良癥診斷標準,共25例。對其臨床資料(包括性別、發(fā)病年齡、就診年齡、病程、家族史、首發(fā)癥狀、體征、肌無力部位、是否存在肌萎縮及肌萎縮部位、“斧頭面”、其他系統(tǒng)受累情況、肌酶、肌電圖、心電圖等)和肌肉組織病理特點進行匯總分析,并收集同期臨床、肌肉病理常規(guī)染色及免疫組化染色診斷為肢帶型肌營養(yǎng)不良2B型患者和同期肌肉病理染色正常各3例作為對照。本組8例患者(包括6個家系)經(jīng)過知情同意后抽取外周血進行DMPK和ZNF9基因檢測,了解其分子遺傳學特征。對經(jīng)過基因診斷的患者與對照組進行核內(nèi)移纖維比例和最小Feret直徑的比較,并進行基因檢測數(shù)目與發(fā)病年齡和肌肉病理受累程度相關(guān)性研究。結(jié)果:1 DM患者的臨床特點本實驗收集了2007年6月至2016年1月期間河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科門診及住院病人,臨床和病理符合強直性肌營養(yǎng)不良癥診斷標準,共25例。其中男性14例,女性11例,男女發(fā)病比為1.27:1,男性多見。DM患者發(fā)病年齡9-52歲,平均26.96±11.95歲,集中存在于10-40歲,病程1-21年,中位病程為8(11.5)年。本組患者有家族史者11例占45.83%。本組患者首發(fā)癥狀表現(xiàn)不一,表現(xiàn)為四肢無力者占40%;雙下肢無力者占20%;雙手握拳后不能立即伸開者占20%;雙上肢無力者占12%;起始癥狀為雙下肢憋脹和張口困難少見。具有診斷價值的常見體征出現(xiàn)的高低順序依次為肢體肌力下降、雙手握拳后不能立即伸開、叩擊性肌強直、肌肉萎縮,其中7例可見典型的“斧頭面”。肢體肌力下降者中,遠端重于近端多見。肌肉萎縮出現(xiàn)的高低順序依次為上肢遠端萎縮、咀嚼肌萎縮、下肢萎縮、上肢近端萎縮、肩部肌肉萎縮和胸鎖乳突肌萎縮;肋間肌萎縮少見。本組患者中尚可見到非特異性的腱反射減弱或消失和腱反射亢進。本組DM患者合并其他多系統(tǒng)損害包括早禿、性功能障礙、心臟損害、白內(nèi)障及智力下降等。實驗室檢查可見多數(shù)患者肌酶輕至中度升高,中位值為304(315.25)IU/L。肌電圖檢查均顯示肌強直電位,其中60%合并肌源性損害,8%合并神經(jīng)源性損害。2 25例DM患者的肌肉病理分析光鏡下,HE染色顯示22例DM患者肌束衣、肌內(nèi)衣結(jié)締組織部分區(qū)域增生,肌束內(nèi)肌纖維排列疏松;25例DM患者肌纖維大小不一,可見萎縮肌纖維呈圓形或角形外觀,個別肌纖維肥大;24例患者可見肌膜核明顯增加;23例患者可見肌纖維不同程度的核內(nèi)移;23例患者有核袋形成;15例患者存在不同程度的肌纖維壞死或吞噬;13例患者肌肉病理中可見環(huán)狀纖維;9例患者肌纖維中存在肌漿塊;5例患者可見肌纖維空泡樣變;炎細胞浸潤少見。MGT染色可見4例患者存在破碎紅纖維(RRF)。25例患者NADH-TR和SDH染色均表現(xiàn)為部分肌纖維氧化酶分布不均,呈蟲蝕樣改變、邊緣深染或部分萎縮肌纖維深染。NSE染色示19例患者可見部分肌纖維萎縮深染。9例患者ORO染色可見脂肪增多。PAS染色示7例患者糖原成分輕度增高。23例患者進行了ACP染色,其中20例示酸性磷酸酶活性輕至中度升高。ATP染色示25例患者肌纖維均有不同程度的萎縮,其中17例患者肌纖維萎縮主要累及Ⅰ型,7例患者萎縮累及兩型,1例患者萎縮主要累及Ⅱ型;存在肌源性群組化者共13例,其中Ⅰ型纖維占優(yōu)勢者6例,Ⅱ型纖維占優(yōu)勢者7例。5例DM患者行免疫組織化學染色顯示Dystrophin-N、C、R,Dysferlin,Sacroglycan-α、β、γ、δ染色未見異常改變。3基因檢測家系分析本組8例患者(包括6個家系)經(jīng)過知情同意后抽取外周血進行DMPK和ZNF9基因檢測。結(jié)果顯示8例患者(包括6個家系)均為DMPK基因突變,CTG重復次數(shù)均大于50,確診為DM1型。本組4個DM1型家系有兩代及兩代以上發(fā)病,具有明顯的遺傳早現(xiàn)現(xiàn)象,第二代患者(均遺傳自母親)發(fā)病年齡較第一代發(fā)病提前30.0±8.1年,且CTG的重復數(shù)目較第一代增多,平均為389.5±200.9個。其中1例家系中第三代患者(遺傳自父親),目前尚未出現(xiàn)臨床癥狀,CTG擴增數(shù)目較第二代減少。4肌肉病理形態(tài)計量分析DM1型患者較Dysferlinopathy患者核內(nèi)移顯著增多;DM1型患者肌肉病理Ⅰ型肌纖維直徑明顯小于Ⅱ肌纖維,與正常對照組之間存在差異,然而并無統(tǒng)計學意義。5基因相關(guān)性分析DM1型患者CTG重復擴增次數(shù)與發(fā)病年齡呈負相關(guān),與核內(nèi)移纖維比例呈正相關(guān)。結(jié)論:1 DM是一種常染色體顯性遺傳肌病,臨床表現(xiàn)復雜多樣,除肌強直、肌無力和肌萎縮最常見外,尚可伴有其他多系統(tǒng)損害;該病常見體征為肌力下降、雙手握拳后不能立即伸開、叩擊性肌強直和肌萎縮。因此,加強對該病的認識,詳細地詢問病史和查體,提高本病的臨床診斷率,減少誤診。2肌電圖對DM的診斷具有重要價值,而肌酶對DM的診斷價值不大。3 DM的主要肌肉病理特征為肌纖維大小不一,核內(nèi)移、核袋形成、肌膜核增多、肌源性群組化現(xiàn)象和主要累及Ⅰ型肌纖維的萎縮。4基因檢測可以對DM患者明確診斷和分型,經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)本地區(qū)最常見的亞型為DM1型,該型具有明顯的遺傳早現(xiàn)現(xiàn)象,且CTG的重復次數(shù)越多,發(fā)病年齡越早,肌肉病理核內(nèi)移程度越重。這為DM1型明確診斷、指導治療、判斷預后,提供遺傳咨詢,對減少后代發(fā)病,提高人口質(zhì)量具有重大意義。
【關(guān)鍵詞】：強直性肌營養(yǎng)不良癥 臨床特點 肌肉病理 基因檢測 CTG
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R746.2
【目錄】：