發(fā)布時間：2017-07-07 05:07

  本文關鍵詞：microRNA-7在大鼠MCAO模型中與PARP調控關系的研究

  更多相關文章： 腦缺血 miRNA PARP 細胞凋亡

【摘要】：[目的]本課題采用線栓法建立大鼠大腦中動脈栓塞(MCAO)模型,測定腦缺血半暗帶中miR-7和PARP的表達；并采用腦室內立體定向注射miR-7 agomir或miR-7antagomir過表達miR-7或抑制miR-7表達,通過測定腦缺血半暗帶中miR-7、PARP的表達及腦梗死體積、細胞凋亡、神經功能評分。探討在大鼠MCAO模型中miR-7與PARP的調控關系、miR-7在腦缺血中對腦損傷的影響及其分子機制。[方法]將60只健康成年雄性大鼠隨機分為4組,每組15只：假手術組、單純腦梗組、miR-7激動組、miR-7抑制組。采用線栓法建立SD大鼠MCAO(大腦中動脈栓塞)模型。采用Zea Longa評分判斷模型是否進入實驗。采用腦室內立體定向注射的方法將miR-7 agomir或miR-7 antagomir注入大鼠側腦室內調控大鼠腦內miR-7的表達。MCAO模型制備完成24小時后采用mNSS評分法對大鼠進行神經功能評分。通過氯化三苯基四氮唑染色法來鑒別梗死與非梗死腦組織：白色為梗死區(qū),紅色為非梗死區(qū)。采用免疫酶法檢測各組大鼠腦組織中PARP的表達。采用TUNEL法檢測各組大鼠腦組織中細胞凋亡情況。采用RT-PCR定量檢測各組大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達。采用Western Blot檢測各組大鼠腦缺血半暗帶中PARP的表達。[結果]1.在SD大鼠MCAO模型中miR-7表達降低：和假手術組相比,各組腦缺血大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達明顯降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；2.通過腦室內立體定向注射miR-7 agomir或miR-7 antagomir可成功調控miR-7的表達：采用Real-time PCR檢測腦缺血半暗帶中miR-7的表達,與單純腦梗組相比,miR-7激動組大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達水平明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而miR-7抑制組大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達水平明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.miR-7抑制PARP-表達：與單純腦梗組相比,miR-7激動組miR-7表達增高,同時PARP-1表達減少,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05); miR-7抑制組miR-7表達顯著減少,同時PARP的表達升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。表明miR-7可以抑制PARP表達,PARP的表達受miR-7的調控,PARP可能是miR-7的靶基因。4.在大鼠MCAO模型中,miR-7的表達變化對腦損傷產生的影響：與單純腦梗組相比,miR-7激動組腦梗死范圍減小、細胞凋亡減少、神經功能缺失減少,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；相反,miR-7抑制組梗死范圍增大、細胞凋亡增多、神經功能缺失增加,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。表明miR-7在腦缺血后腦損害中發(fā)揮重要作用,過表達miR-7可以減輕腦缺血誘導的腦損傷。[結論]1.大鼠腦缺血后24小時腦缺血半暗帶中miR-7的表達降低。2.通過腦室內立體定向注射miR-7 agomir或miR-7 antagomir可成功調控miR-7的表達。3.在大鼠腦組織中,PARP的表達受miR-7的調控, PARP可能是miR-7的靶基因。4.過表達miR-7可以減小腦梗死范圍、減少細胞凋亡、減輕神經功能缺損癥狀,減輕腦缺血性損傷。5.在大鼠腦缺血病理過程中,miR-7發(fā)揮腦保護作用,其減輕腦缺血性損傷的機制可能是抑制PARP表達。
【關鍵詞】：腦缺血 miRNA PARP 細胞凋亡
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R743.3;R-332
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-32
• 結果32-43
• 討論43-51
• 結論51-52
• 參考文獻52-56
• 綜述56-64
• 參考文獻60-64
• 攻讀學位期間獲得的學術成果64-65
• 致謝65

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃勝輝;黃志勇;;PARP-1:一個腫瘤治療的新靶點[J];世界華人消化雜志;2006年09期

2 于孟斌;楊予濤;周曉巍;黃培堂;;PARP的生物學與病理學功能[J];中國生物化學與分子生物學報;2008年12期

3 ;Increased Levels of p53 and PARP-1 in EL-4 Cells Probably Related with the Immune Adaptive Response Induced by Low Dose Ionizing Radiation in vitro[J];Biomedical and Environmental Sciences;2010年06期

4 張騰;王翠玲;張寧;劉建利;;PARP-1抑制劑研究進展[J];中國新藥雜志;2014年07期

5 黃神安;徐江晶;張吉翔;;PARP-1與HIV的關系[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2007年04期

6 許開武;宋新明;;PARP1及其抑制劑在腫瘤中的研究進展[J];消化腫瘤雜志(電子版);2013年01期

7 李凡;廖志鋼;;PARP的結構、功能及其與DNA損傷的關系[J];河南科技大學學報(醫(yī)學版);2005年04期

8 何勤;柯根杰;;PARP及相關分子在糖尿病性視網膜病變中的表達研究[J];實用防盲技術;2010年04期

9 毛力真;PARP與缺血性神經元損傷后DNA的修復[J];中國臨床神經科學;1999年04期

10 王鐵君;韓成敏;李星花;尹金植;陳玉丙;王紅勇;李英普;;小鼠PARP-1基因RNAi表達質粒的構建與篩選[J];中國生物制品學雜志;2009年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 張銘湘;;PARP-1心血管疾病治療新靶標[A];中華醫(yī)學會第十三次全國心血管病學術會議專題報告專輯[C];2011年

2 朱枝祥;金晶;陳曉光;;多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP—1)抑制劑篩選方法的建立及化合物篩選[A];全國第十二屆生化與分子藥理學學術會議論文集[C];2011年

3 田琳;宋珊珊;高艾;牛丕業(yè);左昕;郭偉;;5Aza-dc調控石英惡性轉化人支氣管上皮細胞PARP-1基因表達及對細胞生長的抑制作用[A];全國生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學學術會議論文集[C];2010年

4 王旭艷;朱啟華;朱虹;何俏軍;徐云根;;PARP-1抑制劑的設計,合成及生物活性研究[A];2012長三角藥物化學研討會論文集[C];2012年

5 Chunmei Gong;Gonghua Tao;Linqing Yang;Jianjun Liu;Qingcheng Liu;Wenjie Li;Zhixiong Zhuang;;Methylation of PARP-1 promoter involved in the regulation of nano-SiO_2-induced decrease of PARP-1 mRNA expression[A];2012深圳市預防醫(yī)學會學術研討會論文匯編[C];2012年

6 江燕;洪順家;;PARP在小鼠不同發(fā)育階段卵泡中的表達及PJ34對小鼠超排卵的影響[A];中華醫(yī)學會第三次全國絕經學術會議暨絕經相關問題學習班論文匯編[C];2011年

7 朱枝祥;金晶;陳曉光;;多聚(ADP-核糖)聚合酶-2(PARP2)抑制劑高通量篩選模型的建立[A];2013年全國老年性癡呆與相關疾病學術會議論文匯編[C];2013年

8 丁國憲;宗峰;程蘊琳;;PARP活性抑制對T淋巴細胞壽命影響的實驗研究[A];第七屆全國老年醫(yī)學學術會議暨海內外華人老年醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬殿棟;PARP-1依賴parthanatos在脫氧鬼臼毒素誘導神經膠質瘤細胞死亡中的作用及機制研究[D];吉林大學;2015年

2 王凌霄;PARP-1抑制劑的設計、合成與生物活性評價[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2016年

3 劉峰;PARP-1抑制劑抗芥子氣損傷的作用及機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2016年

4 郝琳;抑制PARP-1及iNOS表達在大鼠心肌梗死后心功能保護中的作用研究[D];山東大學;2016年

5 李慶蓉;PARP介導的NF-κB信號通路轉導DPN病變分子機制的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2016年

6 王宵旰;PARP1 Val762Ala多態(tài)性降低酶活性[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2007年

7 王鐵君;Chk-1和PARP-1 SiRNA輻射增敏的實驗研究[D];吉林大學;2009年

8 李永進;PKC-MAPK信號通路及PARP在長期接觸低劑量氯化甲基汞所致腦發(fā)育損傷中的作用[D];吉林大學;2006年

9 李麗;PARP-1調控LPS誘導的巨噬細胞HMGB1釋放的機制及意義研究[D];華中科技大學;2012年

10 曹奕強;PARP-1在人腦膠質瘤中的表達及其抑制劑BMN-673對膠質瘤細胞治療的增敏作用[D];中南大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周瑩瑩;PARP-1/AIF介導的Parthanatos通路在戊二酸尿癥大鼠紋狀體損傷中的機制研究[D];鄭州大學;2015年

2 趙靜雅;山西地區(qū)漢族人Graves病與PARP-1、STAT4基因多態(tài)性的關聯(lián)研究[D];山西醫(yī)科大學;2016年

3 高銘;4-胺基-1,8-萘酰亞胺結構類似物作為PARP抑制劑的研究[D];華僑大學;2015年

4 張燦燦;PARP-1調控卵巢癌上皮—間質轉化、增殖、遷移作用的研究[D];山東大學;2016年

5 譚阿蕊;microRNA-7在大鼠MCAO模型中與PARP調控關系的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2016年

6 樊彩芳;PARP-1/AIF通路介導戊二酸尿癥Ⅰ型大鼠大腦皮質損傷的機制研究[D];鄭州大學;2015年

7 李燕;PARP-1對卵巢癌血管生成、增殖的影響及其機制探討[D];山東大學;2014年

8 劉琳琳;PARP-1活性參與NF-κB的基因轉錄調控的機制研究[D];東北師范大學;2011年

9 楊雪麗;PARP抑制劑的篩選與活性評價[D];江南大學;2014年

10 張光昊;抑制PARP-1改善衰老導致的內皮細胞功能紊亂[D];山東大學;2015年

，

本文編號：528912