本文關(guān)鍵詞：microRNA-7在大鼠MCAO模型中與PARP調(diào)控關(guān)系的研究

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【摘要】：[目的]本課題采用線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)模型,測(cè)定腦缺血半暗帶中miR-7和PARP的表達(dá)；并采用腦室內(nèi)立體定向注射miR-7 agomir或miR-7antagomir過(guò)表達(dá)miR-7或抑制miR-7表達(dá),通過(guò)測(cè)定腦缺血半暗帶中miR-7、PARP的表達(dá)及腦梗死體積、細(xì)胞凋亡、神經(jīng)功能評(píng)分。探討在大鼠MCAO模型中miR-7與PARP的調(diào)控關(guān)系、miR-7在腦缺血中對(duì)腦損傷的影響及其分子機(jī)制。[方法]將60只健康成年雄性大鼠隨機(jī)分為4組,每組15只：假手術(shù)組、單純腦梗組、miR-7激動(dòng)組、miR-7抑制組。采用線栓法建立SD大鼠MCAO(大腦中動(dòng)脈栓塞)模型。采用Zea Longa評(píng)分判斷模型是否進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。采用腦室內(nèi)立體定向注射的方法將miR-7 agomir或miR-7 antagomir注入大鼠側(cè)腦室內(nèi)調(diào)控大鼠腦內(nèi)miR-7的表達(dá)。MCAO模型制備完成24小時(shí)后采用mNSS評(píng)分法對(duì)大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分。通過(guò)氯化三苯基四氮唑染色法來(lái)鑒別梗死與非梗死腦組織：白色為梗死區(qū),紅色為非梗死區(qū)。采用免疫酶法檢測(cè)各組大鼠腦組織中PARP的表達(dá)。采用TUNEL法檢測(cè)各組大鼠腦組織中細(xì)胞凋亡情況。采用RT-PCR定量檢測(cè)各組大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達(dá)。采用Western Blot檢測(cè)各組大鼠腦缺血半暗帶中PARP的表達(dá)。[結(jié)果]1.在SD大鼠MCAO模型中miR-7表達(dá)降低：和假手術(shù)組相比,各組腦缺血大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達(dá)明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；2.通過(guò)腦室內(nèi)立體定向注射miR-7 agomir或miR-7 antagomir可成功調(diào)控miR-7的表達(dá)：采用Real-time PCR檢測(cè)腦缺血半暗帶中miR-7的表達(dá),與單純腦梗組相比,miR-7激動(dòng)組大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達(dá)水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而miR-7抑制組大鼠腦缺血半暗帶中miR-7的表達(dá)水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.miR-7抑制PARP-表達(dá)：與單純腦梗組相比,miR-7激動(dòng)組miR-7表達(dá)增高,同時(shí)PARP-1表達(dá)減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); miR-7抑制組miR-7表達(dá)顯著減少,同時(shí)PARP的表達(dá)升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。表明miR-7可以抑制PARP表達(dá),PARP的表達(dá)受miR-7的調(diào)控,PARP可能是miR-7的靶基因。4.在大鼠MCAO模型中,miR-7的表達(dá)變化對(duì)腦損傷產(chǎn)生的影響：與單純腦梗組相比,miR-7激動(dòng)組腦梗死范圍減小、細(xì)胞凋亡減少、神經(jīng)功能缺失減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；相反,miR-7抑制組梗死范圍增大、細(xì)胞凋亡增多、神經(jīng)功能缺失增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。表明miR-7在腦缺血后腦損害中發(fā)揮重要作用,過(guò)表達(dá)miR-7可以減輕腦缺血誘導(dǎo)的腦損傷。[結(jié)論]1.大鼠腦缺血后24小時(shí)腦缺血半暗帶中miR-7的表達(dá)降低。2.通過(guò)腦室內(nèi)立體定向注射miR-7 agomir或miR-7 antagomir可成功調(diào)控miR-7的表達(dá)。3.在大鼠腦組織中,PARP的表達(dá)受miR-7的調(diào)控, PARP可能是miR-7的靶基因。4.過(guò)表達(dá)miR-7可以減小腦梗死范圍、減少細(xì)胞凋亡、減輕神經(jīng)功能缺損癥狀,減輕腦缺血性損傷。5.在大鼠腦缺血病理過(guò)程中,miR-7發(fā)揮腦保護(hù)作用,其減輕腦缺血性損傷的機(jī)制可能是抑制PARP表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血 miRNA PARP 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743.3;R-332
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-32
• 結(jié)果32-43
• 討論43-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 綜述56-64
• 參考文獻(xiàn)60-64
• 攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果64-65
• 致謝65

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