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缺血預適應對局灶性腦缺血再灌注大鼠低氧誘導因子-1α、血管內(nèi)皮生長因子表達的影響

發(fā)布時間:2017-07-06 08:18

  本文關(guān)鍵詞:缺血預適應對局灶性腦缺血再灌注大鼠低氧誘導因子-1α、血管內(nèi)皮生長因子表達的影響


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【摘要】:目的通過觀察缺血預適應對局灶性腦缺血再灌注大鼠皮質(zhì)病理組織學損傷的影響及梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)低氧誘導因子-1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達的變化,探討缺血預適應的腦保護機制。方法1將130只成年雄性SD大鼠隨機分為三組:假手術(shù)組(SO組,n=10)、腦缺血組(MCAO組,n=60)和腦缺血預適應組(BIP組,n=60),后兩組按缺血后再灌注時間的不同分為2、6、12、24、48和72h 6個時間點。每個時間點10只大鼠,其中5只用于HE染色及免疫組化染色,余5只用于Western blot法檢測。2模型制備方法如下:BIP組:采用大腦中動脈(MCA)二次線栓法,給予大鼠右側(cè)大腦中動脈缺血10min作為缺血預適應條件,間隔24h,再次閉塞右側(cè)大腦中動脈,造成缺血2h,而后于再灌注各時間點處死大鼠;MCAO組:以假手術(shù)替代預適應,余步驟同BIP組;SO組:以兩次假手術(shù)替代預適應及再缺血,再灌注24h后處死大鼠取材。3采用HE染色法觀察大鼠腦缺血再灌注后不同時間點額葉皮質(zhì)區(qū)病理組織學變化,采用免疫組化法及Western blot法檢測額葉梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、缺血側(cè)海馬CA1區(qū)HIF-1α與VEGF的蛋白表達。結(jié)果1 SO組未見腦組織病理性改變,與MCAO組對比,BIP組在再灌注各時間點腦組織病理學改變輕。2 MCAO組于腦缺血再灌注2h梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)HIF-1α陽性細胞表達有所增加,24h表達至各時間點最高水平,隨后表達逐漸降低,72h表達仍明顯高于SO組。BIP組梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)HIF-1α的陽性細胞表達在各時間點均比MCAO組多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);除再灌注2、6h外,BIP組海馬CA1區(qū)各時間點HIF-1α陽性細胞表達較MCAO組均增多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3 MCAO組于腦缺血再灌注2h梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)VEGF陽性細胞表達開始增加,隨后表達遞增,到24h表達至各時間點最高水平,之后開始下降,72h表達仍處于較高水平。BIP組各時間點梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)VEGF陽性細胞表達數(shù)量均多于MCAO組,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4 SO組HIF-1α的蛋白條帶表達微弱。MCAO組梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)HIF-1α蛋白表達均于再灌注2h開始增加,隨后逐漸增加,至24h表達量為各時間點峰值,之后開始下降,72h表達仍高于SO組。BIP組梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)各時間點HIF-1α蛋白表達量均高于MCAO組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。5 SO組VEGF蛋白條帶表達微弱。MCAO組梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)VEGF蛋白表達均于再灌注2h開始增加,而后逐漸遞增,至24h達各時間點表達最高水平,隨后表達遞減,72h表達仍維持在較高水平。BIP組梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)各時間點VEGF的蛋白表達量均高于MCAO組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論1缺血預適應后局灶性腦缺血再灌注大鼠腦組織病理學損傷減輕,有效地減輕了腦缺血再灌注損傷。2缺血預適應后局灶性腦缺血再灌注大鼠梗死灶周邊皮質(zhì)區(qū)、海馬CA1區(qū)HIF-1α、VEGF的表達增加。3缺血預適應可能通過上調(diào)HIF-1α、VEGF的表達,誘導腦缺血耐受,發(fā)揮腦保護作用。
【關(guān)鍵詞】:腦缺血預適應 低氧誘導因子-1α 血管內(nèi)皮生長因子 腦缺血耐受
【學位授予單位】:華北理工大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R743.3
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 引言10-11
  • 第1章 實驗研究11-33
  • 1.1 材料與方法11-18
  • 1.1.1 主要試劑11
  • 1.1.2 主要儀器11-12
  • 1.1.3 實驗動物12
  • 1.1.4 模型制備及入組標準12-13
  • 1.1.5 HE染色及免疫組化染色13-14
  • 1.1.6 Western blot檢測14-17
  • 1.1.7 圖像分析方法17-18
  • 1.1.8 統(tǒng)計學方法18
  • 1.2 結(jié)果18-23
  • 1.2.1 HE結(jié)果18-19
  • 1.2.2 免疫組化結(jié)果19-21
  • 1.2.3 Western blot結(jié)果21-23
  • 1.3 討論23-29
  • 1.3.1 腦缺血預適應與模型制備23-24
  • 1.3.2 腦缺血再灌注大鼠HIF-1α 的表達及腦缺血預適應對其影響24-26
  • 1.3.3 腦缺血再灌注大鼠VEGF的表達及腦缺血預適應對其影響26-27
  • 1.3.4 HIF-1α、VEGF在腦缺血耐受中的相互作用27-29
  • 1.4 小結(jié)29
  • 參考文獻29-33
  • 第2章 綜述 低氧誘導因子-1、血管內(nèi)皮生長因子與腦缺血耐受33-40
  • 2.1 HIF-1 的基本概況33-34
  • 2.1.1 HIF-1 的結(jié)構(gòu)特征33
  • 2.1.2 HIF-1 的生物學作用33-34
  • 2.2 VEGF的基本概況34-35
  • 2.2.1 VEGF的結(jié)構(gòu)特征34
  • 2.2.2 VEGF的生物學作用34-35
  • 2.3 HIF-1、VEGF在缺血耐受中的作用35-37
  • 2.3.1 HIF-1 與腦缺血耐受35-36
  • 2.3.2 VEGF與腦缺血耐受36
  • 2.3.3 HIF-1、VEGF在腦缺血耐受中的相互作用36-37
  • 2.4 展望37
  • 參考文獻37-40
  • 結(jié)論40-41
  • 附錄41-55
  • 致謝55-56
  • 導師簡介56-57
  • 作者簡介57-58
  • 學位論文數(shù)據(jù)集58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 任冬青;馬永豐;華玉芳;岳海源;;丙泊酚對大鼠局灶性腦缺血-再灌注低氧誘導因子-1和熱休克蛋白70的影響[J];臨床麻醉學雜志;2008年03期

2 劉勇;朱遂強;王云甫;劉光健;劉琴;胡錦全;;TIA性缺血預處理對大鼠腦梗死的保護作用[J];湖北醫(yī)藥學院學報;2011年04期

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本文編號:525423

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