本文關(guān)鍵詞：G-CSF對神經(jīng)干細胞缺氧損傷保護作用的研究

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)干細胞 G-CSF HDAC2 缺氧 HIF-1α

【摘要】：目標:采用氯化鈷建立神經(jīng)干細胞(Neural stem cells,NSCs)體外缺氧模型,觀察體外缺氧環(huán)境下粒細胞集落刺激因子(Granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)對神經(jīng)干細胞組蛋白去乙�；�2(Histone deacetylase 2,HDAC2)與低氧誘導因子-1α(Hypoxia-induci ble factor-1α,HIF-1α)表達的影響,探討G-CSF對神經(jīng)干細胞缺氧損傷的保護作用及其可能機制。方法:用鼠C17.2神經(jīng)干細胞系作為研究對象,采用氯化鈷(Co Cl2)模擬缺氧環(huán)境建立NSCs體外缺氧模型。設(shè)立正常對照組、缺氧組、G-CSF干預組,MTT法檢測體外缺氧下不同濃度G-CSF對NSCs存活率的影響,顯微鏡觀察細胞凋亡的形態(tài)學變化,Western Blot法檢測細胞HDAC2、HIF-1α的表達。結(jié)果:1.缺氧環(huán)境下神經(jīng)干細胞的存活率:(1)50、100 umol/L Co Cl2組在12h出現(xiàn)細胞存活率上升,輕度增殖效應,其余時間點細胞存活率下降,差異具有顯著性(P0.05);(2)不同濃度Co Cl2(50、100、200、400、800umol/L)在24h、48h、72h均呈濃度依賴性導致細胞存活率下降,差異具有顯著性(P0.05);(3)200 umol/L Co Cl2呈時間依賴性導致細胞存活率下降;400、800umol/L Co Cl2作用各時間點細胞的存活率明顯小于40%。2.G-CSF干預缺氧環(huán)境下神經(jīng)干細胞的存活率:(1)不同濃度G-CSF(10、50、100ng/ml)在12h、24h、48h、72h細胞存活率均高于0ng/ml G-CSF+Co Cl2組,差異具有顯著性(P0.05);(2)10ng/ml G-CSF組在24h細胞存活率較其他濃度組及時間點均高(P0.05),為88.7±1.2%。3.Western Blot結(jié)果:(1)200umol/L Co Cl2神經(jīng)干細胞缺氧模型:HDAC2表達在12、24、48、72h均比0h降低,具有統(tǒng)計學意義(P0.05);HIF-1α表達在各時間點均比0h增高,24h的表達最高,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)常氧環(huán)境下G-CSF處理神經(jīng)干細胞24h后HDAC2、HIF-1α表達較正常組增加,具有統(tǒng)計學意義(P0.05);(3)缺氧環(huán)境下,缺氧組、G-CSF干預組HDAC2表達均低于正常組,缺氧組較G-CSF干預組低,差異具有顯著性(P0.05);(2)缺氧組、G-CSF干預組HIF-1α高于正常組,缺氧組較G-CSF干預組高,差異具有顯著性(P0.05)。結(jié)論:G-CSF能抑制神經(jīng)干細胞的缺氧損傷,缺氧環(huán)境下G-CSF能上調(diào)神經(jīng)干細胞中HDAC2、HIF-1α的表達,后者可能是前者發(fā)揮抗凋亡及神經(jīng)保護作用的機制之一,且HDAC2與HIF-1α之間有某種關(guān)聯(lián)。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)干細胞 G-CSF HDAC2 缺氧 HIF-1α
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R743.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 主要英文縮略語索引8-10
• 第1章 緒論10-14
• 第2章 材料14-18
• 2.1 實驗場地及細胞14
• 2.2 主要儀器及試劑14-18
• 第3章 實驗方法18-24
• 3.1 神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)、傳代及鑒定18
• 3.2 實驗分組18-19
• 3.3 MTT比色法檢測神經(jīng)干細胞的存活率19
• 3.4 顯微鏡觀察細胞凋亡情況19
• 3.5 Western Blot法檢測HDAC2、HIF19-22
• 3.6 圖像分析22
• 3.7 統(tǒng)計學處理22-24
• 第4章 實驗結(jié)果24-28
• 第5章 討論28-34
• 第6章 結(jié)論34-36
• 參考文獻36-40
• 綜述40-46
• 參考文獻43-46
• 作者攻讀學位期間的科研成果46-48
• 致謝48

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本文編號：518556