研究背景： 惡性實體腫瘤在生長過程中由于腫瘤細胞的快速生長,使得血管的生長呈現(xiàn)相對滯后性,因此腫瘤細胞本身多處于不同程度的缺氧狀態(tài)。神經(jīng)母細胞瘤早期出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移,其轉(zhuǎn)移機制仍不明確。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)是癌細胞在缺氧微環(huán)境下發(fā)生轉(zhuǎn)移的主要途徑,但目前關(guān)于這一機制與神經(jīng)母細胞瘤的關(guān)系這方面研究較少。 目的： 探索上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化機制是否與缺氧環(huán)境下神經(jīng)母細胞瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移有關(guān),并明確其相關(guān)分子變化。 方法： 1)隨機選取非轉(zhuǎn)移性神經(jīng)母細胞瘤(Ⅰ期)、未化療的轉(zhuǎn)移性神經(jīng)母細胞瘤(Ⅲ-Ⅳ期)、神經(jīng)節(jié)細胞瘤各5例,將這三種實體腫瘤標本的石蠟切片用免疫組化的方法檢測E-cadherin與N-cadherin的表達變化。 2)將人神經(jīng)母細胞瘤細胞株SK-N-SH置入缺氧培養(yǎng)箱(1%O2,94%N2,5%CO2),建立腫瘤缺氧微環(huán)境并觀察細胞形態(tài)、通過檢測Caspase3/7及CCK-8檢測凋亡與增殖等基本細胞生物學(xué)變化。 3)Transwell試驗比較常氧與缺氧環(huán)境下腫瘤細胞的侵襲性變化 4)Real time-PCR及Western blot分別檢測常氧及缺氧環(huán)境下E...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2b不同腫瘤中N-cadherin的表達(x400)，依次為GN、NBstageI、metastaticNB

圖2b不同腫瘤中N-cadherin的表達(x400)，依次為GN、NBstageI、metastaticNB免疫組化結(jié)果顯示，E-cadherin及N-cadherin在神經(jīng)母細胞瘤中均有不同程度的表達。在轉(zhuǎn)移性神經(jīng)母細胞瘤的切片中顯示距離血管周圍較近的腫瘤細胞....

圖4cadherin結(jié)構(gòu)示意圖

圖4cadherin結(jié)構(gòu)示意圖癌癥屬于上皮來源腫瘤，主要以E-cadherin的表達為主。當E-cadherin表達下調(diào)時，與細胞骨架粘連的穩(wěn)定性降低，使薪附分子的功能失活，失去接觸抑制功能，促進腫瘤細胞早期發(fā)生轉(zhuǎn)移。有文獻報道認為E-cadherinF降的同時可以出現(xiàn)異位N....

圖5HIF-1a、HIF-2a的表達差異

人學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果1. realtimePCR檢測HIF-1a、HIF-2a的mRNA隨缺氧時間的延長，HIF-1a和HIF-2a的mRNA表達均逐漸增加，缺氧24h(P=0.049,0.024)及缺氧48h(P=0.019,0.04)均有統(tǒng)計學(xué)差異，....

圖6a常氧24h、48h、72h細胞形態(tài)（xlOO)

HIF-1a HIF-2a60r — 4「 “I I 1T 35? ，—丨：——_{：：：—■{■；nnI1:丨 :一：WLnormal hypo24h hypo48h normal hypo24hhypo48h圖5HIF-1a、HI....

本文編號：4035094