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炎癥調(diào)控PD-L1在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2025-01-17 11:49
  目的:膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma,GBM)是惡性程度最高的原發(fā)性腦膠質(zhì)瘤。手術(shù)切除及放化療等常規(guī)治療手段療效有限,患者死亡率高,預(yù)后極差。隨著分子生物學(xué)研究的日益深入,分子靶向治療開(kāi)啟了腫瘤治療的新時(shí)代。程序性死亡配體1(Programmed death ligand 1,PD-L1)作為B7家族分子成員,在腫瘤免疫逃逸過(guò)程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),GBM腫瘤組織和細(xì)胞可以特異性表達(dá)PD-L1,但炎癥調(diào)控PD-L1在GBM中的研究較少。因此,本文以GBM細(xì)胞株及GBM患者原代腫瘤細(xì)胞為研究對(duì)象,分析炎性介質(zhì)干擾素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)對(duì)GBM細(xì)胞PD-L1表達(dá)水平的影響,探索IFN-γ調(diào)控GBM細(xì)胞PD-L1表達(dá)的具體機(jī)制及PD-L1在GBM發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用。旨在為靶向PD-L1的GBM治療策略提供基礎(chǔ)依據(jù)。方法:(1)應(yīng)用蛋白印跡(Western blot)及流式細(xì)胞學(xué)方法,檢測(cè)GBM細(xì)胞株及GBM原代腫瘤細(xì)胞PD-L1的表達(dá)水平。(2)給予IFN-γ(50 ng/m L)刺激GBM細(xì)胞,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈鎖反應(yīng)(Quantitative R...

【文章頁(yè)數(shù)】:47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1Westernblot檢測(cè)GBM細(xì)胞PD-L1總蛋白表達(dá)水平

圖1Westernblot檢測(cè)GBM細(xì)胞PD-L1總蛋白表達(dá)水平

結(jié)果11結(jié)果1IFN-γ上調(diào)GBM細(xì)胞PD-L1的表達(dá)應(yīng)用Westernblot、流式細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)U251、TG905、A172、PT-1、PT-2細(xì)胞PD-L1的總蛋白表達(dá)水平,結(jié)果顯示U251、TG905、A172、PT-1、PT-2均高表達(dá)PD-L1(圖1,2)。給予IF....


圖2Westernblot檢測(cè)給予IFN-γ(50ng/mL)刺激后的GBM細(xì)胞PD-L1總蛋白表達(dá)水平

圖2Westernblot檢測(cè)給予IFN-γ(50ng/mL)刺激后的GBM細(xì)胞PD-L1總蛋白表達(dá)水平

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圖3流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)給予IFN-γ(50ng/mL)刺激后GBM細(xì)胞PD-L1膜蛋白表達(dá)水平

圖3流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)給予IFN-γ(50ng/mL)刺激后GBM細(xì)胞PD-L1膜蛋白表達(dá)水平

結(jié)果11結(jié)果1IFN-γ上調(diào)GBM細(xì)胞PD-L1的表達(dá)應(yīng)用Westernblot、流式細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)U251、TG905、A172、PT-1、PT-2細(xì)胞PD-L1的總蛋白表達(dá)水平,結(jié)果顯示U251、TG905、A172、PT-1、PT-2均高表達(dá)PD-L1(圖1,2)。給予IF....


圖5qRT-PCR方法驗(yàn)證PD-L1的敲低效率及給予IFN-γ(50ng/mL)刺激24h后GBM細(xì)胞PD-L1mRNA表達(dá)水平(***p<0.001,**p<0.01)

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青島大學(xué)碩士學(xué)位論文12結(jié)果顯示U251、TG905、PT-2中ERK的磷酸化水平顯著增高;同時(shí)我們使用ERK信號(hào)通路抑制劑U0126(10μM)后,給予IFN-γ(50ng/mL)刺激,結(jié)果顯示,ERK的磷酸化被抑制,同時(shí)U251、TG905、PT-2細(xì)胞PD-L1的表達(dá)水平降....



本文編號(hào):4028022

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