目的探討睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)聯(lián)合視黃酸(RA)誘導(dǎo)成肌細(xì)胞類(lèi)神經(jīng)分化的可能性以及此誘導(dǎo)過(guò)程與神經(jīng)元限制性沉默因子(REST)相關(guān)性。方法以CNTF誘導(dǎo)C2C12去分化,再以RA誘導(dǎo)C2C12類(lèi)神經(jīng)分化。實(shí)驗(yàn)分組及處理方式:誘導(dǎo)組(含CNTF培養(yǎng)基誘導(dǎo)去分化3天+含RA培養(yǎng)基誘導(dǎo)類(lèi)神經(jīng)分化2天+神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基3天);對(duì)照組(不含CNTF培養(yǎng)基誘導(dǎo)3天+不含RA培養(yǎng)基誘導(dǎo)2天+神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基3天)。通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞免疫熒光、流式細(xì)胞分析、Western blot等技術(shù)對(duì)去分化及類(lèi)神經(jīng)分化的細(xì)胞進(jìn)行鑒定及相關(guān)分析,比較細(xì)胞類(lèi)神經(jīng)分化前后REST表達(dá)變化。結(jié)果聯(lián)合誘導(dǎo)后細(xì)胞聚集呈“團(tuán)簇樣”生長(zhǎng),部分團(tuán)塊可懸浮生長(zhǎng),為典型的“神經(jīng)球”樣表現(xiàn)。細(xì)胞免疫熒光染色顯示“神經(jīng)球”能夠被神經(jīng)特異性標(biāo)記物NSE、SOX1、GFAP標(biāo)記,“神經(jīng)球”離散為單個(gè)細(xì)胞接種后生長(zhǎng)狀態(tài)良好,呈神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記物(nestin)陽(yáng)性表達(dá)。Western blot顯示CNTF去分化誘導(dǎo)后成肌細(xì)胞分化相關(guān)蛋白Myogenin、P21表達(dá)明顯降低;類(lèi)神經(jīng)分化后NSE、SOX1、GFAP表達(dá)明顯增多,且成肌細(xì)胞特異性標(biāo)記...

【文章頁(yè)數(shù)】：37 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文論著摘要
英文論著摘要
英文縮略語(yǔ)表
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
附錄
    綜述
        參考文獻(xiàn)
    在學(xué)期間科研成績(jī)
    致謝
    個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：4009575