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重組慢病毒lenti-stat1/stat3-siRNA對人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2024-07-08 21:32
  目的探討重組慢病毒lenti-stat1,lenti-stat3-siRNA和lenti-stat1/stat3-siRNA對人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞凋亡的影響及分子機(jī)制。方法構(gòu)建重組慢病毒lenti-stat1,lenti-stat3-siRNA和lenti-stat1/stat3-siRNA載體并鑒定,將上述構(gòu)建載體感染人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251后,Real Time PCR方法與Western blot方法檢測U251細(xì)胞STAT1和STAT3在mRNA與蛋白水平的表達(dá),CCK-8方法檢測U251細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測U251細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期情況,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)分析U251細(xì)胞遷移能力的影響,轉(zhuǎn)錄組測序分析其可能的分子機(jī)制。結(jié)果感染lenti-stat1和lenti-stat1/stat3-siRNA后,U251細(xì)胞STAT1的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯升高,感染lenti-stat3-siRNA和lenti-stat1/stat3-siRNA后,U251細(xì)胞STAT3的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯降低,結(jié)果表明成功建立Stat1、Stat3-siRNA及其共表達(dá)Stat3-siR...

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 主要儀器
    1.3 細(xì)胞及重組慢病毒
    1.4 試驗(yàn)方法
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 重組慢病毒測序鑒定
    2.2 各重組慢病毒感染U251細(xì)胞后形態(tài)學(xué)改變
    2.3 檢測各重組慢病毒感染效率
    2.4 重組慢病毒lenti-stat1/stat3-siRNA感染U251細(xì)胞的驗(yàn)證
    2.5 各重組慢病毒對U251細(xì)胞增殖的影響
    2.6 各重組慢病毒對U251細(xì)胞凋亡的影響
    2.7 各重組慢病毒對U251細(xì)胞周期的影響
    2.8 各重組慢病毒對U251細(xì)胞遷移的影響
    2.9 轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果分析
3 討論
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
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個人簡歷
致謝



本文編號:4003910

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