神經(jīng)膠質(zhì)瘤是一種起源于膠質(zhì)細(xì)胞的原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見而又最難診治的惡性腫瘤,致死率高,患者平均存活時間不到一年。近年來惡性膠質(zhì)瘤的發(fā)病率也不斷上升,是當(dāng)前34歲以下腫瘤患者的第二位死亡原因。膠質(zhì)瘤難于診治的原因主要是因為其具有高度的浸潤和轉(zhuǎn)移性,增殖速度快,早期邊界不明顯,缺乏有效的診斷、治療方法。研究發(fā)現(xiàn),膠質(zhì)瘤細(xì)胞與其它腫瘤不同之處在于它表達(dá)一種特殊的氯離子通道電流,其惡性程度與氯離子通道電流呈正相關(guān)。天然有毒動物毒液中富含有數(shù)量眾多的離子通道電流抑制多肽。據(jù)此在蝎毒液中發(fā)現(xiàn)了對膠質(zhì)瘤具有重要治療和診斷價值的一類毒素多肽：蝎氯毒素。與此同時,基于納米熒光材料的熒光探針檢測技術(shù)越來越受到人們的重視,成為物理學(xué)、化學(xué)、生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)的重要交叉研究領(lǐng)域。利用蝎氯毒素的膠質(zhì)瘤細(xì)胞靶向性和納米材料的熒光特性,開展蝎氯毒素-納米熒光復(fù)合物靶向抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤及其診斷研究有重要的意義。 本文首先根據(jù)蝎氯毒素CTX多肽的一級結(jié)構(gòu)序列,采用overlapping PCR方法,獲得了N端連著小腸激酶酶切位點編碼序列的CTX基因片段,選用原核表達(dá)載體pGEX-6p-1,構(gòu)建了重組表達(dá)載體pG...

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1 蝎毒素
        1.1 蝎的種類
        1.2 蝎毒素的組成和分類
        1.3 蝎毒素的功能
    2 蝎氯毒素的發(fā)現(xiàn)、結(jié)構(gòu)與功能
        2.1 蝎氯毒素的發(fā)現(xiàn)與來源
        2.2 蝎氯毒素的分子生物學(xué)特征
        2.3 蝎氯毒素結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系
    3 神經(jīng)膠質(zhì)瘤
        3.1 神經(jīng)膠質(zhì)瘤的起源
        3.2 神經(jīng)膠質(zhì)瘤的危害
        3.3 神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特點
        3.4 神經(jīng)膠質(zhì)瘤與蝎氯毒素
    4 多肽在分子成像和醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用
        4.1 基于多肽的成像探針的設(shè)計
        4.2 多肽探針的成像應(yīng)用模式
    5 本論文的目的與意義
第二章 重組蝎氯毒素CTX的表達(dá)、純化與鑒定
    引言
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 CTX表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2 融合蛋白的表達(dá)、純化和酶切
        2.3 CTX多肽的RP-HPLC分離純化與鑒定
    3 討論
第三章 蝎氯毒素-稀土納米探針體內(nèi)外對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的靶向性研究
    引言
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 蝎氯毒素-稀土納米探針CTX：UCNPs的制備
        2.2 蝎氯毒素-稀土納米探針CTX：UCNPs的物理性質(zhì)
        2.3 蝎氯毒素-稀土納米探針CTX：UCNPs的體外對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的靶向性
        2.4 蝎氯毒素-稀土納米探針CTX：UCNPs的體內(nèi)對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的靶向性
        2.5 蝎氯毒素-稀土納米探針CTX：UCNPs體內(nèi)外的初步毒性
    3 討論
第四章 重組蝎氯毒素蛋白靶向抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤的研究
    引言
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 重組蝎氯毒素gCTX蛋白的制備與鑒定
        2.2 重組蝎氯毒素gCTX體內(nèi)對神經(jīng)膠質(zhì)瘤生長的抑制
        2.3 重組蝎氯毒素gCTX體內(nèi)對神經(jīng)膠質(zhì)瘤轉(zhuǎn)移的抑制
        2.4 重組蝎氯毒素gCTX對體內(nèi)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的靶向性
    3 討論
第五章 蝎氯毒素-金納米簇復(fù)合物抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長與轉(zhuǎn)移研究
    引言
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 蝎氯毒素-金納米簇復(fù)合物的制備
        2.2 蝎氯毒素-金納米簇復(fù)合物的特征與鑒定
        2.3 蝎氯毒素-金納米簇復(fù)合物對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的靶向性
        2.4 蝎氯毒素-金納米簇復(fù)合物體外抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生長
        2.5 蝎氯毒素-金納米簇復(fù)合物體外抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的轉(zhuǎn)移
    3 討論
研究總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
研究生期間已發(fā)表和待發(fā)表的論文及申請的專利
致謝



本文編號：3969915