發(fā)布時間：2024-03-11 21:50

　　目的： 本研究通過建立海人酸難治性癲癇大鼠模型,采用寧癇顆粒、卡馬西平單獨或聯(lián)合治療,觀察海人酸難治性癲癇大鼠行為學和腦電圖變化,從炎癥因子、凋亡及耐藥基因探討寧癇顆�？拱d癇作用機制,為中西醫(yī)結合治療難治性癲癇提供了新的治療方法。 方法： 第一部分：采用海人酸海馬CA3區(qū)微量注射的化學點燃方法制作模型,通過苯妥英鈉及腦電圖篩選成功制作慢性難治性癲癇模型36只,隨機分為模型組、卡馬西平組、寧癇顆粒組、寧癇顆粒低、中、高劑量聯(lián)合卡馬西平組,再加假手術組,共7組,每組6只。 第二部分：觀察各組大鼠治療前后體重、癲癇發(fā)作的次數(shù)、發(fā)作平均持續(xù)時間、被抓時平均防衛(wèi)級別、發(fā)作級別、SRS發(fā)作總時間,并對各組大鼠治療前后進行腦電圖監(jiān)測。 第三部分：難治性癲癇大鼠模型每組6只,分組治療后與假手術組6只,予心尖灌注生理鹽水后取腦,在4%多聚甲醛中固定,常規(guī)制備石蠟切片(含皮層和海馬)。HE染色觀察海馬各區(qū)及顳葉皮層神經(jīng)元形態(tài)結構的改變,免疫組化觀察海馬及顥葉皮層c-fos、caspase-3的表達。 第四部分：按上述治療分組后股動脈采血,收集各實驗組大鼠血清采用免疫酶聯(lián)法(Elisa法)測定各實驗組大鼠血...

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
目錄
英文縮略詞
前言
第一部分 海人酸難治性癲癇大鼠動物模型的建立
    1 材料與方法
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥品及試劑
        1.3 實驗儀器設備
        1.4 主要溶液配制
    2 研究方法
        2.1 難治性癲癇動物模型制作方法
        2.2 實驗動物癲癇發(fā)作分級
        2.3 藥物篩選實驗動物
        2.4 難治性癲癇模型造模成功標準
    3 結果
        3.1 難治性癲癇模型的制備存活情況
        3.2 行為學觀察
        3.3 急性期表現(xiàn)
        3.4 靜止期表現(xiàn)
        3.5 慢性自發(fā)發(fā)作期表現(xiàn)
    4 討論
        4.1 難治性癲癇動物模型的選擇
        4.2 海人酸難治性癲癇動物模型評價
        4.3 海人酸難治性癲癇模型存在的問題
第二部分 寧癇顆粒聯(lián)合CBZ對難治性癲癇大鼠行為學及腦電圖觀察
    1 材料和方法
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥品
        1.3 主要儀器設備
        1.4 主要溶液配制
    2 實驗方法
        2.1 實驗動物分組以及給藥方法
        2.2 癇性發(fā)作行為學記錄
        2.3 體重檢測
        2.4 觀察大鼠被抓時防衛(wèi)反應分級
        2.5 Racine標準分級
        2.6 腦電圖觀察
        2.7 難治性癲癇大鼠模型的療效評價
        2.8 腦電圖評價
    3 統(tǒng)計學方法
    4 結果
        4.1 慢性期及給藥致癇大鼠發(fā)作以及存活情況
        4.2 大鼠癇性發(fā)作行為學觀察結果
        4.3 各組大鼠腦電圖結果
    5 討論
        5.1 寧癇顆�！皬母握撝巍辈C分析
        5.2 寧癇顆粒組方成分分析
        5.3 實驗對照藥物的選擇
        5.4 各組藥物對癲癇大鼠體重及行為學的影響
        5.5 腦電圖變化
    小結
第三部分 寧癇顆粒聯(lián)合CBZ對難治性癲癇大鼠caspase-3、c-fos表達的影響
    1 材料與方法
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥品及試劑
        1.3 主要儀器設備
        1.4 實驗方法
        1.5 統(tǒng)計學方法
    2 結果
        2.1 HE染色結果
        2.2 免疫組化染色結果
    3 討論
        3.1 神經(jīng)元細胞凋亡、死亡與癲癇關系
        3.2 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對kA癲癇大鼠c-fos的影響
        3.3 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對kA癲癇大鼠caspase-3的影響
    小結
第四部分 寧癇顆粒聯(lián)合CBZ對難治性癲癇大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影響
    1 材料與方法
        1.1 實驗藥品與試劑
        1.2 主要儀器設備
    2 實驗方法
        2.1 觀察指標：血清IL-1 β、IL-6、TNF-α檢測
        2.2 ELISA檢測
    3 統(tǒng)計學方法
    4 結果
        4.1 對大鼠血清IL-1β水平的影響
        4.2 對大鼠血清IL-6水平的影響
        4.3 對大鼠血清TNF-α水平的影響
    5 討論
        5.1 癲瘸與炎癥因子
        5.2 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對難治性癲癇大鼠IL-1β的影響
        5.3 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對難治性癲癇大鼠IL-6的影響
        5.4 寧瘸顆粒聯(lián)合卡馬西平對難治性癲癇大鼠TNF-α的影響
    小結
第五部分 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對難治性癲癇大鼠腦組織MDR1mRNA/P-gp表達影響
    1 材料與方法
        1.1 實驗藥品及試劑
        1.2 主要溶液的配制
        1.3 主要儀器設備
    2 實驗方法
        2.1 熒光定量PCR法檢測MDR1mRNA表達
        2.2 實時熒光定量聚合酶鏈式反應(real-time PCR)
    3 統(tǒng)計學方法
    4 結果
        4.1 腦組織P-gp Western Blot檢測
        4.2 對腦組織P-gp蛋白表達的影響
    5 討論
        5.1 MDR1/P-gp表達與難治性癲癇
        5.2 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對難治性癲癇大鼠MDR1mRNA/P-gp表達的影響
        5.3 寧癇顆粒聯(lián)合卡馬西平對難治性癲癇作用的可能機制
    小結
全文討論
全文總結
創(chuàng)新點及應用價值
問題與展望
參考文獻
致謝
綜述
    文獻綜述一
    文獻綜述二
    參考文獻
附圖
附件一



本文編號：3926095