目的：骨髓基質(zhì)細胞(Bone marrow stromal Cells, BMSCs)是一種具有一定的自我更新和高度增殖以及多向分化潛能的成體干細胞，可以在條件適宜的情況下,向神經(jīng)樣細胞分化。其具有取材較容易,來源較為方便,在體外條件下進行培養(yǎng)和擴增的技術(shù)條件也比較簡便等特點。本課題在建立大鼠BMSCs體外分離、培養(yǎng)、純化及擴增體系的基礎(chǔ)上，研究BMSCs在體外培養(yǎng)中的生物學(xué)特性，以及向神經(jīng)細胞分化的能力，為進一步臨床治療提供理論依據(jù)及治療基礎(chǔ)。方法：本實驗采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法，利用BMSCs貼壁速率快的特點，接種早期更換培養(yǎng)基去掉非貼壁細胞，反復(fù)換液純化。經(jīng)原代及傳代培養(yǎng)擴增BMSCs后，研究其在體外培養(yǎng)中的生長曲線等生物學(xué)特性及其超微結(jié)構(gòu)，進行瑞士染色觀察細胞形態(tài)，免疫細胞化學(xué)檢測CD44從而對其鑒定。在此基礎(chǔ)上，通過表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)和堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細胞分化，觀察細胞形態(tài)變化，以免疫細胞化學(xué)檢測β-微管蛋白III(β-Tubu...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖9傳代當天的細胞(x400)

第一部分大鼠骨髓基質(zhì)細胞體外誘導(dǎo)分化為神經(jīng)干細胞實驗研究翻繚屑瞥扮曝露.、萬寥味纓、寥黔翼于一器伙一刃橇璐喚淤夔一娜耐斷圖7表達NsE抗原陽性的細胞(X400)F19.7CellsexPressingNSEPositive(X400)圖8表達GFAP抗原陽性的細胞(X400)Fi....

圖10傳代第6天的細胞(x400)

第一部分大鼠骨髓基質(zhì)細胞體外誘導(dǎo)分化為神經(jīng)干細胞實驗研究翻繚屑瞥扮曝露.、萬寥味纓、寥黔翼于一器伙一刃橇璐喚淤夔一娜耐斷圖7表達NsE抗原陽性的細胞(X400)F19.7CellsexPressingNSEPositive(X400)圖8表達GFAP抗原陽性的細胞(X400)Fi....

圖3大鼠BMSC誘導(dǎo)前形態(tài)附

刺五加體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞定向分化為神經(jīng)細胞的實驗研究附錄三附圖附圖1大鼠BMSC原代第4天附圖2大鼠BMSC第3代90％融合（10×10）（10×10）

圖4刺五加誘導(dǎo)后BMSC形態(tài)

刺五加體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞定向分化為神經(jīng)細胞的實驗研究附錄三附圖附圖1大鼠BMSC原代第4天附圖2大鼠BMSC第3代90％融合（10×10）（10×10）

本文編號：3921425