目的:探討氧糖剝奪(oxygen glucose deprivation,OGD)損傷誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的可能機(jī)制。方法:培養(yǎng)并鑒定原代星形膠質(zhì)細(xì)胞,體外建立OGD損傷模型,分別利用si TLR2(Toll-like receptor-2,TLR2)腺病毒、NF-κB(NF-kappa B)抑制劑PDTC干預(yù),q RT-PCR和ELISA分別檢測損傷細(xì)胞IL-10的表達(dá)水平,Western blot檢測損傷細(xì)胞TLR2、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表達(dá)水平。免疫熒光檢測OGD損傷細(xì)胞中NF-κB p65的亞細(xì)胞定位。結(jié)果:免疫熒光觀察發(fā)現(xiàn)分離培養(yǎng)的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞純度可達(dá)90%以上。經(jīng)體外OGD損傷處理后,OGD損傷組TLR2、pNF-κB p65的蛋白表達(dá)水平[(1.16±0.10),(1.01±0.08)]與IL-10的m RNA及蛋白表達(dá)水平[(0.00±0.00),(513.01±34.47)]較正常對(duì)照組[(0.49±0.08),(0.23±0.09),(0.00±0.00),(381.8...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 儀器
    1.3 方法
        1.3.1 原代星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.3.2 免疫熒光檢測
        1.3.3 OGD損傷模型構(gòu)建及干預(yù)
        1.3.4 ELISA檢測細(xì)胞因子IL-10的分泌
        1.3.5 q RT-PCR檢測相關(guān)m RNA表達(dá)水平變化
        1.3.6 Western blot檢測相關(guān)蛋白的表達(dá)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 大鼠原代星形膠質(zhì)細(xì)胞鑒定與體外OGD損傷模型的建立
    2.2 OGD損傷后星型膠質(zhì)細(xì)胞中TLR2、p-NF-κB p65及IL-10的表達(dá)變化
    2.3 si TLR2感染后細(xì)胞中TLR2、p-NF-κB p65及IL-10的表達(dá)變化
    2.4 PDTC處理后細(xì)胞中TLR2、p-NF-κB p65及IL-10的表達(dá)變化
3 討論



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