膠質(zhì)瘤是神經(jīng)外科中最富有挑戰(zhàn)性的腫瘤之一，其發(fā)病率約占顱內(nèi)腫瘤總數(shù)40%左右。目前治療方法主要采用綜合療法，但由于腫瘤呈浸潤生長，手術(shù)很難判定腫瘤邊界，放療對(duì)正常組織損傷較大，一些經(jīng)典膠質(zhì)瘤化療藥物由于血腦屏障存在及膠質(zhì)瘤對(duì)這些藥物存在耐藥性，治療效果也不十分明顯。因此，尋求有效的化療藥物提高膠質(zhì)瘤患者的生存率就成為目前一個(gè)重要的研究目標(biāo)，對(duì)以組蛋白乙�；笧榘悬c(diǎn)的化療藥物的研究就是一個(gè)重要方向。 正常細(xì)胞的分化以及代謝行為的調(diào)節(jié)依賴組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶和組蛋白去乙�；钢g的平衡。一旦這種平衡關(guān)系被打破，細(xì)胞或組織就容易發(fā)生癌變，神經(jīng)膠質(zhì)瘤也不例外，組蛋白去乙�；敢种苿┩ㄟ^阻礙細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞分化和凋亡以及抑制腫瘤血管生成從而抑制腫瘤的生長和增殖，目前在膠質(zhì)瘤中的機(jī)制還不清楚。 本課題通過體外試驗(yàn)探討組蛋白去乙�；敢种苿⿲�(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響，同時(shí)檢測增殖和凋亡相關(guān)基因表達(dá)的變化，初步探討其在治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用及其機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^體外培養(yǎng)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞，觀察組蛋白去乙酰化酶抑制劑帕比司他(LBH589)對(duì)細(xì)胞生長和增殖的影響及其作用機(jī)制，為臨床治療神經(jīng)膠...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮寫表
第1章 緒論
第2章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 組蛋白的乙酰化和去乙�；c基因表達(dá)調(diào)控的概述
        2.1.1 核小體結(jié)構(gòu)及作用
        2.1.2 組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶
        2.1.3 組蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶對(duì)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)及基因轉(zhuǎn)錄的作用
        2.1.4 組蛋白去乙�；�
        2.1.5 HDACs 對(duì)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響
    2.2 HDACs 在腫瘤中的發(fā)病機(jī)制
        2.2.1 HDACs 誘導(dǎo)染色質(zhì)重塑，抑制基因轉(zhuǎn)錄
        2.2.2 HDACs 作用于細(xì)胞周期的相關(guān)因子，影響細(xì)胞增殖與分化
        2.2.3 HDACs 用于細(xì)胞凋亡的相關(guān)蛋白，從而影響細(xì)胞凋亡過程
        2.2.4 HDACs 可聯(lián)合血管生成因子，影響腫瘤組織血管移行與形成
    2.3 組蛋白去乙�；敢种苿�
        2.3.1 脂肪酸類
        2.3.2 苯胺類
        2.3.3 異羥肟酸類
        2.3.4 環(huán)肽類
    2.4 HDACI 的抗腫瘤作用機(jī)制
        2.4.1 HDACI 和細(xì)胞周期
        2.4.2 細(xì)胞凋亡的死亡受體途徑
        2.4.3 細(xì)胞凋亡的線粒體途徑
        2.4.4 活性氧的產(chǎn)生
        2.4.5 抑制血管生成
        2.4.6 自我吞噬
    2.5 前景與展望
第3章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    3.1 細(xì)胞株
    3.2 試劑與儀器
        3.2.1 試劑
    3.3 儀器
    3.4 主要試劑的配制
        3.4.1 PBS 緩沖液
        3.4.2 MTT 的配制
        3.4.3 IMDM 培養(yǎng)基
        3.4.4 胰蛋白酶液的配制
    3.5 試驗(yàn)方法
        3.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.5.2 實(shí)驗(yàn)分組
        3.5.3 MTT 法檢測細(xì)胞存活率
        3.5.4 RT-PCR 法檢測 bcl-2、Bax 和 caspase-3 mRNA
        3.5.5 Hoechst 33342 檢測細(xì)胞凋亡
        3.5.6 Western blot 檢測 U251 細(xì)胞 Bax、bcl-2 和 caspase-3 蛋白表達(dá)水平
    3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 MTT 檢測 U251 細(xì)胞增殖率
    4.2 RT-PCR 電泳檢測 Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA 水平
    4.3 Hoechst 33342 檢測細(xì)胞凋亡
    4.4 Western blotting 檢測 Bax/Bcl-2 蛋白表達(dá)水平
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介及在學(xué)期間所得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3881422