羥化酪醇對SH-SY5Y神經(jīng)母細胞瘤細胞的保護作用研究
發(fā)布時間:2023-11-25 18:54
帕金森病(Parkinson’s Disease, PD)是與年齡有關(guān)的神經(jīng)退行性疾病,它的特征是中腦黑質(zhì)區(qū)多巴胺能神經(jīng)元選擇性死亡,患者的主要表現(xiàn)為動作緩慢,手腳或身體其他部分震顫,身體變得僵硬。帕金森病的發(fā)病是一個復(fù)雜的生物學(xué)過程。迄今,對患者多巴胺能神經(jīng)元特異性死亡的問題仍未解決,一般認為多巴胺能神經(jīng)元死亡的機理涉及四大方面的因素:線粒體功能障礙、炎癥反應(yīng)、蛋白質(zhì)代謝異常和氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激是導(dǎo)致PD的主要原因之一。而氧化應(yīng)激的來源很可能與神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺氧化后產(chǎn)生的多巴胺醌和活性氧有關(guān)。研究表明作為Ⅱ相酶之一的依賴還原型輔酶Ⅰ/Ⅱ的醌氧化還原酶1(NAD(P)H:Quinone Reductase, NQO1)能阻斷多巴胺形成多巴胺醌,同時減低多巴胺氧化過程中形成的過氧化物,降低氧化應(yīng)激反應(yīng),保護神經(jīng)細胞。NQO1基因表達調(diào)控的主要元件是抗氧化應(yīng)答元件(Antioxidant Response Element, ARE)。本實驗建立了一株由ARE調(diào)控,可以表達熒光素酶的SH-SY5Y穩(wěn)定細胞系,該細胞系可以用于篩選Ⅱ相酶誘導(dǎo)劑。然后我們在該細胞系基礎(chǔ)上鑒定出羥化酪醇(Hydrox...
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 可誘導(dǎo)表達熒光素酶的單克隆SH-SY5Y-ARE穩(wěn)定細胞系的建立
前言
1 材料和方法
1.1 實驗材料
1.2 主要實驗儀器
1.3 實驗方法
2 結(jié)果
2.1 pGL3-neo-ARE質(zhì)粒的構(gòu)建
2.2 SH-SY5Y-ARE細胞系的建立
2.3 SH-SY5Y細胞受SF誘導(dǎo)表達的Western blot和酶比活測定
3 討論
第二章 羥化酪醇對SH-SY5Y神經(jīng)母細胞瘤細胞保護作用的研究
前言
1. 材料和方法
1.1 實驗材料和試劑配方
1.2 主要實驗儀器
1.3 實驗方法
2. 結(jié)果
2.1 羥化酪醇對SH-SY5Y細胞NQO1的誘導(dǎo)能力分析
2.2 羥化酪醇對SH-SY5Y細胞活性的影響
2.3 羥化酪醇誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞NQO1表達的時間持續(xù)性
2.4 多巴胺對SH-SY5Y細胞活性的影響
2.5 羥化酪醇對SH-SY5Y細胞的保護作用
2.6 羥化酪醇保護SH-SY5Y細胞的功能與NQO1表達的關(guān)系研究
2.7 羥化酪醇對其他Ⅱ相酶的誘導(dǎo)能力
3. 討論
綜述
附錄
參考文獻
致謝
本文編號:3867659
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 可誘導(dǎo)表達熒光素酶的單克隆SH-SY5Y-ARE穩(wěn)定細胞系的建立
前言
1 材料和方法
1.1 實驗材料
1.2 主要實驗儀器
1.3 實驗方法
2 結(jié)果
2.1 pGL3-neo-ARE質(zhì)粒的構(gòu)建
2.2 SH-SY5Y-ARE細胞系的建立
2.3 SH-SY5Y細胞受SF誘導(dǎo)表達的Western blot和酶比活測定
3 討論
第二章 羥化酪醇對SH-SY5Y神經(jīng)母細胞瘤細胞保護作用的研究
前言
1. 材料和方法
1.1 實驗材料和試劑配方
1.2 主要實驗儀器
1.3 實驗方法
2. 結(jié)果
2.1 羥化酪醇對SH-SY5Y細胞NQO1的誘導(dǎo)能力分析
2.2 羥化酪醇對SH-SY5Y細胞活性的影響
2.3 羥化酪醇誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞NQO1表達的時間持續(xù)性
2.4 多巴胺對SH-SY5Y細胞活性的影響
2.5 羥化酪醇對SH-SY5Y細胞的保護作用
2.6 羥化酪醇保護SH-SY5Y細胞的功能與NQO1表達的關(guān)系研究
2.7 羥化酪醇對其他Ⅱ相酶的誘導(dǎo)能力
3. 討論
綜述
附錄
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