帕金森病(Parkinson’s Disease, PD)是與年齡有關(guān)的神經(jīng)退行性疾病,它的特征是中腦黑質(zhì)區(qū)多巴胺能神經(jīng)元選擇性死亡,患者的主要表現(xiàn)為動(dòng)作緩慢,手腳或身體其他部分震顫,身體變得僵硬。帕金森病的發(fā)病是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程。迄今,對(duì)患者多巴胺能神經(jīng)元特異性死亡的問(wèn)題仍未解決,一般認(rèn)為多巴胺能神經(jīng)元死亡的機(jī)理涉及四大方面的因素：線粒體功能障礙、炎癥反應(yīng)、蛋白質(zhì)代謝異常和氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激是導(dǎo)致PD的主要原因之一。而氧化應(yīng)激的來(lái)源很可能與神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺氧化后產(chǎn)生的多巴胺醌和活性氧有關(guān)。研究表明作為Ⅱ相酶之一的依賴還原型輔酶Ⅰ/Ⅱ的醌氧化還原酶1(NAD(P)H:Quinone Reductase, NQO1)能阻斷多巴胺形成多巴胺醌,同時(shí)減低多巴胺氧化過(guò)程中形成的過(guò)氧化物,降低氧化應(yīng)激反應(yīng),保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞。NQO1基因表達(dá)調(diào)控的主要元件是抗氧化應(yīng)答元件(Antioxidant Response Element, ARE)。本實(shí)驗(yàn)建立了一株由ARE調(diào)控,可以表達(dá)熒光素酶的SH-SY5Y穩(wěn)定細(xì)胞系,該細(xì)胞系可以用于篩選Ⅱ相酶誘導(dǎo)劑。然后我們?cè)谠摷?xì)胞系基礎(chǔ)上鑒定出羥化酪醇(Hydrox...

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 可誘導(dǎo)表達(dá)熒光素酶的單克隆SH-SY5Y-ARE穩(wěn)定細(xì)胞系的建立
    前言
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 pGL3-neo-ARE質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2 SH-SY5Y-ARE細(xì)胞系的建立
        2.3 SH-SY5Y細(xì)胞受SF誘導(dǎo)表達(dá)的Western blot和酶比活測(cè)定
    3 討論
第二章 羥化酪醇對(duì)SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞保護(hù)作用的研究
    前言
    1. 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑配方
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2. 結(jié)果
        2.1 羥化酪醇對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞NQO1的誘導(dǎo)能力分析
        2.2 羥化酪醇對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞活性的影響
        2.3 羥化酪醇誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞NQO1表達(dá)的時(shí)間持續(xù)性
        2.4 多巴胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞活性的影響
        2.5 羥化酪醇對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的保護(hù)作用
        2.6 羥化酪醇保護(hù)SH-SY5Y細(xì)胞的功能與NQO1表達(dá)的關(guān)系研究
        2.7 羥化酪醇對(duì)其他Ⅱ相酶的誘導(dǎo)能力
    3. 討論
綜述
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3867659