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體外擴增的調(diào)節(jié)性T細胞靜脈輸注移植對腦梗死的保護作用

發(fā)布時間:2023-10-31 18:55
  目的 1.建立大鼠CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cells,Tregs)的分離和體外擴增方法,并對分離和擴增的CD4+CD25+Treg細胞進行初步鑒定。 2.應(yīng)用永久性大腦中動脈閉塞(MCAO)大鼠模型,研究體外擴增的CD4+CD25+Treg細胞預(yù)防性過繼轉(zhuǎn)輸對腦梗死大鼠的保護作用。 方法 1.采用健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠脾臟和淋巴結(jié)制備組織單細胞懸液,用磁性細胞分選(MACS)方法(也稱免疫磁珠法)即陰性選擇和陽性選擇分離純化CD4+CD25+Treg細胞,應(yīng)用抗CD3單克隆抗體和抗CD28單克隆抗體、IL-2及雷帕霉素等刺激物與CD4+CD25+Treg細胞共培養(yǎng)進行體外擴增,流式細胞儀分析細胞純度,臺盼藍染色檢測細胞存活率,體外增殖抑制試驗(MTT法)檢測CD4+CD25+Treg細胞對CD4+CD25-T細胞的免疫抑制作用。 2.將擴增的CD4+CD25+Treg細胞預(yù)防性靜脈輸注給健康成年雄性SD大鼠,靜脈輸注移植1天后制作永久性大腦中動脈閉塞(MCAO)模型。將動物隨機分為正常組、MCAO組、HBSS組(MCAO+...

【文章頁數(shù)】:78 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
第一部分
    中文摘要
    ABSTRACT
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    附圖
    參考文獻
第二部分
    中文摘要
    ABSTRACT
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    附圖
    參考文獻
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



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