發(fā)布時間：2023-06-05 19:10

　　目的:探討貝伐單抗對腦膠質(zhì)瘤細胞的抑制作用以及腦膠質(zhì)瘤細胞對貝伐單抗產(chǎn)生耐藥性的發(fā)生機制。方法:體外培養(yǎng)腦膠質(zhì)瘤細胞(U87-MG細胞系)。①使用不同濃度的貝伐單抗來處理U87-MG細胞,處理時間持續(xù)24小時或者48小時,隨后使用MTT試劑盒檢測不同濃度貝伐單處理條件下U87-MG細胞的存活率,用以檢驗貝伐單抗對腦膠質(zhì)瘤細胞的直接抑制效應(yīng);②使用不同濃度的貝伐單抗處理U87-MG細胞48小時,使用Annexin V-FITC/PI試劑盒及流式細胞儀檢測細胞凋亡情況,用以檢驗貝伐單抗對腦膠質(zhì)瘤細胞的促凋亡效果;③使用不同濃度的貝伐單抗處理腦膠質(zhì)瘤細胞48小時后,直接裂解細胞并進行Western Blot檢測自噬過程中標志性蛋白:LC3B-I、LC3B-II和SQSTMI(p62)表達水平變化,以及LC3B-II/LC3B-I比例變化,用以驗證貝伐單抗是否誘導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤細胞產(chǎn)生自噬;④U87-MG細胞在不同濃度貝伐單抗的存在的的情況下培養(yǎng)48小時,裂解細胞,處理樣品和總蛋白定量后,進行丙烯酰胺凝膠電泳和Western blot檢測。使用靶向Akt S473位點和T308位點磷酸化的抗體來檢測...

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 研究背景和內(nèi)容
    1.1 研究背景
    1.2 研究內(nèi)容
第二章 研究材料和方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
第三章 研究結(jié)果
    3.1 貝伐單抗能夠直接抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖
    3.2 貝伐單抗能夠直接促進腦膠質(zhì)瘤細胞的凋亡
    3.3 貝伐單抗能夠誘導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤細胞產(chǎn)生自噬
    3.4 貝伐單抗通過抑制AKT-MTOR信號通路誘導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤細胞產(chǎn)生自噬
    3.5 氯喹能夠顯著抑制貝伐單抗誘導(dǎo)的腦膠質(zhì)瘤細胞自噬
    3.6 抑制自噬過程能夠增強貝伐單抗對于腦膠質(zhì)瘤細胞的促凋亡功能
第四章 討論和展望
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3831878