研究背景:腦梗塞,是一種由于大腦血管堵塞而導(dǎo)致腦缺血性發(fā)作的疾病,已經(jīng)嚴(yán)重危害到人類的健康。血栓溶解療法和腦保護(hù)療法已經(jīng)應(yīng)用于臨床治療腦梗塞。但是隨著腦部科學(xué)的發(fā)展與探索和神經(jīng)再生技術(shù)領(lǐng)域的研究拓展,細(xì)胞療法和細(xì)胞替代療法已經(jīng)成為近年來(lái)的熱點(diǎn)。本研究旨在探討間充質(zhì)干細(xì)胞在腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)和caspase-3在神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)的影響。方法:建立大鼠腦梗死模型。治療組注射2106臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞;假手術(shù)組和對(duì)照組注入相同數(shù)量的培養(yǎng)基。在注射治療之前和注射后1天,3天,7天分別進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分。Caspase-3mRNA和蛋白的表達(dá)水平的檢測(cè)分別使用RT-PCR法和免疫組織化學(xué)法。細(xì)胞凋亡的分析評(píng)估用TUNEL工具包。結(jié)果:被標(biāo)記過(guò)得臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞注入大鼠后治療組大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)相比于對(duì)照組有明顯改善。RT-PCR和免疫組織化學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明caspase-3的表達(dá)水平與對(duì)照組相比較有顯著地減少,而假手術(shù)組和對(duì)照組沒有顯著差異。細(xì)胞凋亡結(jié)果表明治療組和對(duì)照組相比,TUNEL檢測(cè)的陽(yáng)性細(xì)胞會(huì)有減少。結(jié)論:臍帶血來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞能夠促進(jìn)腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)并且減少c...

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1. 第一章 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2. 實(shí)驗(yàn)器材
        1.2.1. 手術(shù)器械
        1.2.2. 輔助器材
    1.3. 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    1.4. 主要實(shí)驗(yàn)試劑及試劑配制
        1.4.1. 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4.2. 主要試劑配制
2. 第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1. 動(dòng)物模型的制作
        2.1.1. 大鼠準(zhǔn)備
        2.1.2. 線栓的制備
        2.1.3. 大鼠手術(shù)
        2.1.4. 術(shù)后評(píng)分
        2.1.5. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
    2.2. TTC染色
    2.3. 大鼠的治療
    2.4. Caspase-3PCR檢測(cè)
        2.4.1. RNA提取
        2.4.2. RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.4.3. RT—PCR
        2.4.4. 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)基因表達(dá)
    2.5. caspase-3 免疫組化檢測(cè)
        2.5.1. 大鼠灌注
        2.5.2. 腦組織切片
        2.5.3. 免疫組織化學(xué)染色
    2.6. Caspase-3WesternbIot的檢測(cè)
        2.6.1. 總蛋白提取
        2.6.2. WesternbIot技術(shù)步驟
            2.6.2.1. SDS-PAGE電泳
            2.6.2.2. 電轉(zhuǎn)膜(濕轉(zhuǎn))
            2.6.2.3. 免疫反應(yīng)
            2.6.2.4. 化學(xué)發(fā)光及曝光
            2.6.2.5. 凝膠圖象分析
    2.7. 神經(jīng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.7.1. 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.7.2. 實(shí)驗(yàn)器材
        2.7.3. 實(shí)驗(yàn)方法
    2.8. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3. 第三章 結(jié)果
    3.1. TTC染色結(jié)果
    3.2. DiL標(biāo)記的MSCs在腦組織中的分布
    3.3. 神經(jīng)功能評(píng)分
    3.4. MSCs對(duì)缺血再灌注大鼠腦組織caspase-3 表達(dá)的影響
    3.5. MSCs對(duì)缺血再灌注大鼠腦組織Caspase-3 蛋白表達(dá)的影響
    3.6. 結(jié)果匯總
4. 第四章 討論
    4.1. 實(shí)驗(yàn)注射方法的選取和檢測(cè)指標(biāo)的選取
    4.2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論與分析
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3816097