研究背景:腦梗塞,是一種由于大腦血管堵塞而導(dǎo)致腦缺血性發(fā)作的疾病,已經(jīng)嚴重危害到人類的健康。血栓溶解療法和腦保護療法已經(jīng)應(yīng)用于臨床治療腦梗塞。但是隨著腦部科學(xué)的發(fā)展與探索和神經(jīng)再生技術(shù)領(lǐng)域的研究拓展,細胞療法和細胞替代療法已經(jīng)成為近年來的熱點。本研究旨在探討間充質(zhì)干細胞在腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)和caspase-3在神經(jīng)細胞表達的影響。方法:建立大鼠腦梗死模型。治療組注射2106臍帶血間充質(zhì)干細胞;假手術(shù)組和對照組注入相同數(shù)量的培養(yǎng)基。在注射治療之前和注射后1天,3天,7天分別進行神經(jīng)功能評分。Caspase-3mRNA和蛋白的表達水平的檢測分別使用RT-PCR法和免疫組織化學(xué)法。細胞凋亡的分析評估用TUNEL工具包。結(jié)果:被標(biāo)記過得臍帶血間充質(zhì)干細胞注入大鼠后治療組大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)相比于對照組有明顯改善。RT-PCR和免疫組織化學(xué)的實驗結(jié)果表明caspase-3的表達水平與對照組相比較有顯著地減少,而假手術(shù)組和對照組沒有顯著差異。細胞凋亡結(jié)果表明治療組和對照組相比,TUNEL檢測的陽性細胞會有減少。結(jié)論:臍帶血來源的間充質(zhì)干細胞能夠促進腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)并且減少c...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1. 第一章 實驗材料
    1.1. 實驗動物
    1.2. 實驗器材
        1.2.1. 手術(shù)器械
        1.2.2. 輔助器材
    1.3. 實驗儀器和設(shè)備
    1.4. 主要實驗試劑及試劑配制
        1.4.1. 主要實驗試劑
        1.4.2. 主要試劑配制
2. 第二章 實驗方法
    2.1. 動物模型的制作
        2.1.1. 大鼠準(zhǔn)備
        2.1.2. 線栓的制備
        2.1.3. 大鼠手術(shù)
        2.1.4. 術(shù)后評分
        2.1.5. 實驗動物分組
    2.2. TTC染色
    2.3. 大鼠的治療
    2.4. Caspase-3PCR檢測
        2.4.1. RNA提取
        2.4.2. RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.4.3. RT—PCR
        2.4.4. 瓊脂糖凝膠電泳檢測基因表達
    2.5. caspase-3 免疫組化檢測
        2.5.1. 大鼠灌注
        2.5.2. 腦組織切片
        2.5.3. 免疫組織化學(xué)染色
    2.6. Caspase-3WesternbIot的檢測
        2.6.1. 總蛋白提取
        2.6.2. WesternbIot技術(shù)步驟
            2.6.2.1. SDS-PAGE電泳
            2.6.2.2. 電轉(zhuǎn)膜(濕轉(zhuǎn))
            2.6.2.3. 免疫反應(yīng)
            2.6.2.4. 化學(xué)發(fā)光及曝光
            2.6.2.5. 凝膠圖象分析
    2.7. 神經(jīng)細胞凋亡檢測
        2.7.1. 實驗試劑
        2.7.2. 實驗器材
        2.7.3. 實驗方法
    2.8. 統(tǒng)計學(xué)分析
3. 第三章 結(jié)果
    3.1. TTC染色結(jié)果
    3.2. DiL標(biāo)記的MSCs在腦組織中的分布
    3.3. 神經(jīng)功能評分
    3.4. MSCs對缺血再灌注大鼠腦組織caspase-3 表達的影響
    3.5. MSCs對缺血再灌注大鼠腦組織Caspase-3 蛋白表達的影響
    3.6. 結(jié)果匯總
4. 第四章 討論
    4.1. 實驗注射方法的選取和檢測指標(biāo)的選取
    4.2. 實驗結(jié)果討論與分析
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號：3816097