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鞘內(nèi)注射AM22-52對大鼠神經(jīng)損傷誘發(fā)脊髓和背根神經(jīng)節(jié)改變的影響

發(fā)布時間:2023-04-19 20:23
  研究背景及目的:腎上腺髓質(zhì)素(Adrenomedullin,AM)最早是從人嗜鉻細(xì)胞瘤的細(xì)胞中分離出來的并根據(jù)其能在血小板中生成cAMP的能力對其進(jìn)行標(biāo)識[1]。AM產(chǎn)生于血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞,目前多項研究表明AM及其受體在脊髓背角以及背根神經(jīng)節(jié)中亦有分布,這就提示我們注意AM與疼痛的關(guān)系。我們實驗室已往研究表明AM在可引發(fā)神經(jīng)病理性疼痛。基于本實驗室的研究成果以及其他學(xué)者研究,本實驗擬進(jìn)一步探究腎上腺髓質(zhì)素及其受體在慢性神經(jīng)病理性疼痛中的致痛機制。研究方法:(1)應(yīng)用行為學(xué)方法,在構(gòu)建大鼠脊神經(jīng)結(jié)扎(spinal nerve ligation,SNL)神經(jīng)病理性疼痛模型后,實驗組鞘內(nèi)連續(xù)注射7天AM受體拮抗劑AM22-52,與假手術(shù)組(Sham組)及SNL對照組對比,記錄對比大鼠機械撤足閾值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)的變化;(2)利用蛋白免疫印跡法(western blotting,WB)檢測和比較假手術(shù)組、SNL對照組與SNL實驗組手術(shù)同側(cè)脊髓腰膨大部位的脊髓背角中膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary ac...

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
中文文摘
緒論
    1. 神經(jīng)病理性疼痛
    2. AM及AM22-52
    3. 神經(jīng)元與膠質(zhì)細(xì)胞
        3.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞
        3.2 DRG神經(jīng)元與衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞
    4. IL-1β、nNOS與疼痛
        4.1 白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)
        4.2 神經(jīng)元型一氧化氮合醉(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)
    5. 外周和中樞敏化機制
    6. 本課題研究的背景及意義
第一章 鞘內(nèi)注射AM22-52對SNL誘導(dǎo)機械痛覺超敏的作用
    1. 前言
    2. 實驗材料
        2.1 實驗動物
        2.2 主要實驗儀器和器材
        2.3 實驗藥品與試劑
    3. 實驗分組與方法
        3.1 實驗分組
        3.2 實驗方法
    4. 實驗結(jié)果
    5. 討論
第二章 鞘內(nèi)注射AM22-52對SNL誘導(dǎo)脊髓背角GFAP表達(dá)的影響
    1. 前言
    2. 實驗材料
        2.1 實驗動物
        2.2 實驗儀器
        2.3 實驗藥品與試劑
    3. 實驗分組
    4. 實驗方法
        4.1 組織蛋白的提取
        4.2 BCA蛋白定量
        4.3 Western blot操作步驟
    5. Western Blot實驗結(jié)果
    6. 討論
第三章 鞘內(nèi)注射AM22-52對SNL大鼠脊髓背角IL-1β、 nNOS表達(dá)的影響
    1. 前言
    2. 實驗材料
        2.1 實驗動物
        2.2 實驗儀器
        2.3 實驗藥品與試劑
    3. 實驗分組
    4. 實驗方法
    5. Western Blot實驗結(jié)果
        5.1 鞘內(nèi)注射AM22-52對SNL誘導(dǎo)脊髓背角nNOS表達(dá)的影響
        5.2 鞘內(nèi)注射AM22-52對SNL誘導(dǎo)脊髓背角IL-1β蛋白表達(dá)的影響
    6. 討論
第四章 鞘內(nèi)注射AM22-52對SNL大鼠DRG中GFAP、IL-1β、nNOS的mRNA表達(dá)的影響
    1. 前言
    2. 實驗材料
        2.1 實驗儀器與器材
        2.2 實驗試劑
        2.3 材料獲取
    3. 實驗方法
        3.1 總RNA的提取
        3.2 RNA純度及濃度檢測
        3.3 逆轉(zhuǎn)錄
        3.4 qRT PCR
        3.5 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4. 實驗結(jié)果
    5. 討論
第五章 結(jié)論
附錄1
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間承擔(dān)的科研任務(wù)與主要成果
致謝
個人簡歷



本文編號:3794158

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