發(fā)布時(shí)間：2023-04-11 23:11

　　目的:研究心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT1)對(duì)人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞(h UCB-MSCs)向神經(jīng)方向誘導(dǎo)及存活的作用,并探討磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信號(hào)通路在此過(guò)程中的機(jī)制。方法:(1)通過(guò)密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選法從人臍血中分離、培養(yǎng)、純化間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),流式細(xì)胞術(shù)鑒定;(2)采用不同感染復(fù)數(shù)(50,100,200 PFU/cell)的Adv-CT1-EGFP轉(zhuǎn)染h UCB-MSCs,摸索最佳轉(zhuǎn)染復(fù)數(shù);(3)選用感染復(fù)數(shù)100PFU/cell轉(zhuǎn)染h UCB-MSC后,用谷氨酸、無(wú)血清高糖及維甲酸為神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基(NIM),利用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)誘導(dǎo)后6h及4d神經(jīng)蛋白巢蛋白(nestin)及β-微管蛋白Ⅲ(βⅢ-tubulin)表達(dá);(4)CCK8及TUNEL技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)誘導(dǎo)分化后6h及4d細(xì)胞存活及凋亡率;(5)加或不加PI3K/Akt特異性阻斷劑LY294002,用Western blot法分別檢測(cè)神經(jīng)誘導(dǎo)分化后細(xì)胞Akt、p-Akt及凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bak、Bcl-2、caspase3及cleved-caspase3表達(dá)。結(jié)果:(1)密度梯度結(jié)合貼壁篩選...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3789939