目的 探討細(xì)胞內(nèi)酸性環(huán)境下自噬／溶酶體途徑(autophagy-lysosome pathway)與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系。 方法 利用pAd-miR-NHE1病毒懸液感染SH-SY5Y細(xì)胞,制備NHE-1基因敲低細(xì)胞模型。選擇合適的培養(yǎng)基,以制備細(xì)胞內(nèi)酸化模型。經(jīng)過篩選,選擇pH為5.8的酸性培養(yǎng)基培養(yǎng)pAd-miR-NHE1病毒感染后的細(xì)胞。將細(xì)胞分為三組：正常細(xì)胞組、細(xì)胞內(nèi)酸化組和陰性對(duì)照組(NC組)。在透射電鏡下觀察正常細(xì)胞組、NC組及在酸性環(huán)境負(fù)荷下0.5h、2h、4h、8h的細(xì)胞內(nèi)酸化組自噬體的形成,線粒體形態(tài)及溶酶體數(shù)目的變化,Western Blot檢測(cè)自噬標(biāo)記物L(fēng)C3Ⅱ和LC3Ⅰ的表達(dá)。 結(jié)果 1、透射電鏡下,正常組和NC組線粒體形態(tài)及溶酶體數(shù)目正常,NHE-1基因敲低細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后換成pH為5.8的酸性培養(yǎng)基培養(yǎng),測(cè)得細(xì)胞內(nèi)pH為6.65。較正常細(xì)胞組(pHi為7.27)和陰性對(duì)照組(pHi為7.24)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。在此酸性環(huán)境負(fù)荷下0.5至4h可見線粒體腫脹,變形,溶酶體數(shù)目增多,自噬囊泡增多,自噬小體形成。8h可見一到兩個(gè)溶...

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文論著摘要
英文論著摘要
英文縮略語表
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性及局限性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
附錄
    綜述
        參考文獻(xiàn)
    在學(xué)期間科研成績(jī)
    致謝
    個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3780211