目的：檢測MG患者PBMCs中miRNA-146a的表達水平；研究抑制miRNA-146a后對Torpedo AchR α146-162(Tα)肽段刺激后的小鼠AchR特異性B細胞活化的影響及可能機制,探討miRNA-146a在MG中的作用,尋找抑制MG中AchR特異性免疫反應(yīng)的治療新方法。 方法：以熒光定量PCR檢測MG患者組及健康對照組PBMCs中miR-146a的表達水平。合成miR-146a的反義互補鏈AntagomiR-146a片段作為抑制劑,并以結(jié)構(gòu)相似的無意義片段作為對照物；免疫磁珠分選小鼠脾臟B、T細胞并測定細胞純度及活性；脂質(zhì)體HiPerFect負載FITC標(biāo)記的AntagomiR-146a轉(zhuǎn)染B細胞,流式細胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率；設(shè)置空白組、Tα組、Tα+抑制劑組、Tα+對照組,將T、B細胞按照1：3比例共培養(yǎng)2天后,除空白組外均予以Tα刺激,同時Tα+抑制劑組予以AntagomiR-146a、Tα+對照組予以對照物干預(yù)。干預(yù)后第3天分選B細胞,熒光定量PCR檢測miR146a的表達水平、流式檢測細胞表面標(biāo)志CD40、CD80、CD86的表達水平；Western Blot...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
縮略詞說明
前言
第一章 材料與方法
    1.1 實驗流程
    1.2 實驗材料
    1.3 實驗方法
    1.4 數(shù)據(jù)分析及處理
第二章 結(jié)果
    2.1 MG患者PBMCs中miR-146a的表達水平
    2.2 分選后所得細胞純度及活性、抑制劑轉(zhuǎn)染效率
    2.3 小鼠B細胞中miR-146a的表達水平
    2.4 小鼠B細胞表面CD40、CD80、CD86的表達水平
    2.5 小鼠B細胞中TLR4、NF-κB及Bcl-2蛋白的表達水平
第三章 討論
    3.1 MG患者PBMCs中miRNA-146a的表達水平增高
    3.2 MiR-146a對AchR特異性B細胞的作用
    3.3 MiR-146a調(diào)控AchR特異性B細胞TLR4/NF-κB信號通路的可能機制
第四章 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3769596