目的:長鏈非編碼RNA在調(diào)節(jié)免疫功能方面起到重要的作用。然而這些長鏈非編碼RNA在慢性炎性疾病,如多發(fā)性硬化中的作用機(jī)制尚不完全清楚。因此在多發(fā)性硬化病人的外周血單個核細(xì)胞中,我們檢測了長鏈非編碼RNA的表達(dá)譜,以及它們可能發(fā)揮的作用。方法:在這個研究當(dāng)中,我們按照McDonald criteria診斷標(biāo)準(zhǔn)入組了26個多發(fā)性硬化患者。在這26個多發(fā)性硬化患者當(dāng)中,我們隨機(jī)選擇6個作基因芯片高通量檢測�；蛐酒瑱z測技術(shù)識別出具有表達(dá)差異的長鏈非編碼RNA,然后我們應(yīng)用實時定量PCR技術(shù)對所檢測的RNA進(jìn)行驗證。我們應(yīng)用Gene Ontology（GO）和相關(guān)性分析的方法對長鏈非編碼RNA進(jìn)行注釋,使用Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）的方法,對長鏈非編碼RNA富集的通路進(jìn)行分析。并且使用“cis”和“trans”的模型對長鏈非編碼RNA和編碼RNA之間的調(diào)控關(guān)系進(jìn)行闡述。結(jié)果:與健康對照的外周血單個核細(xì)胞相比,在多發(fā)性硬化患者中,我們檢測到了2353條表達(dá)上調(diào)的長鏈非編碼RNA,389條下調(diào)的長鏈非編碼RNA,1037條上調(diào)的mRN... 

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要 1
Abstract 1
中文摘要 2
Abstract 2
中文摘要 3
Abstract 3
縮略語/符號說明
第一部分 多發(fā)性硬化病人單個核細(xì)胞長鏈非編碼RNA的表達(dá)譜
    前言
        研究現(xiàn)狀、成果
        研究目的、方法
    1.1 對象和方法
        1.1.1 研究人群和實驗設(shè)計
        1.1.2 外周血單個核細(xì)胞的提取
        1.1.3 RNA的提取和基因芯片技術(shù)
        1.1.4 實時定量PCR驗證
        1.1.5 長鏈非編碼RNA的共表達(dá)分析以及基因功能富集
        1.1.6 靶基因預(yù)測
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 長鏈非編碼RNA和編碼RNA在多發(fā)性硬化中的表達(dá)譜
        1.2.2 多發(fā)性硬化中差異基因表達(dá)的驗證
        1.2.3 長鏈非編碼RNA的功能富集
        1.2.4 差異表達(dá)長鏈非編碼RNA的“Trans”調(diào)控
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 Linc-MAF-4通過MAF調(diào)節(jié)Th1/Th2分化參與到多發(fā)性硬化的發(fā)病機(jī)制中
    前言
        研究現(xiàn)狀、成果
    2.1 對象和方法
        2.1.1 研究人群和實驗設(shè)計
        2.1.2 外周血單個核細(xì)胞的分離
        2.1.3 T細(xì)胞的體外分化實驗
        2.1.4 腺病毒的轉(zhuǎn)染
        2.1.5 胞內(nèi)細(xì)胞因子的染色
        2.1.6 RNA的提取和實時定量PCR
        2.1.7 ELISA
        2.1.8 臨床評估
        2.1.9 影像學(xué)
        2.1.10 統(tǒng)計分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 基因芯片分析顯示在多發(fā)性硬化病人PBMC中l(wèi)inc-MAF-4表達(dá)上調(diào),而MAF表達(dá)下調(diào)
        2.2.2 Linc-MAF-4和MAF的表達(dá)分別受Th1和Th2分化的誘導(dǎo)……
        2.2.3 在多發(fā)性硬化中T細(xì)胞向Th2分化時linc-MAF-4表達(dá)下調(diào)
        2.2.4 Linc-MAF-4可以促進(jìn)多發(fā)性硬化CD4+T細(xì)胞的激活
        2.2.5 存在linc-MAF-4高表達(dá)的多發(fā)性硬化病人有更高的年復(fù)發(fā)率和更多的中樞病灶
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三部分 DDIT4和相關(guān)的lncDDIT4通過DDIT4/TSC/mTOR通路調(diào)節(jié)Th17細(xì)胞的分化
    前言
        研究現(xiàn)狀、成果
        研究目的、方法
    3.1 對象和方法
        3.1.1 研究對象
        3.1.2 外周血單個核細(xì)胞的分離
        3.1.3 T細(xì)胞的體外分化實驗
        3.1.4 腺病毒的轉(zhuǎn)染
        3.1.5 胞內(nèi)細(xì)胞因子的染色
        3.1.6 RNA的提取和實時定量PCR
        3.1.7 ELISA
        3.1.8 Western Blot
        3.1.9 統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 基因芯片分析表明lncDDIT4和DDIT4在多發(fā)性硬化患者PBMC中表達(dá)上調(diào)
        3.2.2 DDIT4mRNA和lncDDIT4的表達(dá)主要受Th17細(xì)胞分化誘導(dǎo)……
        3.2.3 在體外實驗中DDIT4mRNA和lncDDIT4抑制了Th17細(xì)胞的分化
        3.2.4 在多發(fā)性硬化中l(wèi)ncDDIT4通過直接作用于DDIT4抑制了Th17細(xì)胞的分化
        3.2.5 LncDDIT4抑制DDIT4/mTOR信號通路
        3.2.6 LncDDIT4通過作用于DDIT4抑制DDIT4/mTOR信號通路
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 趨化因子在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的作用
    前言
    1 CX3CL1/CX3CR1
        1.1 CX3CL1/CX3CR1的結(jié)構(gòu)
        1.2 CX3CL1/CX3CR1在人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)的分布
        1.3 CX3CL1/CX3CR1和血腦屏障的通透性
        1.4 CX3CL1/CX3CR1和神經(jīng)保護(hù)
        1.5 CX3CL1/CX3CR1和多發(fā)性硬化
        1.6 CX3CL1/CX3CR1和卒中
        1.7 CX3CL1/CX3CR1和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎
    2 CXCL12/CXCR4
        2.1 CXCL12的結(jié)構(gòu)
        2.2 CXCL12/CXCR4在人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)的分布
        2.3 CXCL12/CXCR4和血腦屏障的通透性
        2.4 CXCL12/CXCR4和神經(jīng)保護(hù)
        2.5 CXCL12/CXCR4和多發(fā)性硬化
        2.6 CXCL12/CXCR4和卒中
    3 CCL2/CCR2
        3.1 CCL2的結(jié)構(gòu)
        3.2 CCL2/CCR2在人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)的分布
        3.3 CCL2/CCR2和血腦屏障的通透性
        3.4 CCL2/CCR2和神經(jīng)保護(hù)
        3.5 CCL2/CCR2和多發(fā)性硬化
        3.6 CCL2/CCR2和卒中
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3730177