發(fā)布時間：2017-05-17 09:00

  本文關鍵詞：不同級別腦膠質瘤中差異microRNA的表達譜研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腦膠質瘤是最常見的顱內原發(fā)性腫瘤,約占顱內腫瘤的50%-60%。腫瘤具有浸潤性生長、易復發(fā)、侵襲性強、血管豐富等惡性生物學特征,患者預后較差,平均生存期較短。隨著表觀遺傳學和分子遺傳學的不斷發(fā)展,大量研究從分子水平和細胞水平揭示膠質瘤進展的機制。Micro RNAs(mi RNAs)是一類內源性非編碼小RNA(約22nt),通過與靶基因非完全互補結合,在轉錄后水平負性調控靶基因的表達。包括腦膠質瘤在內的許多腫瘤中,都觀察到mi RNA的表達異常,并影響細胞的增殖、凋亡、侵襲、血管生成等重要的生物學過程。目前大量的研究集中在膠質瘤進展過程中miRNA的異常及其發(fā)揮的作用,對級別特異的miRNA表達譜研究較少。本研究采用mi RNA芯片技術,通過對比腫瘤及配對的瘤周組織,篩選出不同級別腦膠質瘤中差異mi RNA分子的表達譜,為尋找腦膠質瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用及不同級別間特異的mi RNA分子提供參考。異檸檬酸脫氫酶1(Isocitrate dehydrogenases1,IDH1)突變和MGMT基因啟動子甲基化在膠質瘤中普遍存在,和患者預后關系密切。有研究報道:IDH1基因突變的膠質瘤細胞的組蛋白甲基化程度更高;IDH1和MGMT聯合能更好的預測膠質瘤患者預后。IDH1和MGMT在腦膠質瘤的進展過程中是否受mi RNA調控從而形成內在關聯。進一步探討二者之間的關聯性及其可能的機制,將為膠質瘤患者的診治提供更多理論依據。實驗方法:第一部分收集臨床腦膠質瘤標本,提取組織總RNA,利用mi RNA芯片篩選出腦膠質瘤和配對瘤周組織中差異表達的mi RNA分子。q RT-PCR驗證mi RNA芯片結果的可靠性。生物信息學軟件預測這些mi RNA潛在的靶基因。第二部分直接測序法檢測腦膠質瘤樣本中IDH1突變情況。第三部分n MSP法和MSP-DHPLC法檢測膠質瘤組織中MGMT基因突變的情況。第四部分卡方檢驗分析IDH1基因突變和MGMT基因啟動子甲基化的關聯性。結果:1.腦膠質瘤中差異miRNA的表達譜分析(1)Mi RNA芯片技術是一種高效可靠的高通量分析腦膠質瘤差異mi RNA表達譜的方法(2)通過9例膠質瘤組織和與之配對的瘤周組織對比,利用mirna芯片分析了1926個mirna分子。共篩選出13個具有明顯差異表達的mirna分子,其中表達水平上調的mirna分子12個,表達水平下調的1個。(3)在whoii、whoiii、whoiv級腦膠質瘤中分別有8、9、15個mirna分子表達異常。(4)首次發(fā)現mir-4489在腦膠質瘤中低表達,mir-4489可能在腫瘤進展中發(fā)揮重要作用。(5)腦膠質瘤發(fā)展過程中,mir-106b-25cluster可能作為mir-17-92cluster的輔助,提高腫瘤的惡性程度。(6)利用生物信息學軟件對13個差異表達的mirna分子的靶基因進行預測,共找到926個潛在的靶基因。這些基因主要富集在與神經系統(tǒng)和腫瘤相關的生物學過程和信號通路上。2.腦膠質瘤中idh1基因突變檢測與分析(1)46.62%(62/133)的膠質瘤患者檢測出idh1基因突變。突變主要發(fā)生于whoii級、whoiii級膠質瘤和繼發(fā)性膠質母細胞瘤。(2)膠質瘤患者idh1突變和患者年齡顯著相關(p=0.001),兩者的相關度為r=0.296。3.腦膠質瘤中mgmt基因啟動子甲基化表達研究(1)經nmsp法檢測,66.33%(65/98)的腦膠質瘤組織中發(fā)生mgmt基因啟動子甲基化。經msp-dhplc法檢測,65.71%(23/35)的腦膠質瘤組織中發(fā)生mgmt基因啟動子甲基化。(2)四格表x2檢驗比較nmsp和msp-dhplc法檢出率的一致性,兩種方法檢出率差異無統(tǒng)計學意義(x2=0.004,p=0.948)。(3)spearman等級相關分析提示:mgmt啟動子甲基化和腦膠質瘤病理級別的相關性不顯著(p0.05),與患者年齡也無明顯相關性(p=0.654)4.idh1突變與mgmt基因啟動子甲基化關聯性分析:(1)x2檢驗進行關聯度分析提示:idh1突變與mgmt基因啟動子甲基化關聯顯著(x2=6.57,p=0.01),列聯系數c=0.217,二者低度相關。(2)926個潛在的靶基因中,不包括mgmt和idh1。提示篩選出的13個差異表達的mirna不直接調控mgmt和idh1的表達。結論:綜上所述,本文研究表明:1.MiRNA芯片技術是腦膠質瘤中尋找分子標記的可靠方法。2.利用mi RNA芯片篩選出不同級別腦膠質瘤中差異mi RNA的表達譜,為進一步尋找級別特異和腫瘤惡性進展中重要的mi RNA提供了重要參考。3.本研究首次發(fā)現mi R-4489在腦膠質瘤中低表達,其在腫瘤中的作用有待進一步研究。4.IDH1突變和MGMT啟動子甲基化存在著關聯性,二者在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中可能存在調控關系。5.篩選出的mi RNA并不直接調控MGMT和IDH1基因,這些mi RNA是否參與IDH1及MGMT調控及其機制有待進一步研究。
【關鍵詞】：microRNA芯片 IDH1突變 MGMT基因啟動子甲基化 腦膠質瘤
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• Abstract6-9
• 摘要9-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 腦膠質瘤中差異micro RNA的表達譜分析14-29
• 2.1 材料方法14-19
• 2.2 結果19-26
• 2.3 討論26-28
• 2.4 小結28-29
• 第三章 腦膠質瘤中IDH1基因突變檢測與分析29-38
• 3.1 材料方法29-32
• 3.2 結果32-36
• 3.3 討論36-37
• 3.4 小結37-38
• 第四章 腦膠質瘤中MGMT基因啟動子甲基化的表達研究38-46
• 4.1 材料方法38-42
• 4.2 結果42-43
• 4.3 討論43-45
• 4.4 小結45-46
• 第五章 IDH1突變與MGMT基因啟動子甲基化關聯性分析46-48
• 5.1 方法46
• 5.2 結果46-47
• 5.3 討論47
• 5.4 小結47-48
• 全文總結48-49
• 參考文獻49-57
• 文獻綜述Micro RNA在腦膠質瘤診斷和化療中的作用57-64
• 參考文獻61-64
• 碩士期間主要發(fā)表論文及獲得的獎勵64-65
• 致謝65-66
• 附件66

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1 張慶林;腦膠質瘤的治療 前言[J];山東醫(yī)藥;2001年07期

2 韓立虎,葉應湖,王國安;血管內皮生長因子、微血管密度在腦膠質瘤中的表達[J];咸寧醫(yī)學院學報;2001年04期

3 李煜;腦膠質瘤誤診10例分析[J];中國社區(qū)醫(yī)師;2002年14期

4 王瑞民,田嘉禾,劉雁翎,陳英茂;目測分級法鑒別腦膠質瘤復發(fā)或殘存的價值[J];中華核醫(yī)學雜志;2003年02期

5 趙希鵬;腦膠質瘤病一例報告[J];青海醫(yī)藥雜志;2003年09期

6 陳燦中;5例腦膠質瘤病的診斷和治療[J];云南醫(yī)藥;2004年04期

7 張華楸,舒凱,葉飛,郭東升,牛洪泉,雷霆,李齡;腦膠質瘤病的診斷和治療[J];中華神經醫(yī)學雜志;2005年06期

8 ;《腦膠質瘤》出版[J];中華神經外科雜志;2007年09期

9 遲鴻冰;邊海泉;;腦膠質瘤超聲表現1例[J];中國超聲醫(yī)學雜志;2008年05期

10 廉曉宇;牛廣宇;;腦膠質瘤治療展望[J];黑龍江醫(yī)藥科學;2009年02期

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1 付學海;石梅;肖鋒;;分次伽馬刀治療腦膠質瘤的療效分析[A];中華醫(yī)學會放射腫瘤治療學分會六屆二次暨中國抗癌協(xié)會腫瘤放療專業(yè)委員會二屆二次學術會議論文集[C];2009年

2 傅相平;李安民;;腦膠質瘤瘤區(qū)化療的臨床研究[A];中華醫(yī)學會神經外科學分會第九次學術會議論文匯編[C];2010年

3 殷增進;;腦膠質瘤伽馬刀治療臨床分析[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

4 汪志明;陳淑珍;王林;;中西醫(yī)結合治療腦膠質瘤24例報道[A];第八屆全國中西醫(yī)結合腫瘤學術會議論文集[C];2000年

5 沈宏;鄭學勝;祝向東;傅偉明;胡未偉;黃欣;朱永堅;李立;龔江標;;腦膠質瘤病理特征與預后[A];2006年浙江省神經外科學術會議論文匯編[C];2006年

6 盧剛;吳旭;;腦膠質瘤放、化療前后血腦屏障的組織學研究[A];2006年浙江省神經外科學術會議論文匯編[C];2006年

7 祝鳴蘭;方衛(wèi)琴;;~(125)Ⅰ粒子治療腦膠質瘤15例的護理[A];全國外科、神經內外科護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2006年

8 熊曉鵬;胡超蘇;;腦膠質瘤的放射治療臨床研究進展[A];第四屆中國腫瘤學術大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術會議論文集[C];2006年

9 蔣恒;楊偉志;高黎;雷明芳;石慧珍;徐國鎮(zhèn);;腦膠質瘤分次照射生物效應的實驗研究[A];2007第六屆全國放射腫瘤學學術年會論文集[C];2007年

10 姚瑜;葉紅星;湯旭群;花瑋;史之峰;高曉寧;汪洋;汪寅;吳勁松;秦智勇;毛穎;周良輔;;腦膠質瘤個體化綜合治療體系的建立和發(fā)展[A];2011中華醫(yī)學會神經外科學學術會議論文匯編[C];2011年

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1 鄒爭春 朱廣平 記者 陳磊;不用開刀就能“精確定位”腦膠質瘤[N];科技日報;2013年

2 鄒爭春 朱廣平;腦膠質瘤診斷有望從“有創(chuàng)”到“無創(chuàng)”[N];中國醫(yī)藥報;2013年

3 張獻懷;我國腦膠質瘤研究獲新進展[N];大眾科技報;2007年

4 本報通訊員 張獻懷;對腦膠質瘤進行局部強力“打擊”[N];大眾科技報;2007年

5 張獻懷;腦膠質瘤別急著手術[N];健康時報;2007年

6 張獻懷;科學家提出對腦膠質瘤應進行局部強力打擊[N];科技日報;2007年

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8 張獻懷;對腦膠質瘤應進行局部強力打擊[N];中國醫(yī)藥報;2007年

9 健康時報特約記者 朱立明;切腦膠質瘤用超聲引導[N];健康時報;2007年

10 通訊員 張獻懷;腦膠質瘤臨床研究與治療獲新進展[N];大眾科技報;2009年

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3 吳秀偉;Rab27a對人腦膠質瘤細胞生物活性的影響及其在老年腦膠質瘤中的臨床應用[D];安徽醫(yī)科大學;2014年

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7 周菊英;腦膠質瘤綜合熱療與放療的實驗研究[D];蘇州大學;2002年

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5 李政;膠質瘤MGMT的表達及意義[D];四川醫(yī)科大學;2015年

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8 宋磊;～1H-MRS在腦膠質瘤診斷及分級中的應用[D];山東大學;2007年

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10 楊初蔚;腦膠質瘤危險因素的病例對照研究[D];蘭州大學;2008年

  本文關鍵詞：不同級別腦膠質瘤中差異microRNA的表達譜研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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