小膠質(zhì)細(xì)胞的激活參與多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生與發(fā)展,包括抑郁癥,阿爾茲海默癥,孤獨(dú)癥譜系障礙等疾病。小膠質(zhì)細(xì)胞具有M1型（經(jīng)典型激活）和M2型（替代型激活）兩種不同的激活表型,這兩種不同激活表型的小膠質(zhì)細(xì)胞在大腦中發(fā)揮著截然不同的生物學(xué)功效。M1型小膠質(zhì)細(xì)胞主要表達(dá)促炎性細(xì)胞因子,擴(kuò)大神經(jīng)炎癥響應(yīng),造成組織損傷,發(fā)揮神經(jīng)毒害性作用;而M2型小膠質(zhì)細(xì)胞則能夠表達(dá)更多的抗炎性細(xì)胞因子以及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,抑制神經(jīng)炎癥響應(yīng),促進(jìn)組織修復(fù),發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)性作用。因此,探究小膠質(zhì)細(xì)胞激活表型的轉(zhuǎn)換機(jī)制具有十分重要的意義。在本課題中,我們通過檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞在干擾素-γ（IFN-γ）處理后激活表型的變化,探究小膠質(zhì)細(xì)胞在IFN-γ刺激下的自穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)過程,并進(jìn)一步探索在此過程中的潛在分子機(jī)制。我們通過分析小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞因子表達(dá)水平,以及對(duì)于神經(jīng)干/祖細(xì)胞（NSPCs）增殖與分化的影響,以確定小膠質(zhì)細(xì)胞處于何種激活表型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,IFN-γ處理一段時(shí)間后的小膠質(zhì)細(xì)胞,并不是始終表現(xiàn)為具有神經(jīng)毒性的M1激活表型,而是在IFN-γ處理48 h后,激活表型由M1型向M2型轉(zhuǎn)換,表達(dá)的抗炎性細(xì)胞因子與神... 

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 研究背景及意義
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 小膠質(zhì)細(xì)胞在CNS疾病中的作用
        1.2.2 不同激活表型小膠質(zhì)細(xì)胞的特征
        1.2.3 PPAR-γ調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞激活表型
    1.3 本課題的研究目的及內(nèi)容
第二章 IFN-γ激活的小膠質(zhì)細(xì)胞呈現(xiàn)出時(shí)序相關(guān)的表型轉(zhuǎn)換
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑來源
        2.2.4 原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)與刺激
        2.2.5 免疫熒光染色
        2.2.6 實(shí)時(shí)定量PCR
        2.2.7 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試(ELISA)
        2.2.8 NSPCs培養(yǎng)
        2.2.9 小膠質(zhì)細(xì)胞與NSPCs共培養(yǎng)
        2.2.10 條件培養(yǎng)基培養(yǎng)NSPCs
        2.2.11 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 IFN-γ處理小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
        2.3.2 IFN-γ處理小膠質(zhì)細(xì)胞增殖能力的變化
        2.3.3 IFN-γ處理的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的m RNA水平變化
        2.3.4 IFN-γ處理的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的蛋白水平變化
        2.3.5 IFN-γ處理12 h、48 h的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)NSPCs增殖與分化的影響
        2.3.6 IFN-γ處理12 h、48 h的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元成熟的影響
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第三章 PPAR-γ途徑參與IFN-γ激活小膠質(zhì)細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)換
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑來源及配制
        3.2.4 原代小膠質(zhì)細(xì)胞給藥刺激
        3.2.5 蛋白免疫印跡(Western Blot)
        3.2.6 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試(ELISA)
        3.2.7 實(shí)時(shí)定量PCR
        3.2.8 腹腔注射
        3.2.9 側(cè)腦室注射
        3.2.10 免疫熒光染色
        3.2.11 行為學(xué)檢測(cè)
        3.2.12 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 IFN-γ處理小膠質(zhì)細(xì)胞中PPAR-γ表達(dá)水平的變化
        3.3.2 GW9662對(duì)IFN-γ處理的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的影響
        3.3.3 IFN-γ與 GW9662 共處理的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)NSPCs增殖與分化的影響
        3.3.4 Pioglitazone對(duì) IFN-γ處理的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的影響
        3.3.5 IFN-γ與 Pioglitazone共處理的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)NSPCs增殖與分化的影響
        3.3.6 Pioglitazone調(diào)節(jié)IFN-γ誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥
        3.3.7 Pioglitazone改善IFN-γ誘導(dǎo)的小鼠異常行為
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 后續(xù)展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]法舒地爾通過抑制腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞活化并促進(jìn)其M2極化而改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠認(rèn)知功能[J]. 尉杰忠,谷青芳,閆玉清,余鴻強(qiáng),郭敏芳,劉春云,宋國(guó)斌,柴智,王青,肖保國(guó),張漢霆,降雨強(qiáng),馬存根.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(12)



本文編號(hào)：3709761