Pygo2蛋白作為Wnt信號通路下游新功能蛋白，其表達紊亂與人腦膠質瘤惡性程度密切相關，調控機制非常復雜，很多機制尚不清楚。本實驗旨在探討人腦膠質瘤中異常表達的miRNA對Pygo2蛋白的可能調控作用。 目的：研究miRNA靶向Pygo2在人腦膠質瘤的表達及作用機制 方法：利用生物信息學預測軟件（targetscan，miRanda，PicTar等）預測Pygo2的miRNAs，進而通過人腦膠質瘤miRNA表達譜芯片檢測系統(tǒng)篩選候選的靶向Pygo2-3’UTR的miRNAs。針對差異表達最大的miRNA，首先構建成含有突變位點Pygo2-3’UTR的熒光素酶報告載體，然后利用Pygo2-miRNA過表達質粒下調Pygo2，從而抑制膠質瘤細胞的增殖及侵襲。 結果：生物信息學預測軟件預測出37個與Pygo2相關的miRNAs，結合人腦膠質瘤miRNA表達譜芯片低表達結果，發(fā)現(xiàn)Pygo2可能受包括miR-31、miR-34c-5p、miR-195、miR-214在內13個miRNAs調控。熒光素酶報告基因活性、real-time PCR驗證及western blot實驗提示... 

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

miRNAs在U87和CHG-5細胞中的相對表達情況

pGL3-control載體示意圖

miRNAs熒光素酶相對表達情況

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Pygo2轉基因小鼠模型的建立及表型的初步分析[J]. 袁圓陽,駱啟聰,李超,李博安.  廈門大學學報(自然科學版). 2010(02)



本文編號：3698488